第一部分:目的:鑒定、驗(yàn)證Rab27b基因敲除小鼠模型的遺傳性及觀察其組織病理學(xué)改變。方法:采用Real time PCR方法對(duì)CRISPR/Cas9介導(dǎo)的Rab27b(-/-)轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行Rab27b基因的表達(dá)情況檢測(cè)。同時(shí)采用HE染色觀察野生型小鼠和敲基因小鼠的心、肝、脾、肺、腎、腦組織病理結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果:經(jīng)過(guò)PCR鑒定、驗(yàn)證,F0代成功的基因敲除小鼠能穩(wěn)定遺傳到F1代,擴(kuò)繁后的Rab27b基因敲除小鼠無(wú)Rab27b蛋白表達(dá);HE染色得出Rab27b基因敲除小鼠與正常小鼠無(wú)明顯心、肝、脾、肺、腎、腦組織器官病理變化差異,可完全用于實(shí)驗(yàn)研究。結(jié)論:Rab27b基因敲除小鼠模型構(gòu)建成功,具有穩(wěn)定遺傳性,經(jīng)過(guò)擴(kuò)繁后,可以順利進(jìn)行課題研究。第二部分:目的:觀察錦紅湯對(duì)Rab27b基因敲除小鼠膿毒癥模型損傷的影響。方法:隨機(jī)將120只Rab27b基因敲除小鼠分為4組:敲基因Rab27b(-/-)組、Rab27b(-/-)sham組、Rab27b(-/-)+CLP組、Rab27b(-/-)+CLP+JHT組,每組30只,另設(shè)野生型WT組30只對(duì)照,采用盲腸結(jié)扎法(CLP)建立Rab27b(-/...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1：電泳圖鑒定敲基因鼠的結(jié)果

上海中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文112.1.1F0代小鼠鑒定策略如下圖所示:2.1.2F0代小鼠PCR電泳結(jié)果圖1：電泳圖鑒定敲基因鼠的結(jié)果注：B6為陰性對(duì)照，是B6基因組DNAN為空白對(duì)照，無(wú)模板的對(duì)照TRANS2KPLUSII條帶：8000bp\5000bp\3000bp\2000....

圖6：電泳圖鑒定F1代基因敲除小鼠的結(jié)果

上海中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文132.2.1F1代小鼠PCR電泳結(jié)果圖6：電泳圖鑒定F1代基因敲除小鼠的結(jié)果注：B6為陰性對(duì)照，是B6基因組DNAN為空白對(duì)照，無(wú)模板的對(duì)照TRANS2KPLUSII條帶：8000bp\5000bp\3000bp\2000bp\1000bp\750bp....

圖8-1：小鼠心臟組織HE染色照片（×100）

上海中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文162.4基因敲除小鼠與WT正常小鼠組織病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)2.4.1心臟組織病理改變正常組和Rab27b（-/-）小鼠心肌細(xì)胞體積均表現(xiàn)正常，兩組間心肌細(xì)胞間距均正常，心肌肥厚均不存在。兩組間不存在差異。圖8-1：小鼠心臟組織HE染色照片（×100）A：正常....

圖8-2：小鼠心臟組織HE染色照片（×200）

上海中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文162.4基因敲除小鼠與WT正常小鼠組織病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)2.4.1心臟組織病理改變正常組和Rab27b（-/-）小鼠心肌細(xì)胞體積均表現(xiàn)正常，兩組間心肌細(xì)胞間距均正常，心肌肥厚均不存在。兩組間不存在差異。圖8-1：小鼠心臟組織HE染色照片（×100）A：正常....

本文編號(hào)：4026097