發(fā)布時間：2017-10-23 02:09

  本文關(guān)鍵詞：腹瀉仔豬源E.coli的分離及毒力因子分子流行情況調(diào)查

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【摘要】：致病性大腸桿菌是引起仔豬腹瀉的重要病原之一,給養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了了解湖南省部分地區(qū)腹瀉仔豬源大腸桿菌的耐藥性、毒力基因的流行情況,本研究從規(guī)模豬場腹瀉仔豬中分離出705株腹瀉仔豬源大腸桿菌,進(jìn)行了以下相關(guān)試驗：1.從9個豬場采集腹瀉仔豬的肛門拭子和2011-2014年本實驗室接收送檢的PEDV(+)腹瀉仔豬病料,利用麥康凱平板、革蘭氏染色鏡檢和PCR方法共鑒定705株大腸桿菌。并通過K-B法檢測各豬場分離的大腸桿菌對5類抗生素(四環(huán)素類、磺胺類、氨基糖苷類、喹諾酮類、頭孢類)中的9種藥物的耐藥性。結(jié)果顯示：各豬場分離的大腸桿菌群體上對頭孢噻吩、頭孢曲松、恩諾沙星、阿米卡星的耐藥性較低,對氧氟沙星、氟苯尼考、強力霉素、復(fù)方新諾明、鏈霉素的耐藥性較高。2.利用多重PCR方法對705株大腸桿菌分離株進(jìn)行毒素基因(STa、STb、LT1、Stx2e、 eaeA)和黏附素基因(F4、F5、F6、F41、F18ab、F18ac)的檢測。結(jié)果表明：共175株大腸桿菌檢出毒素基因,檢出率達(dá)24.5%(175/705)；共57株大腸桿菌檢出黏附素基因,檢出率達(dá)8.0%(57/705)；共22株大腸桿菌能同時檢測出毒素基因和黏附素基因,檢出率達(dá)3.1%(22/705)；根據(jù)毒素特征可將毒素基因陽性菌株分為五類：產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)、產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(STEC)、吸附消除型大腸桿菌(AEEC)、產(chǎn)腸毒素大腸桿菌/產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(ETEC/STEC)和吸附消除型大腸桿菌/產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(AEEC/STEC),統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)分別占毒素基因陽性菌株的68.6%(120/175)、37.3%(28/175)、5.1%(9/175)、8.6%(15/175)和1.7%(3/175),說明本文分離的腹瀉仔豬源大腸桿菌以ETEC為主。3.另外,本研究還采用PCR方法對這705株大腸桿菌分離株進(jìn)行溶血素基因(H1yA)和HPI毒力島基因(irp2)檢測,陽性率分別為：8.4%(60/705)和32.9%(235/705)。
【關(guān)鍵詞】：大腸桿菌 仔豬腹瀉 耐藥性 毒素 黏附素
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.61
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 符號說明9-10
• 第一章 文獻(xiàn)綜述10-25
• 1.1 大腸桿菌生物學(xué)特性及分類10-11
• 1.1.1 大腸桿菌生物學(xué)特性10
• 1.1.2 大腸桿菌分類10-11
• 1.2 仔豬大腸桿菌病11-13
• 1.2.1 新生仔豬大腸桿菌性腹瀉11-12
• 1.2.2 斷奶仔豬腹瀉12
• 1.2.3 水腫病12-13
• 1.3 仔豬大腸桿菌病的免疫防制13-16
• 1.3.1 全菌疫苗13
• 1.3.2 菌毛疫苗13-14
• 1.3.3 腸毒素疫苗14
• 1.3.4 基因工程疫苗14-15
• 1.3.5 商品化菌苗15-16
• 1.4 大腸桿菌耐藥性研究統(tǒng)計16-17
• 1.5 大腸桿菌常見毒力因子17-21
• 1.5.1 黏附素17-19
• 1.5.2 腸毒素19-20
• 1.5.3 其他毒力因子20-21
• 1.6 常見毒力因子的流行病學(xué)調(diào)查21-24
• 1.6.1 國外流行情況21-22
• 1.6.2 國內(nèi)流行情況22-24
• 1.7 本研究的目的及意義24-25
• 第二章 不同規(guī)模豬場腹瀉仔豬大腸桿菌的分離鑒定及藥物敏感性檢測25-31
• 2.1 材料與方法25-26
• 2.1.1 材料25
• 2.1.2 方法25-26
• 2.2 結(jié)果26-29
• 2.2.1 采樣豬群的臨床資料26-27
• 2.2.2 細(xì)菌分離鑒定結(jié)果27-28
• 2.2.3 藥物敏感性結(jié)果28-29
• 2.3 討論與分析29-30
• 2.4 小結(jié)30-31
• 第三章 2011-2014年流行性腹瀉陽性仔豬源大腸桿菌的分離鑒定及藥物敏感性檢測31-36
• 3.1 材料與方法31
• 3.1.1 病料31
• 3.1.2 方法31
• 3.2 結(jié)果31-34
• 3.2.1 PEDV陽性病料的臨床背景資料31-33
• 3.2.2 細(xì)菌分離鑒定結(jié)果33
• 3.2.3 藥物敏感性檢測結(jié)果33-34
• 3.3 討論與分析34-35
• 3.4 小結(jié)35-36
• 第四章 腹瀉仔豬源大腸桿菌毒力因子的流行病學(xué)調(diào)查36-58
• 4.1 材料與方法36-39
• 4.1.1 調(diào)查大腸桿菌來源的選擇36-37
• 4.1.2 大腸桿菌毒力基因的PCR檢測37-39
• 4.2 結(jié)果39-51
• 4.2.1 大腸桿菌各毒力因子的鑒定結(jié)果39-45
• 4.2.2 各豬場及PEDV(+)中大腸桿菌毒力基因檢測結(jié)果45-46
• 4.2.3 毒素基因、黏附素基因、溶血素基因及毒力島基因的相關(guān)性46-49
• 4.2.4 數(shù)據(jù)分類統(tǒng)計結(jié)果49-51
• 4.3 討論與分析51-56
• 4.3.1 主要毒力基因調(diào)查結(jié)果分析51-52
• 4.3.2 大腸桿菌分離株主要毒力因子檢測結(jié)果與臨床發(fā)病相關(guān)性分析52-55
• 4.3.3 溶血活性表型與溶血素基因(HlyA)鑒定結(jié)果的相關(guān)性分析55
• 4.3.4 臨床上不同階段腹瀉仔豬源大腸桿菌毒力因子檢測結(jié)果分析55
• 4.3.5 PEDV(+)病料中大腸桿菌毒力因子檢測結(jié)果分析55-56
• 4.3.6 大腸桿菌病的防控56
• 4.4 小結(jié)56-58
• 全文總結(jié)58-59
• 參考文獻(xiàn)59-68
• 附錄1 主要試劑配方68-69
• 附錄2 各豬場大腸桿菌毒力因子檢測結(jié)果69-76
• 致謝76-77
• 作者簡歷77

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1 吳秀芬,李鵬,楊煥民;豬胸膜肺炎放線桿菌毒力因子研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代畜牧獸醫(yī);2005年06期

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3 曹三杰;段麗麗;肖馳;文心田;;豬2型鏈球菌毒力因子研究進(jìn)展[J];中國人獸共患病學(xué)報;2007年01期

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5 崔煥忠;喬立橋;王義沖;;單核細(xì)胞增生性李斯特菌的主要毒力因子及其致病機理[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年01期

6 霍永;李R，

本文編號：1081113