玉米內生鏈格孢多樣性及其生態(tài)功能研究
本文關鍵詞:玉米內生鏈格孢多樣性及其生態(tài)功能研究 出處:《鄭州大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】:內生真菌一般指那些在其生活史的某一階段或者整個生活史生長于植物體內,不引起宿主明顯病癥的真菌,其與植物的長期協(xié)同進化中,形成了一種復雜、特殊的關系,可以互惠共生,也可能是潛在病原菌,或者是潛在兼性腐生菌。鏈格孢屬真菌廣泛存在于自然界,能引起多種農(nóng)作物病害。鏈格孢也是大量植物的優(yōu)勢內生真菌,但目前對于內生鏈格孢屬真菌生活史及生態(tài)功能了解較少。通過對玉米優(yōu)勢內生真菌鏈格孢的研究,對闡明內生鏈格孢屬真菌與宿主的相互關系,了解內生鏈格孢生活史和生態(tài)功能,以及指導玉米耕作栽培具有重要意義。本實驗對實驗室分離保存的玉米內生鏈格孢真菌進行分析,表明內生鏈格孢在玉米體內的分布具有廣泛性及多樣性,對10個代表性形態(tài)型的菌株基于rDNA-ITS序列進行系統(tǒng)發(fā)育分析,均與小孢子種類聚在一起,通過ITS序列無法進行種級區(qū)分。通過形態(tài)學鑒定,10株鏈格孢均為小孢子種鏈格孢,初步鑒定:Y1為A.alternata,Y4為A.catalpae,Y5與Y6歸入A.tenuissima species-group,Y8為A.peponicola,Y9為A.ellisii,Y10為A.platycodonis,Y11歸入A.alternata species-group,Y12為A.triticimaculans,Y13為A.coicis。通過溶磷能力檢測、對玉米生長發(fā)育的影響、降解能力初步探討了玉米內生鏈格孢真菌生態(tài)功能,并且以一株產(chǎn)酶能力最強的菌株為研究對象,進行了某些生物學特性研究。在溶磷試驗中,10株鏈格孢菌均不能在PVK平板上形成透明圈,初步判斷其不具備溶磷作用。10株菌對玉米發(fā)芽率,苗期的株高、莖粗及根長均無顯著性影響。通過對玉米接種內生鏈格孢菌株,發(fā)現(xiàn)10株內生鏈格孢菌株對苗期玉米無致病性。而在與4種玉米病原菌的平板對峙試驗中,10株鏈格孢菌對4種玉米病原菌均顯示出抑制作用,其中菌株Y6對玉米禾谷鐮刀菌的抑菌率最高,達到了69.01%;菌株Y13對玉米大斑菌的抑制效果最好,達68.05%;菌株Y12對玉米圓斑抑制率達53.18%;菌株Y8對玉米彎孢菌的抑制率為67.03%。通過對10株鏈格孢菌株產(chǎn)纖維素酶、漆酶活性和對玉米秸稈的降解能力研究,發(fā)現(xiàn)鏈格孢屬內生真菌具有一定的腐生能力。通過革蘭氏碘液平板、愈創(chuàng)木酚及苯胺藍平板篩選,10株鏈格孢均能產(chǎn)纖維素酶及漆酶,不具有錳過氧化物酶及木質素過氧化物酶活性。通過纖維素酶活及漆酶酶活測定,菌株Y13的纖維素酶及漆酶活力均最高,以菌株Y13為代表,進行玉米秸稈降解實驗,實驗組秸稈失重率在10天、20天、30天分別為22%、34.7%、41.2%,高于對照組的10%、11.7%及12.5%,表明菌株Y13對秸稈有較好的降解力。研究菌株Y13在不同碳、氮源下的生長情況,結果表明,菌株Y13的最佳碳、氮源分別是麥芽糖、乳糖及蛋白胨。菌株Y13在不同碳、氮源下產(chǎn)漆酶能力有顯著差異,在碳源為麥芽糖及乳糖時產(chǎn)漆酶活力最高,氮源為蛋白胨時漆酶活力最高,與菌株生長的最適碳、氮源一致。通過上述研究,發(fā)現(xiàn)玉米內生鏈格孢屬真菌均屬于小孢子類群,但在形態(tài)、生理和遺傳上有一定的差異。玉米內生鏈格孢在玉米生長發(fā)育期,作為內生真菌存在于植物體內,可能會增強玉米對病原菌的抗性;玉米內生鏈格孢可產(chǎn)生纖維素酶及相關酶類,可以降解玉米秸稈,在內生菌階段結束后,可以腐生方式繼續(xù)生活。本研究對闡明內生鏈格孢屬真菌生態(tài)學功能,指導玉米耕作栽培和病害防治,以及對內生鏈格孢菌的資源開發(fā)與利用具有重要意義。
[Abstract]:Endophytic fungi generally refers to those who are in a stage of their life cycle or the life cycle of growth in the plant, do not cause obvious symptoms of host plants and fungi, the long-term coevolution, forming a complex and special relationship, can mutualism, may also be potential pathogens, or potential facultative saprophyte. Alternaria fungi widely exists in the nature, can cause various crop diseases. Alternaria is a large number of plant dominant endophytic fungi, but the endophytic fungi of the genus Alternaria life history and ecological function are poorly understood. Through research on Maize dominant endophytic fungi Alternaria, for clarifying the relationship between endophytic fungus Alternaria and host endophytic Alternaria, understand the life history and ecological function, as well as the guidance of corn cultivation is of great significance. This experiment on laboratory separation and preservation of corn endophytic Alternaria Analysis of fungal spore, indicated that endophytic Alternaria has universality and diversity in the distribution of maize, 10 representative strains based on morphological type rDNA-ITS sequence for phylogenetic analysis, and microspore species together, through the ITS to a level sequence. Through morphological identification, 10 strains all kinds of microspore of Alternaria Alternaria, preliminary identification: Y1 A.alternata, Y4 A.catalpae, Y5 and Y6 in A.tenuissima species-group, Y8 A.peponicola, Y9 A.ellisii, Y10 A.platycodonis, Y11 A.alternata Y12 A.triticimaculans in species-group, Y13, A.coicis. through the ability of phosphate detection effect on maize growth and development the preliminary study on degradation ability of corn endophytic Alternaria fungi ecological function, and to a strain of the enzyme producing ability strongest strains as the research object, studied some biological characteristics. Soluble phosphorus test, 10 strains of Alternaria alternata were not on the PVK panel to form a transparent circle, it does not have to determine the initial phosphate solubilization of.10 strains on the germination rate of maize seedling, plant height, stem diameter and root length had no significant effect on maize. Through inoculation endophytic Alternaria strain. 10 strains of endophytic Alternaria strains had no pathogenicity to the maize plant. In the plate confrontation test with 4 kinds of maize pathogenic bacteria, 10 strains of Alternaria on 4 maize pathogens showed inhibitory effects of Y6 on Maize strains of Fusarium graminearum highest inhibition rate reached 69.01%. The inhibitory effect of Y13 strains; exserohilumturcicum bacteria best, 68.05%; inhibition of strain Y12 on Maize round spot rate reached 53.18%; strain Y8 inhibition of Maize Curvularia rate for 67.03%. by 10 strains of Alternaria strains producing cellulase, laccase activity and degradability of corn straw, the chain genus Endophytic fungi have certain saprophytic ability. Through gram iodine tablet, screening of guaiacol and aniline blue plate, 10 strains producing cellulase and laccase were Alternaria, with manganese peroxidase and lignin peroxidase activity. The activity determination of cellulase activity and laccase enzyme, cellulase and laccase activity of strain Y13 were the highest, the strain Y13, degradation experiment of corn straw, straw weight loss rate in the experimental group for 10 days, 20 days, 30 days were 22%, 34.7%, 41.2%, higher than the control group 10%, 11.7% and 12.5%, showed that strain Y13 had better degradation of straw. The strain Y13 in different carbon growth, nitrogen source, the results showed that the best carbon strain Y13, nitrogen source was maltose, lactose and peptone. Strain Y13 in different carbon and nitrogen sources under laccase significantly, laccase activity was maltose and lactose in carbon source The highest nitrogen source was peptone when the highest laccase activity, the optimum carbon and nitrogen source for strain growth, consistent. The above results showed that the maize endophytic Alternaria fungi belong to the microspore groups, but there are some differences in morphology, physiology and genetics. Corn endophytic Alternaria spore growth period in maize, exists in plants as endophytic fungi could increase maize resistance to pathogens; corn endophytic Alternaria can produce cellulase and related enzymes, degradation of corn straw, the endogenous bacteria after the end of the stage, can continue to live saprophytic. This study of endophytic Alternaria fungal ecology function, corn cultivation and disease prevention, and resource development and utilization of endophytic Alternaria has important significance.
【學位授予單位】:鄭州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:S513
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,本文編號:1390694
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