本文關(guān)鍵詞：大腸桿菌耐藥性篩選及艾葉、升麻對(duì)環(huán)丙沙星耐藥性消除的研究

  更多相關(guān)文章： 耐藥性 大腸桿菌 環(huán)丙沙星 耐藥消除 艾葉 升麻

【摘要】：目的:調(diào)查山東省部分地區(qū)雞源大腸桿菌(Escherichia coli,E.coli)耐藥表型及血清型分布狀況,并研究艾葉、升麻提取物對(duì)耐環(huán)丙沙星大腸桿菌耐藥性的消除作用,減少耐藥性的傳播,進(jìn)一步加大對(duì)中藥的綜合開發(fā)利用。方法:采用鑒別培養(yǎng)基,革蘭氏染色,生化鑒別等方法,分離鑒定2008-2012年來(lái)自山東濟(jì)南、濰坊、煙臺(tái)、德州、濟(jì)寧地區(qū)大腸桿菌96株,并采用K-B法檢測(cè)菌株對(duì)23種常用抗生素的耐藥性,確定菌株的耐藥表型,通過(guò)玻片凝集反應(yīng),確定菌株血清型。采用試管稀釋法檢測(cè)環(huán)丙沙星對(duì)30株耐環(huán)丙沙星大腸桿菌的最小抑菌濃度(Minimal inhibitory concentration,MIC),挑選對(duì)環(huán)丙沙星耐藥性強(qiáng)的菌株及人工誘導(dǎo)耐藥菌株作為本次試驗(yàn)的受試菌株。選擇體內(nèi)外抑菌效果好的艾葉、升麻作為耐藥消除劑。觀察中藥消除劑以1/2 MIC,1/4 MIC,1/8 MIC,作用時(shí)間為24 h,48 h對(duì)受試菌株的耐藥消除作用,采用影印培養(yǎng)法觀察耐藥消除率,耐藥表型變化,并提取受試菌質(zhì)粒,進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,觀察艾葉、升麻提取物對(duì)耐環(huán)丙沙星大腸桿菌質(zhì)粒的消除情況。并通過(guò)受試菌株質(zhì)粒轉(zhuǎn)化抗性篩選,初步探討菌株耐藥消除機(jī)制。本次試驗(yàn)以SDS為陽(yáng)性對(duì)照,以菌株自然傳代10代為陰性對(duì)照,與中藥不同提取物消除效果做對(duì)比。結(jié)果:山東省部分地區(qū)雞源大腸桿菌耐藥表型調(diào)查結(jié)果顯示,大腸桿菌對(duì)23種抗生素均體現(xiàn)出不同程度的耐藥性,且出現(xiàn)多重耐藥性,其中對(duì)喹諾酮類耐藥性已相當(dāng)嚴(yán)重,對(duì)環(huán)丙沙星耐藥率甚至已達(dá)到了77.08%,而且在不同地區(qū),不同年份菌株的耐藥率還在不斷升高。96株大腸桿菌血清型多集中在024,015,018,這三種血清型為山東省部分地區(qū)的流行血清型。根據(jù)體內(nèi)外抑菌單味中藥篩選結(jié)果表明,艾葉,升麻水煎液能產(chǎn)生有效的抑菌效果,為本次試驗(yàn)中藥消除劑。人工誘導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)菌株耐藥的結(jié)果是環(huán)丙沙星對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC上升到10μg/ml。艾葉、升麻提取物以1/2 MIC,1/4 MIC,1/8 MIC對(duì)受試菌分別作用24 h,48 h。中藥消除劑對(duì)受試菌株均有一定耐藥消除作用,但是對(duì)耐藥表型影響不明顯均處于耐藥范圍內(nèi),未恢復(fù)菌株的敏感性。艾葉和升麻提取物對(duì)不同菌株有一定的消除質(zhì)粒作用,但是根據(jù)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果判定受試菌株的耐藥性產(chǎn)生不一定是由質(zhì)粒介導(dǎo)的,提示我們主導(dǎo)耐藥性消除的途徑可能與質(zhì)粒無(wú)直接相關(guān)性,可能是由其他多種消除機(jī)制調(diào)控產(chǎn)生的。結(jié)論:本試驗(yàn)結(jié)果顯示山東省部分地區(qū)大腸桿菌已出現(xiàn)嚴(yán)重耐藥性,并提示艾葉和升麻對(duì)耐環(huán)丙沙星菌株有一定的耐藥消除作用,具有作為臨床大腸桿菌耐藥性消除劑的潛力。
【關(guān)鍵詞】：耐藥性 大腸桿菌 環(huán)丙沙星 耐藥消除 艾葉 升麻
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S853.7
【目錄】：

• 提要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述12-20
• 1.大腸桿菌病的危害及防治12-13
• 1.1 大腸桿菌生物特性12
• 1.2 大腸桿菌病危害12
• 1.3 大腸桿菌病防治12-13
• 2.大腸桿菌耐藥性現(xiàn)狀13-15
• 2.1 人源性大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀13
• 2.2 食源性大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀13-14
• 2.3 動(dòng)物源性大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀14-15
• 3.細(xì)菌耐藥機(jī)制研究進(jìn)展15-16
• 3.1 遺傳耐藥機(jī)制15
• 3.2 生化機(jī)制15-16
• 4.細(xì)菌耐藥性消除方法研究進(jìn)展16-20
• 4.1 研發(fā)新的抗生素藥物16
• 4.2 耐藥拮抗劑16
• 4.3 中藥耐藥消除劑16-20
• 第二部分 大腸桿菌分離鑒定和耐藥表型測(cè)定20-30
• 1.試驗(yàn)材料20
• 1.1 試驗(yàn)儀器20
• 1.2 試驗(yàn)耗材20
• 1.3 試驗(yàn)試劑20
• 1.4 試驗(yàn)藥品20
• 1.5 試驗(yàn)菌株20
• 2.方法20-22
• 2.1 分離鑒定大腸桿菌20-21
• 2.2 分離鑒定菌血清型測(cè)定21
• 2.3 分離鑒定菌藥敏試驗(yàn)21-22
• 3.試驗(yàn)結(jié)果22-28
• 3.1 大腸桿菌的分離鑒定22
• 3.2 大腸桿菌血清型鑒定22-23
• 3.3 藥敏試驗(yàn)23-28
• 4.討論28-30
• 第三部分 受試菌株的選擇30-35
• 1.試驗(yàn)材料30
• 1.1 試驗(yàn)儀器30
• 1.2 試驗(yàn)耗材30
• 1.3 試驗(yàn)試劑30
• 1.4 試驗(yàn)藥品30
• 1.5 試驗(yàn)菌株30
• 2.方法30-31
• 2.1 臨床菌株MIC測(cè)定30-31
• 2.2 標(biāo)準(zhǔn)菌株耐藥性誘導(dǎo)31
• 3.結(jié)果31-33
• 3.1 菌株耐藥表型和特性31-32
• 3.2 臨床菌株MIC測(cè)定結(jié)果32-33
• 3.3 標(biāo)準(zhǔn)菌株MIC測(cè)定33
• 3.4 標(biāo)準(zhǔn)菌株人工誘導(dǎo)耐藥33
• 4.討論33-35
• 第四部分 中藥消除大腸桿菌耐藥性研究35-43
• 1.試驗(yàn)材料35-36
• 1.1 試驗(yàn)儀器35
• 1.2 試驗(yàn)試劑35
• 1.3 試驗(yàn)藥物35
• 1.4 試驗(yàn)菌株35-36
• 2.方法36-39
• 2.1 中藥提取液的制備36
• 2.2 測(cè)定提取液對(duì)受試菌株MIC36
• 2.3 耐藥性消除試驗(yàn)36-39
• 3.結(jié)果39-41
• 3.1 藥物對(duì)受試菌株MIC測(cè)定39
• 3.2 耐藥性消除結(jié)果39-41
• 4.討論41-43
• 結(jié)語(yǔ)43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 附錄48-57
• 致謝57-58
• 論文著作58-63
• 詳細(xì)摘要63-66

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