【摘要】：近年來,養(yǎng)殖中美洲黑石斑魚的“突眼”病癥嚴(yán)重影響著其苗種繁育工作,給其養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成了巨額經(jīng)濟(jì)損失。本文在探究引發(fā)美洲黑石斑魚(C.striata)患“突眼”癥的相關(guān)病原和其病理學(xué)影響中:運(yùn)用了生理生化和分子生物學(xué)、測(cè)酶活、顯微病理學(xué)、超微病理學(xué)等相關(guān)研究方法。研究結(jié)果如下:1.美洲黑石斑魚“突眼”癥病原菌的分離鑒定:美洲黑石斑魚的“突眼”癥狀表現(xiàn)為:眼球白濁、充血、異常增生。從眼球病灶部位分離純化得到一株優(yōu)勢(shì)菌,在TCBS培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速,菌落中部隆起、黃色,有黏性,桿狀菌,端生單鞭毛,屬于革蘭氏陰性菌,定名為CJG01。人工感染實(shí)驗(yàn)證實(shí):其對(duì)美洲黑石斑魚有較強(qiáng)的致病性,可引起幼魚眼球突出、脫落。解剖感染組的幼魚發(fā)現(xiàn):患病幼魚的肝臟、腎臟紅腫、脾臟腫大,腸道內(nèi)有淡黃色液體。其半致死濃度LD50為2.67×105 CFU/ml。API 20NE快速鑒定及相關(guān)生理生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:菌株CJG01的生長(zhǎng)溫度為28-37℃,最適溫度為28℃,在含鹽量0-5%之間的TSB培養(yǎng)基可生長(zhǎng),對(duì)弧菌抑制劑O/129敏感,氧化酶反應(yīng)陽性,鳥氨酸脫羧酶反應(yīng)陽性,V-P反應(yīng)陰性,可同化甘露醇、麥芽糖、蘋果酸,不能同化葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、癸酸、已二酸、檸檬酸、苯乙酸等,菌株CJG01的生理生化特性與哈維氏弧菌一致。對(duì)病原菌的16SrDNA序列對(duì)比分析及系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,菌株CJG01與哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)序列同源性最高,達(dá)99%。藥敏實(shí)驗(yàn)證實(shí),該菌株對(duì)氨芐西林、頭孢氨芐、頭孢拉定、諾氟沙星、青霉素、阿奇霉素、多粘菌素B,等8種藥物不敏感,對(duì)頭孢唑林、恩諾沙星、鏈霉素、紅霉素、克拉霉素,等4種藥物中度敏感,對(duì)抗生素頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他啶、氧氟沙星、洛美沙星、氟羅沙星、環(huán)丙沙星、氯霉素、新生霉素、新霉素、慶大霉素、卡那霉素、呋喃唑酮、利福平、四環(huán)素、米諾環(huán)素,等16種藥物敏感。2.哈維氏弧菌CJG01病原株對(duì)美洲黑石斑魚血清生化指標(biāo)的影響:與健康黑石斑魚相比,患病幼魚血清的總蛋白、白蛋白、甘油三酯、總膽固醇、尿素氮的含量顯著降低(P0.05),肌酐含量顯著增加(P0.05),球蛋白的含量沒有顯著性差異;患病幼魚血清的乳酸脫氫酶活性的顯著增強(qiáng),谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、溶菌酶的酶活性均顯著增強(qiáng)(P0.05);患病幼魚血清的K+含量的顯著降低(P0.05),Cl-含量顯著增加(P0.05),Na+、Ca2+的含量沒有顯著性差異。這表明患“突眼”癥的美洲黑石斑魚的,肌肉、肝臟、腎臟等組織器官損傷嚴(yán)重,肝功能、腎功能異常。3.哈維氏弧菌CJG01病原株對(duì)美洲黑石斑魚的顯微病理學(xué)影響:患病幼魚的眼球腫脹,含有囊狀物,晶狀體部位含有凝血塊;肌纖維損傷壞死;心臟肌節(jié)模糊不清,紅細(xì)胞增多;肝中央靜脈擴(kuò)張充血,肝細(xì)胞空泡變性,部分肝細(xì)胞核溶解、消失,大量的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)于肝細(xì)胞間質(zhì);脾臟組織壞死,紅細(xì)胞破裂,脾臟充血,淋巴細(xì)胞增多;部分黏膜細(xì)胞脫落、壞死,胃底腺細(xì)胞排列疏松,胃底腺細(xì)胞空泡變性;大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)于腸道黏膜層、黏膜下層,腸絨毛壞死;腎間質(zhì)淤血,大量紅細(xì)胞浸潤(rùn),腎小球毛細(xì)血管充血,腎小管管壁細(xì)胞空泡變性、壞死,細(xì)胞核溶解、消失;鰓組織的病理變化不顯著。4.哈維氏弧菌CJG01病原株對(duì)美洲黑石斑魚的超微病理學(xué)影響:患病幼魚的神經(jīng)突觸間質(zhì)充血,角膜的成纖維細(xì)胞壞死,膠原蛋白溶解。肌原纖維超微結(jié)構(gòu),H帶模糊,M線模糊,肌原纖維斷裂,線粒體數(shù)量減少,部分線粒體解體。心肌纖維的H帶不清楚,M線不清楚,I帶不清楚,Z線不清楚,肌原纖維斷裂。肝細(xì)胞腫大、變形,一些肝細(xì)胞核被擠壓,偏離細(xì)胞中心。細(xì)胞核膜界限模糊,胞質(zhì)內(nèi)的線粒體數(shù)量含量降低,部分線粒體解體。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)斷裂,空泡化嚴(yán)重,脂滴充滿整個(gè)肝細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞器溶解、彌散于細(xì)胞核周圍,溶酶體增多,部分肝臟細(xì)胞壞死、凋亡。脾臟組織的淋巴細(xì)淋巴細(xì)胞數(shù)量減少,淋巴細(xì)胞溶解死亡,細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞器崩解,核膜破壞�；疾∮佐~胃組織的細(xì)胞界限模糊,核膜破壞,細(xì)胞核濃縮,細(xì)胞器溶解。腸上皮細(xì)胞細(xì)胞界限模糊,細(xì)胞空泡化嚴(yán)重。腎上皮細(xì)胞部分壞死,細(xì)胞核溶解,同時(shí)細(xì)胞內(nèi)溶酶體含量增多,幼魚第一近曲小管,內(nèi)皮細(xì)胞壞死,細(xì)胞界限模糊,絨毛脫落。鰓絲,細(xì)胞界限清晰,細(xì)胞器完好,沒有發(fā)生明顯的病理變化。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S943

【參考文獻(xiàn)】

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1 謝書秋;;條紋鋸洦海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖技術(shù)[J];漁業(yè)信息與戰(zhàn)略;2014年04期

2 王海陽;黃郁蔥;丁q，

本文編號(hào)：2254926