本文關(guān)鍵詞：艾地苯醌對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是一種慢性血管性疾病,其發(fā)生是一個(gè)多層次、各種因素和細(xì)胞成分相互影響的瀑布式發(fā)展過(guò)程。在動(dòng)脈粥樣硬化早期階段可觀察到氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,oxLDL)的聚集和血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的損傷,被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的始動(dòng)因素。oxLDL可以誘導(dǎo)活性氧(reactive oxygen species, ROS)生成,導(dǎo)致線粒體功能障礙,誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激和凋亡。線粒體是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要部位,線粒體功能受損會(huì)進(jìn)一步增加ROS的生成,誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙,從而導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化形成。最近研究表明,心腦血管病危險(xiǎn)因素與活性氧水平增加密切相關(guān),并可導(dǎo)致心腦血管線粒體的損害和功能障礙。綜上所述,線粒體被認(rèn)為是連接心腦血管病危險(xiǎn)因素、氧化應(yīng)激和內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙的重要環(huán)節(jié),也是促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化病變形成和發(fā)展的重要因素。因此,應(yīng)用線粒體靶向的抗氧化劑治療藥物可以通過(guò)抑制過(guò)量ROS生成,改善線粒體功能,從而達(dá)到防治動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的作用。艾地苯醌是輔酶Q10的合成類似物,具有相同的苯醌環(huán)樣結(jié)構(gòu),而其短烷基側(cè)鏈替代了COQ10的類異戊二烯側(cè)鏈,更易通過(guò)生物膜和血腦屏障。艾地苯醌和輔酶Q10發(fā)揮電子傳遞、抗氧化作用主要依賴與苯醌環(huán),苯醌環(huán)接受兩個(gè)電子還原生成穩(wěn)定的氫醌,在電子傳遞鏈中氧化型與還原型這兩種形式相互轉(zhuǎn)變,成為線粒體呼吸鏈的遞氫體及電子傳遞的載體。苯醌環(huán)接受一個(gè)電子生成不穩(wěn)定的半醌結(jié)構(gòu),形成超氧化物,促進(jìn)氧化應(yīng)激的發(fā)生。輔酶Q10是線粒體電子傳遞鏈(electron transport chain, ETC)的關(guān)鍵組成部分,主要從線粒體復(fù)合體Ⅰ或復(fù)合體Ⅱ接受2個(gè)電子,再將電子傳遞給復(fù)合體Ⅲ,抗氧化清除自由基、傳遞電子,最終生成ATP。輔酶Q10發(fā)揮清除自由基、傳遞的電子的作用依賴于線粒體功能,特別是線粒體復(fù)合物Ⅰ的功能。然而艾地苯醌生成氫醌的方式與輔酶Q10不同,艾地苯醌像輔酶Q一樣可以在線粒體復(fù)合物Ⅰ與疏水醌的位點(diǎn)結(jié)合被還原,然而由于艾地苯醌親脂的側(cè)鏈較短,其與線粒體復(fù)合物Ⅰ袋狀部位結(jié)合不易解離,釋放非常緩慢,其作為競(jìng)爭(zhēng)性底物,抑制向內(nèi)源性輔酶Q傳遞電子。同時(shí)由于內(nèi)源性輔酶Q的高親脂性,其不能與“非生理的”親水醌結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。艾地苯醌比輔酶Q親脂性小,可以與復(fù)合物Ⅰ中親水醌位點(diǎn)結(jié)合,這個(gè)位點(diǎn)與NADH結(jié)合位點(diǎn)及FMN部分重疊,被黃素還原形成一個(gè)不穩(wěn)定的半醌產(chǎn)生超氧化物,促進(jìn)氧化應(yīng)激。故艾地苯醌很少部分通過(guò)線粒體復(fù)合物Ⅰ的傳遞電子,但可以通過(guò)其他旁路傳遞電子,如NAD (P) H:醌氧化還原酶1 (enzyme NADPH-quinone oxidoreductase 1,NQO1)、復(fù)合物Ⅱ、復(fù)合物Ⅲ及G3PDH穿梭等,在線粒體電子呼吸鏈中將電子傳遞到線粒體復(fù)合物Ⅲ,不依賴于線粒體復(fù)合物Ⅰ的功能,起到傳遞電子,抗氧化清除自由基。艾地苯醌主要在細(xì)胞質(zhì)中可以被NAD(P)H:醌氧化還原酶1 (enzyme NADPH-quinone oxidoreductase 1,NQO1)還原生成氫醌,將2個(gè)電子傳遞給電子呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ,促進(jìn)生成ATP,抑制ROS生成。在此過(guò)程中,艾地苯醌發(fā)揮其治療潛力的關(guān)鍵是NQO1活化。NQO1活化依賴氧化應(yīng)激和NF-E2相關(guān)因子／抗氧化反應(yīng)元件(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2/Antioxidant responsive element, Nrf2/ARE)通路調(diào)控。Nrf2/ARE信號(hào)途徑通路可以介導(dǎo)體外血管內(nèi)皮細(xì)胞抗動(dòng)脈粥樣硬化基因的表達(dá),起到抗炎、抗細(xì)胞凋亡、抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。而AS的發(fā)生與氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡、線粒體功能受損、Nrf2/ARE通路途徑密切相關(guān),因此,考慮艾地苯醌可能起到防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用,同時(shí)由于艾地苯醌具有良好的耐受性和安全性,有很好的研究前景,然而,目前很少有研究關(guān)注艾地苯醌的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用及其作用機(jī)制。糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)是一種促凋亡蛋白激酶,主要通過(guò)磷酸化多種底物蛋白來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)以及新生血管形成等多方面。GSK3β有兩種磷酸化形式,P-GSK3β(Tyr216)活化型,P-GSK3β(Ser9)非活化型。當(dāng)Ser9位點(diǎn)磷酸化時(shí),GSK3β活性被抑制。氯化鋰(LiCl)是一種選擇性的GSK-3β抑制劑,可以使GSK3β失活,線粒體膜電位增加,抑制細(xì)胞色素C從線粒體釋放細(xì)胞漿,抑制線粒體凋亡途徑及內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。同時(shí)GSK3β可以抑制抗氧化應(yīng)激的Nrf2/ARE信號(hào)傳導(dǎo)通路,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。β-catenin是GSK3β信號(hào)通路下游的關(guān)鍵分子,GSK3β失活抑制細(xì)胞內(nèi)β-catenin的磷酸化水平,進(jìn)而導(dǎo)致β-catenin胞漿內(nèi)穩(wěn)定并累積進(jìn)入胞核,β-catenin在核內(nèi)與T細(xì)胞因子／淋巴樣增強(qiáng)因子(TCF/LEF)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,進(jìn)一步激活下游靶基因,能夠改善細(xì)胞的功能,抑制細(xì)胞凋亡。這些證據(jù)表明,GSK3β和β-catenin蛋白可能在動(dòng)脈粥樣硬化中發(fā)揮重要的作用,艾地苯醌可能通過(guò)影響GSK3β、 β-catenin蛋白水平發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。本課題通過(guò)體外試驗(yàn),建立oxLDL誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)形成早期動(dòng)脈粥樣硬化功能損傷的模型,給予艾地苯醌預(yù)處理,研究艾地苯醌是否具有保護(hù)線粒體、抗血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用,是否可以作為一種線粒體保護(hù)劑用于防治早期血管動(dòng)脈粥樣硬化,并探討其相關(guān)的機(jī)制,同時(shí)研究GSK3β、β-catenin信號(hào)蛋白此過(guò)程中的作用,以期為防治早期動(dòng)脈粥樣硬化尋求治療靶點(diǎn)。本研究分兩個(gè)部分：第一部分 艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用目的探討艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響。方法1.人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定。獲得山東大學(xué)齊魯醫(yī)院倫理委員會(huì)同意,取山東大學(xué)齊魯醫(yī)院產(chǎn)科行剖宮產(chǎn)術(shù)的健康產(chǎn)婦分娩的新生兒臍帶,分離原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,后進(jìn)行傳代培養(yǎng),進(jìn)行內(nèi)皮細(xì)胞鑒定,取3-5代進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.觀察oxLDL對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的損傷以及艾地苯醌的作用。將體外培養(yǎng)的HUVECs隨機(jī)分為5組：①正常對(duì)照組；②100μg/mlo xLDL組；③0.05μM艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組；④0.1μM艾地苯醌100μg/ml oxLDL艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組。用倒置顯微鏡觀察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,各組細(xì)胞與CCK-8(Cell counting Kit-8)共同孵育,用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)各組血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖水平。用Hoechst33258熒光染色,用熒光顯微鏡觀察各組細(xì)胞核凋亡情況。各組細(xì)胞進(jìn)行Annexin V-FITC雙標(biāo)法染色后利用流式細(xì)胞儀,檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率。提取各組細(xì)胞的總蛋白,采用Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果1.人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性抗原鑒定在共聚焦顯微鏡下觀察培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞Factor VIII Related Antigen及CD31高表達(dá),證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞。2.艾地苯醌預(yù)處理對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷的形態(tài)學(xué)特征及細(xì)胞增殖水平的影響與正常組比較,100μg/ml oxLDL培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞胞體縮小、皺縮,胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,細(xì)胞表面出現(xiàn)黑色顆粒,核膜模糊,較多的細(xì)胞變圓脫落,有細(xì)胞破碎,未脫落細(xì)胞收縮變小,多有細(xì)長(zhǎng)突起相互牽連,出現(xiàn)凋亡改變,細(xì)胞增殖水平明顯下降(65.85±4.25%)(P0.01)。與oxLDL組比較,0.05μM, 0.1μM, 0.2μM艾地苯醌預(yù)處理組+100μg/ml oxLDL各組HUVECs細(xì)胞形態(tài)明顯改善,皺縮及懸浮細(xì)胞明顯減少,各組的細(xì)胞增殖水平明顯提高(分別是75.68±2.59%,78.24±2.12%,81.48±2.39%)(P0.05)。提示艾地苯醌可以明顯改善oxLDL損傷的內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài),提高細(xì)胞增殖水平。3.艾地苯醌預(yù)處理抑制oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡各組細(xì)胞經(jīng)Hoechst 33258染色后,oxLDL誘導(dǎo)HUVECs細(xì)胞核凋亡,有的細(xì)胞核呈濃染致密的固縮形態(tài)或顆粒狀熒光,有的細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體,細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.01)。與oxLDL組相比,艾地苯醌預(yù)處理的HUVEC細(xì)胞中細(xì)胞核呈濃染致密的固縮形態(tài)或顆粒狀熒光的凋亡細(xì)胞數(shù)明顯減少,大部分細(xì)胞染色質(zhì)呈彌漫均勻低強(qiáng)度熒光,細(xì)胞凋亡率明顯下降(P0.05)。各組細(xì)胞用Annexin V-FITC雙標(biāo)法染色后,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率,與正常組相比,oxLDL組內(nèi)皮細(xì)胞凋亡細(xì)胞明顯增多(27.18±2.76% vs5.37±0.69%)(P0.01)。與oxLDL組相比,0.05μM, 0.1μM,0.2μM艾地苯醌預(yù)處理+oxLDL組凋亡細(xì)胞均明顯減少(分別是18.37±2.32%,16.76±2.65%,13.52±2.43%)(P0.05)。提示艾地苯醌預(yù)處理可以明顯抑制oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。4.艾地苯醌預(yù)處理通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3凋亡蛋白水平抑制oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。與正常組相比,100μg/ml oxLDL組HUVECs Bcl-2蛋白表達(dá)明顯降低,Bax蛋白表達(dá)明顯增高, cleaved caspase-3表達(dá)明顯增高(P0.01)。與oxLDL組比較,0.05μm、 0.1μm、0.2μm艾地苯醌預(yù)處理+100μg/ml oxLDL組HUVECs Bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯增高,Bax蛋白、cleaved caspase-3蛋白表達(dá)水平明顯降低(P0.05)。提示艾地苯醌可以通過(guò)穩(wěn)定Bcl-2,抑制Bax、cleaved caspase-3蛋白表達(dá),抑制細(xì)胞凋亡,保護(hù)受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞。結(jié)論在體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中,艾地苯醌預(yù)處理在一定的濃度下,能夠明顯抑制氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,其可以通過(guò)穩(wěn)定Bcl-2,抑制Bax、 cleaved caspase-3表達(dá),抑制細(xì)胞凋亡,保護(hù)受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞。第二部分艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制研究目的研究艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的早期血管內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙的保護(hù)機(jī)制,探討GSK3β、β-catenin蛋白在此過(guò)程中作用。方法1.研究艾地苯醌對(duì)線粒體功能的影響。將體外培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞隨機(jī)分為5組：①正常對(duì)照組；②100μg/ml oxLDL組；③0.05μM艾地苯醌+100μg/ml OxLDL組；④0.1μM艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組；⑤0.2μM艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組。提取各組細(xì)胞的總蛋白,用酶標(biāo)儀檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)的MDA、SOD活力水平。各組細(xì)胞進(jìn)行JC-1染色,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位水平。熒光素酶基因報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞ATP生成量。利用線粒體分離試劑盒分離細(xì)胞胞漿及線粒體,提取胞漿及線粒體的蛋白,用Western Blot檢測(cè)細(xì)胞胞漿及線粒體的細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)水平,porin和β-actin作為內(nèi)參。2.研究艾地苯醌對(duì)GSK3β、β-catenin信號(hào)蛋白的影響。將體外培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞隨機(jī)分為4組：①正常對(duì)照組；②100μg/ml oxLDL組；③0.2μM艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組;④GSK-3β抑制劑10mM LiCL+100μg/ml oxLDL組,作為陽(yáng)性對(duì)照。用試劑盒提取細(xì)胞總蛋白、分離胞漿蛋白及細(xì)胞核蛋白,Western blotting檢測(cè)各組HUVECs的總GSK3β、P-GSK3p(Ser9)、總β-catenin、 P-β-Catenin (Ser33/37/Thr41)、胞漿β-catenin、胞核β-catenin水平,GAPDH、p-actin和Histone H2A作為內(nèi)參。結(jié)果1.艾地苯醌明顯抑制oxLDL誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化,增強(qiáng)SOD活力。與正常組相比,100μg/ml oxLDL組內(nèi)皮細(xì)胞生成MDA量顯著增高(3.34±0.23 nmol/mg protein vs 1.48±0.14 nmol/mg protein), SOD活力顯著降低(2.12±0.18 unit/mg protein vs 4.36±0.31 unit/mg protein)(P0.01)。與100μg/ml oxLDL組相比,0.05μM、0.1 μM、0.2μM的艾地苯醌預(yù)處理+100μg/ml oxLDL的各組MDA生成量均明顯降低(分別是2.72±0.28 nmol/mg protein,2.41±0.15 nmol/mg protein,2.26±0.13 nmol/mg protein), SOD活力均明顯增高(分別是3.05±0.25 unit/mg protein,3.33±0.23 unit/mg protein,3.59±0.21 unit/mg protein) (P0.01),提示艾地苯醌可以通過(guò)抑制細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化,增強(qiáng)細(xì)胞清除氧自由基能力,保護(hù)oxLDL損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞。2.艾地苯醌通過(guò)保護(hù)線粒體功能,抑制線粒體凋亡通路,抑制oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。與正常細(xì)胞組相比,oxLDL組紅色熒光(JC-1聚合體)明顯減弱,紅綠熒光比值顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),間接反映線粒體膜電位ΔΨm顯著降低。與100μg/ml oxLDL組內(nèi)皮細(xì)胞相比,加用0.05μM、0.1μM、0.2μM的艾地苯醌預(yù)處理+100μg/ml oxLDL的各組紅色熒光強(qiáng)度明顯增加,紅綠熒光比值顯著增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),說(shuō)明線粒體膜電位ΔΨm顯著增高,提示艾地苯醌可以通過(guò)提高細(xì)胞線粒體膜電位,改善線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔功能,保護(hù)線粒體。與正常組相比,100μg/ml oxLDL組血管內(nèi)皮細(xì)胞ATP水平顯著降低(8.83±1.71μmol/mg protein vs 23.82±3.43μmol/mg protein) (P0.01)。與100μg/ml oxLDL組血管內(nèi)皮細(xì)胞比較,0.05μM、0.1μM、0.2μM終濃度的艾地苯醌+oxLDL 100μg/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ATP水平均明顯升高(分別為15.16±2.190μmol/mg protein,16.37±3.51μmol/mg protein,17.12±2.06μmol/mg protein)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),提示艾地苯醌可以明顯提高oxLDL抑制的血管內(nèi)皮細(xì)胞的ATP生成量,保護(hù)線粒體功能。與正常組相比,100μg/ml oxLDL組HUVECs線粒體細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)水平明顯降低,胞漿細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)水平明顯增高(P0.01),提示細(xì)胞色素C從細(xì)胞線粒體中釋放到細(xì)胞漿中,說(shuō)明oxLDL通過(guò)細(xì)胞線粒體凋亡通路引起細(xì)胞凋亡。與oxLDL組比較,分別用0.05μM、0.1μM、0.2μM的艾地苯醌預(yù)處理2小時(shí)+100μg/ml oxLDL組,線粒體細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)水平明顯增高,胞漿細(xì)胞色素C蛋白表達(dá)水平明顯降低(P0.05),提示艾地苯醌通過(guò)抑制細(xì)胞線粒體凋亡通路,保護(hù)受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞。3.艾地苯醌對(duì)GSK3β、 β-catenin蛋白磷酸化水平及活性的影響與正常組比較,100μg/ml oxLDL組的P-GSK3β(Ser9)明顯降低,上調(diào)GSK3β活性,使P-β-catenin (Ser33/37/Thr41)含量明顯增加,胞漿β-catenin蛋白表達(dá)水平明顯增加,胞核β-catenin蛋白表達(dá)水平明顯降低(P0.05),影響GSK3β、β-catenin通路的信號(hào)傳導(dǎo),促進(jìn)細(xì)胞凋亡。與100μg/ml oxLDL組比較,0.2μM艾地苯醌+100μg/ml oxLDL組的P-GSK3p(Ser9)蛋白表達(dá)水平明顯增加,使GSK3β失活,P-β-Catenin (Ser33/37/Thr41)蛋白表達(dá)水平明顯降低,同時(shí)伴隨著胞漿β-catenin蛋白表達(dá)明顯降低和胞核β-catenin蛋白表達(dá)水平明顯增加,使β-catenin核內(nèi)聚集(P0.05)。與lOmM LiCL處理做為陽(yáng)性對(duì)照一致,P-catenin核內(nèi)聚集與GSK3β的活性有關(guān)。四組之間比較細(xì)胞的總蛋白的GSK3β、β-catenin蛋白表達(dá)水平無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論1,在體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中,艾地苯醌通過(guò)抑制oxLDL誘導(dǎo)的細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化,增強(qiáng)細(xì)胞清除氧自由基能力,抑制細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)。2.早期艾地苯醌干預(yù)通過(guò)改善氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的線粒體膜電位下降,增加細(xì)胞ATP生成量,改善線粒體功能,抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的線粒體凋亡通路,抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。3.早期艾地苯醌干預(yù)可以使P-GSK3β(Ser9)明顯增加,使GSK3β失活,失活的GSK3β影響下游β-catenin的磷酸化,P-β-Catenin (Ser33/37/Thr41)含量降低,促進(jìn)β-catenin從細(xì)胞漿向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移,并在細(xì)胞核中積累,影響其信號(hào)通路,保護(hù)線粒體功能,起到抑制oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡,可以作為一種抗氧化劑用于防治初期動(dòng)脈粥樣硬化。
【關(guān)鍵詞】：艾地苯醌 oxLDL HUVECs 細(xì)胞凋亡 Bcl-2 Bax cleaved caspase-3 艾地苯醌 oxLDL 線粒體 GSK3β β-catenin
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R543.5
【目錄】：

• 中文摘要6-13
• 英文摘要13-22
• 符號(hào)說(shuō)明22-24
• 前言24-33
• 第一部分 艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用33-59
• 材料和方法33-47
• 結(jié)果47-50
• 討論50-53
• 結(jié)論53-54
• 附圖54-59
• 第二部分 艾地苯醌對(duì)氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制研究59-85
• 材料和方法59-70
• 結(jié)果70-73
• 討論73-78
• 結(jié)論78-79
• 附圖79-85
• 參考文獻(xiàn)85-92
• 致謝92-93
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文93-94
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表94-95
• 英文論文Ⅰ95-110
• 英文論文Ⅱ110-130

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 張和平;談建新;王敬敏;郭宗艷;張?zhí)K明;毋亞坤;;心腦通配方對(duì)大鼠頸總動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中MMP-2的影響[J];西部中醫(yī)藥;2014年03期

2 陳仁玉;王惠娟;于慧丹;吳倩;王曉艷;李文菊;;人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與缺血性腦血管病的關(guān)系[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2014年02期

3 章少豐;蘇莉莉;;冠心病患者氧化低密度脂蛋白水平變化的臨床意義[J];臨床軍醫(yī)雜志;2014年06期

4 李瓊;;頸動(dòng)脈粥樣斑塊患者血清氧化低密度脂蛋白與C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性研究[J];臨床軍醫(yī)雜志;2014年08期

5 劉海云;崔艷茹;劉海菊;王曉敏;;菟絲子黃酮對(duì)氧化損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[J];時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥;2014年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 劉金萍;李昀;武軍駐;;動(dòng)脈粥樣硬化細(xì)胞研究模型的選擇與建立[A];《臨床心身疾病》雜志學(xué)術(shù)研討會(huì)綜合刊[C];2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 史悅;白藜蘆醇抑制氧化磷脂誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖和Cx43磷酸化的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

2 陽(yáng)輝;Ox-LDL對(duì)骨髓MSCs增殖、遷移的影響及其機(jī)制探討[D];中南大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 陳仁玉;人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與缺血性腦血管病的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 李婷婷;抗ApoA1抗體IgG與腦梗死相關(guān)性研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2013年

3 張揚(yáng);丹酚酸B對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化兔模型CD40-CD40L信號(hào)通路的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2013年

4 趙凱;單核細(xì)胞自體吞噬相關(guān)基因蛋白表達(dá)與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的研究[D];山東大學(xué);2014年

5 王嬋;硝苯地平對(duì)ApoE~(-/-)小鼠RAW 264.7巨噬細(xì)胞源性膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2014年

6 史承勇;17-AAG對(duì)頸動(dòng)脈球囊損傷大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 史艷蕾;下丘腦條件培養(yǎng)基對(duì)巨噬細(xì)胞內(nèi)吞ox-LDL的影響[D];蘇州大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：艾地苯醌對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：471519