【摘要】：為保護(hù)野生臺灣獨(dú)蒜蘭(Pleione formosana),盡快建立臺灣獨(dú)蒜蘭的快繁體系,本文對江西井岡山野生臺灣獨(dú)蒜蘭進(jìn)行引種到溫室栽培,進(jìn)行人工授粉,所得蒴果和野生植株蒴果一同作為本研究的試驗(yàn)材料。將蒴果進(jìn)行4℃低溫保存,經(jīng)0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、10 d、13 d、20 d、25 d、30 d保存后對種子進(jìn)行活性檢測,以6-BA、NAA為2因素,各取3水平設(shè)計(jì)種子無菌萌發(fā)的試驗(yàn);以無菌萌發(fā)得到的原球莖為材料,以6-BA、NAA、蔗糖為3因素設(shè)計(jì)原球莖增殖的正交試驗(yàn),以6-BA、NAA、TDZ為3因素設(shè)計(jì)原球莖膨大的正交試驗(yàn);以前者萌發(fā)得到的原球莖為外植體,以6-BA、NAA、TDZ為3因素設(shè)計(jì)原球莖分化的正交試驗(yàn),以MS、1/2MS為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的NAA設(shè)計(jì)臺灣獨(dú)蒜蘭幼苗的生根試驗(yàn);以75%酒精、0.1%升汞、飽和次氯酸鈣為消毒劑,采用單次和二次消毒方法對臺灣獨(dú)蒜蘭根進(jìn)行消毒,用切段和研磨兩種方法進(jìn)行接種,分離提取菌根內(nèi)生真菌,探究臺灣獨(dú)蒜蘭根較好的消毒方法,以木屑和樹皮等比例混合物為培養(yǎng)基,將分離得到的菌根真菌和保存的種子共生萌發(fā)培養(yǎng),尋找能夠促進(jìn)種子萌發(fā)的真菌。1、低溫貯藏對種子活性0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、10 d、13 d、20 d、25 d、30 d進(jìn)行種子活性的檢測,0 d種子活性為76.25%,1 d種子活性為80.84%,2 d種子活性最高,為93.87%,3 d種子活性為92.24%并開始下降,在20 d的時(shí)候種子活性為83.28%,30 d時(shí)候種子活性下降到65.80%,由此可見最佳的播種時(shí)間為采摘貯藏2 d,最好在20 d內(nèi)進(jìn)行播種;通過觀察統(tǒng)計(jì)無菌萌發(fā)的萌發(fā)率均達(dá)到90%以上,其中最早萌發(fā)的培養(yǎng)基為1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,但是后期分化的幼芽體勢較弱;萌發(fā)后原球莖保持時(shí)間較久的培養(yǎng)基配比為1/2MS+0..5~1.0 mg/L NAA。2、最佳原球莖增殖的培養(yǎng)基為MS+0.2 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA+50 g/L蔗糖,增殖系數(shù)為3.150。通過分析增殖系數(shù)主體間效應(yīng)檢驗(yàn)得出6-BA、NAA對原球莖增殖作用顯著,蔗糖對原球莖的增殖作用不顯著。3、最佳蔗糖膨大培養(yǎng)基為MS(固體)+6%蔗糖,膨大系數(shù)為3.065;最佳激素膨大培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA,膨大系數(shù)為3.205,6-BA和NAA對原球莖膨大作用顯著,同時(shí)得出NAA比6-BA作用效果更顯著,TDZ對原球莖膨大作用不顯著。4、最佳分化培養(yǎng)基為MS+0.6 mg/L TDZ+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,分化率為84.1%,6-BA和NAA對原球莖分化效果顯著,TDZ對原球莖分化效果極顯著;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.5 mg/L NAA,生根率為85.4%,總株數(shù)為120株,總生根條數(shù)為213條,平均生根數(shù)為1.8條/株。5、優(yōu)化的消毒步驟為75%酒精30 s→0.1%升汞60 s,90 s,120 s,接種方法為研磨接種,分離提取到73種真菌;經(jīng)過共生萌發(fā)培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)7種內(nèi)生真菌不能促進(jìn)種子萌發(fā),66種內(nèi)生真菌能夠促進(jìn)種子萌發(fā)形成原球莖,其中29種能夠促進(jìn)種子萌發(fā)形成黃綠色原球莖,37種能夠促進(jìn)種子萌發(fā)形成綠色原球莖;隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,所有萌發(fā)的原球莖均沒有進(jìn)行分化形成幼苗。
[Abstract]:In order to protect wild (Pleione formosana), and establish its rapid propagation system, the wild garlic orchid of Jinggang Mountain, Jiangxi Province, was introduced into greenhouse and pollinated by artificial pollination. The obtained capsule and wild plant capsule were used as experimental materials in this study. The capsule was preserved at low temperature at 4 鈩，

本文編號：2320183