低夜溫及ABA對番茄葉片中miRNAs及其靶基因表達的影響
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【摘要】:MicroRNA(miRNA)是一類非編碼的RNA,長度約22~24nt,通過作用于其靶基因進行調(diào)控,并在植物生長發(fā)育、抗逆脅迫(低溫、干旱、鹽脅迫)、維持基因組完整性等生理過程中發(fā)揮重要作用。本論文通過低夜溫和噴施ABA進行處理,觀察野生型番茄(Solanum lycopersicum)RR和ABA缺陷突變體sit葉片中氣孔超微結(jié)構(gòu),同時測定葉片中 ABA 含量,并對篩選出的 6 個差異 miRNAs(miR160、miR162、miR166、miR1919、miR397和miR6026)及其靶基因進行驗證。結(jié)果如下:1.隨著夜間溫度(9℃和6℃)的逐漸降低,野生型番茄RR和ABA缺陷突變體sit葉片中氣孔的開度比15℃下RR和sit逐漸變小,其中6℃低夜溫脅迫下,RR葉片中的氣孔有明顯的關(guān)閉現(xiàn)象,而sit葉片中氣孔沒有關(guān)閉的現(xiàn)象;同時RR和sit葉片中ABA含量比15℃下RR和sit逐漸升高。2.隨著ABA濃度(20mg·L~(-1)、50mg·L~(-1)和80mg·L~(-1))的逐漸升高,野生型番茄RR和ABA缺陷突變體sit葉片中氣孔的開度比0 mg·L~(-1)下RR和sit逐漸變小,其中ABA濃度是80 mg·L~(-1)時,RR葉片中的氣孔有明顯的關(guān)閉情況,而sit葉片中氣孔沒有關(guān)閉的情況;同時RR和sit葉片中ABA含量比0mg·L~(-1)下RR和sit逐漸升高。結(jié)果表明低夜溫和噴施ABA會誘導(dǎo)內(nèi)源ABA的合成,導(dǎo)致氣孔關(guān)閉從而增強植物的抗逆性。3.采用實時熒光定量(qRT-PCR)技術(shù)檢測葉片中6個miRNAs及其預(yù)測的靶基因在低夜溫脅迫和ABA處理下的表達情況。結(jié)果表明,在15℃夜溫(對照)下,ABA缺陷突變體sit中miRNAs的表達量與野生型RR相比均顯著下調(diào),其靶基因除miR1919外,表達量均上調(diào);低夜溫(6℃)處理12 h后,所有miRNA在sit中比RR中的表達量均顯著增加;ABA 濃度是 80 mg·L~(-1) 時,sit中 miR162、miR166、miR1919 及 miR397 較比 0 mg·L~(-1)(ABA)處理的表達量均顯著上調(diào)。綜上所述,推測miR160和miR6026響應(yīng)ABA信號;miR162通過依賴ABA信號途徑參與低夜溫脅迫。
【學(xué)位授予單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:S641.2
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,本文編號:1289835
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