本文選題：奶牛 + 乳房炎��； 參考：《黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：乳房炎是制約奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的重要疾病之一,多種致病菌均可誘發(fā)奶牛乳房炎,其中支原體型乳房炎近幾年備受關(guān)注。本研究旨在通過對(duì)我國(guó)北方黑龍江省、遼寧省、寧夏回族自治區(qū)、內(nèi)蒙古自治區(qū)、天津市規(guī)�；膛�(chǎng)支原體型乳房炎病原流行病學(xué)的調(diào)查,初步查明支原體型奶牛乳房炎的陽(yáng)性率及其與奶牛年齡、胎次、地區(qū)和年度的關(guān)系,為臨床防制支原體型奶牛乳房炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。首先,參照牛支原體GN1168株B0W43 00590基因序列(GenBank登錄號(hào):CP019639.1)以及l(fā)eachii支原體GN407株LPPA外膜蛋白編碼基因序列(GenBank登錄號(hào):HQ699892.1)設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物(531U28/1371L25)和(17U26/556L22),通過優(yōu)化PCR退火溫度等反應(yīng)條件,建立了牛支原體和leachii支原體的兩種PCR檢測(cè)方法。特異性試驗(yàn)結(jié)果顯示,這兩種PCR方法可以特異性擴(kuò)增牛支原體和leachii支原體,而與絲狀支原體山羊亞種(Mmc)、綿羊肺炎支原體(Mo)、絲狀支原體絲狀亞種(Mmm)、山羊支原體山羊肺炎亞種(Mccp)無交叉反應(yīng)。敏感性試驗(yàn)結(jié)果顯示,該方法檢測(cè)出牛支原體的最低濃度為104 CCU、leachii支原體的最低濃度為105 CCU。符合性試驗(yàn)結(jié)果顯示,該方法對(duì)兩種標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性支原體進(jìn)行檢測(cè),所檢測(cè)出的陽(yáng)性結(jié)果與支原體分離培養(yǎng)方法所檢測(cè)出的陽(yáng)性結(jié)果一致,符合率達(dá)到100%。上述結(jié)果表明,本研究建立的牛支原體和leachii支原體PCR檢測(cè)方法特異性強(qiáng)、敏感性高,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,可實(shí)現(xiàn)高通量快速檢測(cè)牛支原體和leachii支原體的目的。其次,應(yīng)用本研究建立的兩種PCR方法對(duì)采集于5個(gè)地區(qū)28個(gè)規(guī)�；膛�(chǎng)的539份臨床型乳房炎的乳汁樣品進(jìn)行檢測(cè),總體檢測(cè)結(jié)果顯示:共檢測(cè)到41例支原體,陽(yáng)性率為7.61%,其中包括2例leachii支原體,總陽(yáng)性率為0.371%,39例牛支原體,總陽(yáng)性率為7.24%。地區(qū)檢測(cè)結(jié)果顯示:黑龍江省12個(gè)牛場(chǎng)的275份樣品中,leachii支原體陽(yáng)性為2例,牛支原體陽(yáng)性為19例;遼寧省及寧夏回族自治區(qū)的97份樣品中未檢測(cè)到牛支原體和leachii支原體;天津市54份樣品中無leachii支原體陽(yáng)性,牛支原體陽(yáng)性為5例;內(nèi)蒙古自治區(qū)113份樣品中無leachii支原體陽(yáng)性,有15例牛支原體陽(yáng)性。年度檢測(cè)結(jié)果顯示:2010年的40份樣品中l(wèi)eachii支原體陽(yáng)性樣品1份,陽(yáng)性率為2.50%,牛支原體陽(yáng)性樣品4份,陽(yáng)性率為12%;2011年的85份樣品中l(wèi)eachii支原體陽(yáng)性樣品1份,陽(yáng)性率為1.17%,牛支原體陽(yáng)性樣品11份,陽(yáng)性率為12.9%;2016年的414份樣品中沒有檢測(cè)到leachii支原體,牛支原體陽(yáng)性樣品24份,陽(yáng)性率為5.23%。支原體型乳房炎與奶牛年齡、胎次相關(guān)性研究結(jié)果顯示:118頭2-3歲奶牛,5頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為4.24%;180頭3-5歲奶牛,12頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為6.67%;241頭5-7歲奶牛,24頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為9.96%;118頭1-2胎次奶牛,3頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為2.54%;180頭3-4胎次奶牛,12頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為6.67%;241頭5-6胎次奶牛,27頭陽(yáng)性,陽(yáng)性率為11.20%。綜上所述,本試驗(yàn)成功建立了牛支原體及l(fā)eachii支原體的PCR檢測(cè)方法。初步闡釋支原體型奶牛乳房炎在我國(guó)北方部分地區(qū)散發(fā)、少發(fā)的特點(diǎn),且該病與奶牛的年齡、胎次呈正相關(guān)。
[Abstract]:The results showed that mycoplasma and leachii mycoplasma could be amplified by PCR . The results showed that mycoplasma and leachii mycoplasma could be amplified by PCR . Mycoplasma and leachii mycoplasma were detected in 97 samples of samples from Liaoning province and Ningxia Hui Autonomous Region . The positive rate of mycoplasma infection was 1 . 17 % , positive rate was 6.67 % . The positive rate was 1 . 17 % , positive rate was 6.67 % .
【學(xué)位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S858.23

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2088558