【摘要】：百合是觀賞上重要的鮮切花之一,在世界范圍內(nèi)的花卉市場上占有重要的份額。但是百合花粉量大,百合花藥碩大,敞開的花型使得百合花粉極易受到污染,同時也不可避免的污染其他花藥。且人工摘除又費時費力,因此,培育出雄性不育百合有較大的現(xiàn)實經(jīng)濟價值及潛在育種價值。本研究以花藥退化型雄性不育百合新品種'無粉白'及其重組自交系中有花粉百合為研究對象,利用轉(zhuǎn)錄組和表達譜對不用品系不同發(fā)育時期的花藥進行研究,整理組裝拼接得到轉(zhuǎn)錄本和差異基因,并與生物數(shù)據(jù)庫進行功能分析。同時利用百合不同部位做外植體,進行愈傷組織和不定芽的誘導(dǎo),以及根系的誘導(dǎo),建立離體快速繁殖體系。本試驗的主要研究材料為正常有粉雄蕊按大、中、小及無粉品種'無粉白'雄蕊按大、中、小分六個樣品,主要結(jié)果如下:1.構(gòu)建了百合花粉不同發(fā)育時期雄蕊混合樣品文庫,進行轉(zhuǎn)錄組測序。對原始數(shù)據(jù)處理,整理得到206942序列重疊群(contig)進而得到98551條轉(zhuǎn)錄本(transcript)。從頭拼接得到 37699 條 Unigene,對得到的 Unigene 與 GO、KEGG、eggNOG、SwissProt經(jīng)過聚類分析完成功能注釋。2.對有花藥百合和花藥退化型百合不同發(fā)育時期雄蕊進行表達譜分析,共得到69,436,802條reads,通過整體質(zhì)量評估,顯示各樣品基因的表達模式符合mRNA不均一性、冗余性的特征。所有時期所有樣品差異表達基因數(shù)量為5597,并且樣品間的表達差異趨勢不隨表達量大小變化而明顯變化。隨機選出某一個表達量有差異的基因,進行熒光定量驗證,比較表達譜和熒光定量PCR的結(jié)果反映表達譜數(shù)據(jù)的有效性,進而推測出差異基因的功能,為后續(xù)百合分子生物學(xué)研究提供依據(jù)。3.以珠芽和花器官為外植體誘導(dǎo)愈傷組織、以鱗片為外植體誘導(dǎo)分化不定芽和誘導(dǎo)不定芽生根,建立百合再生體系。明確珠芽誘導(dǎo)添加2,4-D 1.mg·L~(-1) + KT O.1mg·L~(-1);花被愈傷誘導(dǎo)添加2,4-D 3.0 mg L~(-1)和KT0.5mg L~(-1);花絲愈傷組織誘導(dǎo)添加2,4-D3.0mg·L~(-1),和0.5mg·L~(-1)。鱗片不定芽誘導(dǎo)添加 6-BA2.Omg·L~(-1) 和 NAA0.2mg·L~(-1),1/2MS 添加 NAAO.1mg·L~(-1),IBAO.1 mg·L~(-1)生根質(zhì)量好,移栽易成活。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S682.29
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本文編號：2548473