本文關(guān)鍵詞：小麥—黑麥1BL. 1RS易位系葉片衰老相關(guān)EST序列染色體定位及該易位染色體在不同遺傳背景中的傳遞頻率研究

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【摘要】：小麥?zhǔn)鞘澜缟献钪匾募Z食作物之一,小麥1B染色體短臂被黑麥1R染色體短臂取代形成了小麥-黑麥1BL.1RS易位系。小麥-黑麥1BL.1RS易位系攜帶有許多與疾病抗性和產(chǎn)量形成有關(guān)的有益基因,在全世界小麥遺傳改良中被廣泛的運用。本研究選用含有1BL.1RS易位系的功能持綠小麥品種CN17, CN12、CN18以及普通小麥MYll、中國春和黑麥作為研究材料。同時以CN17和MY11為親本分別構(gòu)建了雜交組合CN17/MY11和MY11/CN17的遺傳群體F1、F2、F3和F4。通過DNA分子標(biāo)記與細(xì)胞學(xué)技術(shù)相結(jié)合,對與葉片衰老相關(guān)的EST序列進(jìn)行了染色體定位,并且分析了母本效應(yīng)對易位染色體傳遞頻率的影響,主要結(jié)果如下；1.通過抑制性差減雜交,從CN17中得到32條與葉片衰老相關(guān)的EST序列,利用電子克隆將其中31條定位于不同的染色體之上。對得到的32條EST序列設(shè)計引物,總共設(shè)計得到19對EST-STS引物。運用這些引物對中國春、CN12、CN17、CN18和黑麥的基因組總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增。發(fā)現(xiàn)有5對引物有多態(tài)性,分別為JK738991, JK738983, JK738989, JK738994和JK739003。2.用中國春缺四體對5對多態(tài)性EST-STS引物進(jìn)行染色體定位。其中3對EST-STS引物能被定位在特定的染色體上：JK738991定位于3B(電子克隆定位在1A)；JK738983定位于5D(電子克隆定位在6A、6B和6D)；JK738989有3個多態(tài)性條帶(JK738989-A, JK738989-B, JK738989-C)分別定位于2A,4A和3D(電子克隆定位于2B)。JK738994和JK739003用中國春缺四體無法定位。用由MY11/CN17為親本構(gòu)建的F2群體對JK738994, JK739003與1BL.1RS進(jìn)行連鎖分析。發(fā)現(xiàn)上述標(biāo)記與易位染色體均不連鎖3.選用6對已報道的能穩(wěn)定擴(kuò)增的特異性引物對遺傳群體進(jìn)行基因型鑒定。絕大部分能夠穩(wěn)定擴(kuò)增,但是個別單株出現(xiàn)了特異帶的缺失或倍增。證明了1RS上的標(biāo)記位點雖然在大多數(shù)小麥背景中較能穩(wěn)定的存在,但是在少數(shù)個體中分子標(biāo)記位點存在一定的變異。4.在3個一同的世代中,正反交組合雜合子的比例均小于理論值50%,易位系純合子所占的比例小于不含易位染色體的純合子比例,且小于理論值25%,而不含易位染色體純合子大于25%。經(jīng)過χ2分析,都偏離了1：2：1的分離比例�；诒緦嶒灲Y(jié)果,我們得出結(jié)論,在本實驗的雜交組合中1BL.1RS易位染色體在傳遞過程中,雌雄配子均發(fā)生了選擇。5.易位染色體的傳遞頻率在正交組合(CN17/MY11)三個世代分別為：68.4%、63.8%、66.4%；反交組合(MY11/CN17)為：62.3%、63.7%、65.7%。正反交組合呈現(xiàn)相反的趨勢,正交逐漸降低而反交逐漸升高,但是正交依然高于反交。通過以上數(shù)據(jù)我們得出結(jié)論,細(xì)胞質(zhì)遺傳背景可能會影響該易位染色體的遺傳。
【關(guān)鍵詞】：小麥 1BL.1RS易位系 EST-STS 基因定位
【學(xué)位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S512.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 文獻(xiàn)綜述10-22
• 1.1 引言10
• 1.2 1BL.1RS研究現(xiàn)狀10-11
• 1.3 功能持綠特性11-13
• 1.3.1 持綠特性研究進(jìn)展11-12
• 1.3.2 功能持綠特性的遺傳機(jī)制12-13
• 1.3.3 持綠品種的培育13
• 1.4 易位染色體傳遞研究13-15
• 1.4.1 易位染色體穩(wěn)定性研究13-14
• 1.4.2 易位染色體傳遞頻率14-15
• 1.5 基因定位及1BL.1RS異位系鑒定15-17
• 1.5.1 常用的基因定位方法15-16
• 1.5.2 常用的1BL.1RS的鑒定方法16-17
• 1.6 常用DNA分子標(biāo)記17-18
• 1.6.1 限制性片段長度多態(tài)性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)17
• 1.6.2 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Raddon amplified polymorphic DNA,RAPD)17-18
• 1.6.3 簡單重復(fù)序列(Simple Sequence Repeats,SSRs)18
• 1.6.4 表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)18
• 1.6.5 序列標(biāo)簽位點(Seqence Tagged Sites,STS)18
• 1.7 影響染色體傳遞的相關(guān)基因18-19
• 1.8 抑制性差減雜交19-21
• 1.9 實驗?zāi)康募耙饬x21-22
• 2 材料與方法22-27
• 2.1 實驗材料22
• 2.2 群體構(gòu)建22-23
• 2.3 葉片衰老相關(guān)序列染色體定位及易位染色體傳遞頻率研究23-27
• 2.3.1 材料取樣23
• 2.3.2 小麥DNA提取(CTAB法)23-24
• 2.3.3 引物選擇24
• 2.3.4 PCR擴(kuò)增24-25
• 2.3.5 聚丙烯酰胺凝膠電泳與銀染顯色25-26
• 2.3.6 瓊脂糖凝膠電泳26-27
• 2.3.7 數(shù)據(jù)分析27
• 3 結(jié)果與分析27-42
• 3.1 葉片衰老相關(guān)序列染色體定位27-38
• 3.1.1 EST-STS引物設(shè)計27-28
• 3.1.2 EST序列電子克隆28-32
• 3.1.3 ESTs多態(tài)性分析32-33
• 3.1.4 多態(tài)性引物的染色體定位33-35
• 3.1.5 JK738994,JK739003與1BL.1RS連鎖分析35-38
• 3.2 1BL.1RS易位染色體傳遞研究38-42
• 3.2.1 引物選擇與擴(kuò)增穩(wěn)定性檢測38-41
• 3.2.2 遺傳群體基因型鑒定結(jié)果41
• 3.2.3 分離比例分析41
• 3.2.4 易位染色體傳遞頻率研究41-42
• 4 討論42-45
• 4.0 CN17延緩葉片衰老遺傳機(jī)制42
• 4.1 潛在持綠基因的研究42-43
• 4.2 EST-STS標(biāo)記開發(fā)及電子克隆技術(shù)的運用43
• 4.3 葉片衰老相關(guān)EST序列與1BL.1RS易位系連鎖性分析43
• 4.4 易位染色體的穩(wěn)定性43-44
• 4.5 易位染色體傳遞頻率分析44
• 4.6 母本效應(yīng)對易位染色體傳遞的影響44-45
• 5. 結(jié)論45-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 致謝53-54
• 碩士期間取得的研究成果54

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周漢平，李濱，，李振聲;藍(lán)粒小麥易位系選育的研究[J];西北植物學(xué)報;1995年02期

2 張佰臣;小麥

本文編號：1068673