本文關鍵詞： 花粉組織培養(yǎng) 苜蓿花藥 倍性鑒定 單倍體 培養(yǎng)基　出處：《內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：通過苜�；ㄋ幓蚧ǚ叟囵B(yǎng)獲得單倍體,進一步利用純系材料雜交育種,可充分發(fā)揮雜種優(yōu)勢,縮短育種年限并提高育種效率。本研究以花藥為材料對草原1號雜花苜蓿、呼倫貝爾黃花苜蓿和新疆大葉紫花苜蓿進行花粉組織培養(yǎng),通過固體與液體懸浮培養(yǎng)基、不同激素配比進行正交試驗誘導花藥愈傷組織,分化和生根培養(yǎng)后獲得再生植株,建立適宜的花藥組培再生體系;再生植株經(jīng)氣孔數(shù)初選、根尖染色體和流式細胞儀鑒定,確定染色體倍性。主要研究結(jié)果如下:(1)花藥愈傷組織的誘導,草原1號雜花苜蓿固體培養(yǎng)基優(yōu)于液體懸浮培養(yǎng)基,而呼倫貝爾黃花苜蓿與新疆大葉紫花苜蓿液體懸浮培養(yǎng)基優(yōu)于固體培養(yǎng)基,出愈率最高值分別為83.33%、70.00%、83.33%。根據(jù)正交試驗出愈率極差的分析,草原1號雜花苜蓿適宜的固體培養(yǎng)基為B5 +0.4 mg/L NAA+ 0.75 mg/L 2,4-D + 1.0 mg/L KT + 0.75 mg/L 6-BA;呼倫貝爾黃花苜蓿適宜的液體懸浮培養(yǎng)基為B5 + 0.4 mg/LNAA + 0.50 mg/L 2,4-D +3.0 mg/L KT +0.25 mg/L 6-BA;新疆大葉紫花苜蓿適宜的液體懸浮培養(yǎng)基為 MS + 0.2 mg/L NAA+ 2.0 mg/L 2,4-D + 3.0 mg/LKT+ 0.5mg/L 6-BA。(2)影響3種苜蓿花藥愈傷組織形成的主要激素種類不同。在固體培養(yǎng)過程中花藥愈傷形成主要因素,草原1號雜花苜蓿為KT、呼倫貝爾黃花苜蓿及新疆大葉紫花苜蓿為2,4-D;在液體懸浮培養(yǎng)過程中花藥愈傷形成主要因素,草原1號雜花苜蓿雄性不育株為KT、雄性可育植株為6-BA、呼倫貝爾黃花苜蓿及新疆大葉紫花苜蓿為2,4-D。(3)3種苜蓿花藥愈傷分化培養(yǎng)的適宜培養(yǎng)基為MS + 1.0 mg/L KT +0.2 mg/L NAA,分化率 58.33%-73.33%。(4)草原1號雜花苜蓿雄性不育植株、呼倫貝爾黃花苜蓿及新疆大葉紫花苜�；ㄋ幣嘤偕仓曛袉伪扼w植株分別為4株、1株、7株,分別占各自總株數(shù)的8.51%、20%、14%。
[Abstract]:Haploid was obtained through anther or pollen culture of alfalfa, and further utilization of hybrid breeding of pure lines could give full play to heterosis, shorten breeding period and improve breeding efficiency. Pollen tissue culture was carried out on Hulunbeir alfalfa and alfalfa with large leaves in Xinjiang. The callus of anther was induced by orthogonal experiment in solid and liquid suspension medium with different hormone ratios. After differentiation and rooting culture, regenerated plants were obtained. To establish a suitable regeneration system of anther tissue culture, to determine chromosome ploidy by primary selection of stomatal number, root tip chromosome and flow cytometry. The main results are as follows: 1) Callus induction of anther. The solid medium of Medicago sativa No. 1 was superior to the liquid suspension medium, while the liquid suspension medium of Hulunbeir alfalfa and Xinjiang alfalfa was superior to the solid medium. The highest rate of callus was 83.33, respectively. According to the orthogonal test, the analysis of the difference of callus rate was made. The suitable solid medium for Medicago sativa No. 1 is B50.4 mg/LNAA 0.75 mg/L 24-D 1.0 mg/L KT 0.75 mg/L 6-BA.The suitable liquid suspension medium for Hulunbeir alfalfa is B50.4 mg/LNAA 0.50 mg/L 2n4-D 3.0 mg/L KT 0.25 mg/L 6-BAand Xinjiang large leaf alfalfa. The suitable liquid suspension medium was MS 0.2 mg/L NAA 2.0 mg/L 2G 4-D 3.0 mg/LKT 0.5 mg / L 6-BA.2) the main hormone types affecting callus formation of three alfalfa anthers were different, and the main factors of anther callus formation were found in solid culture. The main factors of anther callus formation during liquid suspension culture were KT, Hulunbeier alfalfa and Xinjiang large leaf alfalfa. The suitable medium for anther callus differentiation of alfalfa was MS 1.0 mg/L KT 0.2 mg/L NAA, the male sterile plant was KT, the male fertile plant was 6-BAand Hulunbeir alfalfa and Xinjiang alfalfa were 24-D. The male sterile plant of Medicago sativa No. 1 in the grassland was 58.33% -73.33% and 58.33% -73.33%. The haploid plants of Huulunbeir alfalfa and Xinjiang large leaf alfalfa anther culture were 4 plants and 1 plant respectively, accounting for 8.51% of the total number of plants.
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S541

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本文編號：1519938