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苦蕎毛狀根的誘導(dǎo)及高頻再生體系的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-12-28 19:33

  本文關(guān)鍵詞:苦蕎毛狀根的誘導(dǎo)及高頻再生體系的建立 出處:《四川農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文


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【摘要】:苦蕎是一種古老的一年生雙子葉草本植物,它廣泛分布于世界各地,具有適應(yīng)性強(qiáng)、耐干旱、耐貧瘠、抗鹽堿等特點(diǎn)?嗍w起源于我國(guó),其具有極高的營(yíng)養(yǎng)保健功能,同時(shí)兼具優(yōu)秀的食療作用以及卓越的藥用價(jià)值,是許多綠色食品和重要功能性食品的生產(chǎn)原料。本研究以園子蕎、川蕎1號(hào)和九江苦蕎三種不同苦蕎品種為試驗(yàn)材料,建立了一個(gè)高效的經(jīng)由發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)的苦蕎毛狀根培養(yǎng)體系。同時(shí),深入探討了影響毛狀根誘導(dǎo)的諸多因素。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),發(fā)根農(nóng)桿菌A4對(duì)苦蕎毛狀根的誘導(dǎo)能力最好,園子蕎較其他兩種苦蕎更易誘導(dǎo)苦蕎毛狀根的產(chǎn)生。經(jīng)過(guò)兩天的預(yù)培養(yǎng),利用發(fā)根農(nóng)桿菌A4菌液侵染園子蕎下胚軸,其毛狀根誘導(dǎo)效果最好,誘導(dǎo)率可達(dá)到83.6%。本研究還以園子蕎和九江苦蕎兩種不同苦養(yǎng)品種為試驗(yàn)材料,利用不同外植體,不同培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),成功建立了經(jīng)由體細(xì)胞胚胎途徑的苦蕎高頻再生體系。結(jié)果表明:苦蕎下胚軸的再生能力最好,園子蕎的再生能力較強(qiáng);最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基中添加2.0 mg/L 2,4-D和1.0 mg/L KT,其誘導(dǎo)率可達(dá)98.94%;最佳芽分化培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基中添加1.0 mg/L KT和2.0 mg/L 6-BA,其誘導(dǎo)率可達(dá)55.53%;最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基中添加1.0 mg/L IBA,其生根率高達(dá)86%。同時(shí),我們還以苦蕎頂端分生組織為外植體,通過(guò)直接誘導(dǎo)叢生芽的產(chǎn)生,首次建立了經(jīng)由組織器官途徑的苦蕎高頻再生體系。其最佳叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基中添加2.0 mg/L 6-BA和0.5 mg/L TDZ,最高芽分化率達(dá)69.05%,平均外植體出芽數(shù)最高可達(dá)18個(gè)。
[Abstract]:Tartary buckwheat is an ancient annual dicotyledonous plant. It is widely distributed all over the world, and has strong adaptability, drought resistance, barren resistance and salt and alkali resistance. Tartary buckwheat originated in China. It has very high nutritional and health functions. It also has excellent dietary therapy and excellent medicinal value. It is the raw material for many green foods and important functional foods. In this study, the garden of buckwheat chuanqiao No. 1 and Jiujiang three different varieties of tartary buckwheat as experimental materials, the establishment of an efficient via Agrobacterium rhizogenes induced by buckwheat hairy root culture system. At the same time, many factors that affect the induction of hairy root are discussed in depth. The test found that the inducing ability of Agrobacterium rhizogenes A4 on Buckwheat hairy root of the best garden, compared to the other two kinds of tartary buckwheat are more susceptible to induction of hairy roots of buckwheat. After two days of pre culture, by Agrobacterium rhizogenes A4 infection garden buckwheat hypocotyl, the hairy root inducing effect is the best, the induction rate can reach 83.6%. The study also used the garden of Jiujiang buckwheat buckwheat and two different from Buckwheat Varieties, using different explants, different media were cultured successfully established via somatic embryogenesis pathway of Tartary Buckwheat high frequency regeneration system. The results show that the regeneration of Hypocotyl of Tartary Buckwheat under the best garden buckwheat regeneration ability is strong; the addition of 2 mg/L 2,4-D and 1 mg/L KT medium was MS medium induced by the best callus, the induction rate of up to 98.94%; the best bud differentiation with 1 mg/ L and 2 KT mg/L 6-BA based MS in the culture medium. The induction rate was 55.53%; 1 mg/L IBA added the best rooting medium for 1/2MS culture medium, the rooting rate up to 86%. At the same time, we also used buckwheat top meristem as explant, and directly induced the emergence of clustered buds, and first established a high frequency regeneration system of buckwheat through tissue and organ. The best bud induction medium was MS, adding 2 mg/L 6-BA and 0.5 mg/L TDZ, the highest bud differentiation rate was 69.05%, and the average explant sprouting number reached 18.
【學(xué)位授予單位】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:S517

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本文編號(hào):1347182

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