本文關(guān)鍵詞：脈紅螺三種消化酶性質(zhì)研究及唾液腺蛋白酶的初步分離　出處：《山東大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：本論文以脈紅螺強(qiáng)大的攝食能力為出發(fā)點(diǎn),結(jié)合已有的研究成果,選取了脈紅螺體內(nèi)唾液腺、勒布靈氏腺(食道腺)與肝臟三種消化腺作為主要的研究對(duì)象。為了探究脈紅螺體內(nèi)消化酶的主要性質(zhì)來(lái)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐,得到新型酶制劑,分別研究了三種腺體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶與脂肪酶的主要性質(zhì),并且對(duì)唾液腺中的蛋白酶進(jìn)行了初步的分離純化。主要的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有:1.研究了脈紅螺三種腺體主要的蛋白酶性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,蛋白酶活性受pH值、溫度、金屬離子濃度、有機(jī)溶劑濃度、表面活性劑濃度、蛋白酶抑制劑濃度的影響。發(fā)現(xiàn)唾液腺的蛋白酶活性明顯高于其他兩種腺體。在pH為7.0,溫度為25℃條件下,濃度相同的三種消化腺蛋白酶活性大小為:唾液腺肝臟勒布靈氏腺。唾液腺、勒布靈氏腺與肝臟粗蛋白酶液的最適溫度分別為40 ℃、40 ℃、30℃；最適pH分別為8.0、2.0、8.5;最適保存溫度分別為-20℃、-20℃、4℃。實(shí)驗(yàn)表明大部分金屬離子對(duì)蛋白酶有抑制作用,較為特殊的是Ca2+、Mg2+、Mn2+、Ba2+對(duì)唾液腺蛋白酶有激活作用,Mg2+、較低濃度的Ba2+、Cu2+、Ca2+與較高濃度的Mn2+、Fe3+對(duì)勒布靈氏腺蛋白酶起激活作用;不同濃度的甲醇、二甲苯和異丙醇對(duì)三種消化腺蛋白酶有不同的激活和抑制作用;表面活性劑Tween-80對(duì)于三種消化腺蛋白酶大部分為激活作用,而4%濃度Tween-80對(duì)于勒布靈氏腺蛋白酶活力有抑制作用;不同濃度的蛋白酶抑制劑PMSF和EDTA對(duì)唾液腺和肝臟蛋白酶活力均有不同程度的抑制作用,其中0.1 mmol/L的EDTA抑制勒布靈氏腺蛋白酶活力,10 mmol/L的EDTA卻能極大激活勒布靈氏腺蛋白酶活力。2.測(cè)定了三種消化腺的淀粉酶活力及脂肪酶部分性質(zhì)。發(fā)現(xiàn)在pH為7.0,溫度為25℃時(shí),脈紅螺三種消化腺都含有淀粉酶活力及脂肪酶活力,其中淀粉酶比活力大小為:勒布靈氏腺唾液腺肝臟;pH為7.0,溫度為37℃時(shí),脂肪酶比活力大小為:唾液腺肝臟勒布靈氏腺。唾液腺與肝臟脂肪酶最適溫度都為37℃,勒布靈氏腺最適溫度為17℃;脈紅螺唾液腺脂肪酶最適pH值為8,勒布靈氏腺脂肪酶最適pH值為9,肝臟脂肪酶最適pH值為7;lmmOl/LCa2+、Ba2+、Mg2+、Mn2+對(duì)三種消化腺脂肪酶具有不同的激活抑制作用,而1mmnol/LCu2+對(duì)三種消化腺脂肪酶均有抑制作用;40%濃度的甲醇、二甲基亞砜、乙醇對(duì)三種消化腺脂肪酶有不同的激活抑制作用,而二甲苯和異丙醇均有抑制作用。3.通過(guò)脈紅螺唾液腺蛋白酶活性電泳,發(fā)現(xiàn)脈紅螺唾液腺中含有多種分子量大小不同的蛋白酶,并且通過(guò)硫酸按沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow離子交換層析與Sephacryl S-200HR分子篩層析三步純化后得到具有較高酶活力單位和較大純化倍數(shù)的酶液。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S917.4

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本文編號(hào)：1334680