背景與目的:子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)是子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)等組織存活于子宮腔外并浸潤生長的婦科常見病,主要癥狀包括盆腔疼痛、性交痛及不育等。EMs雖為良性疾病,卻往往表現(xiàn)細(xì)胞增殖增強(qiáng)、向周圍組織蔓延侵蝕等惡性腫瘤的生物學(xué)特性。研究發(fā)現(xiàn),特定基因突變在EMs發(fā)生發(fā)展中扮演重要作用。肌球蛋白(Myosin)是一組高度保守、在所有真核細(xì)胞中均表達(dá)的蛋白質(zhì),其主要功能是參與轉(zhuǎn)化細(xì)胞運(yùn)動(dòng)所需的機(jī)械能,在細(xì)胞遷移和肌肉收縮等過程過發(fā)揮作用。肌球蛋白重鏈8(MYH8)是肌球蛋白家族重要成員,可介導(dǎo)細(xì)胞的遷移和粘附等生物學(xué)過程。研究發(fā)現(xiàn),包括腸癌、肺癌、卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌在內(nèi)的多種腫瘤中均存在MYH8基因體細(xì)胞突變;功能研究表明MYH8表達(dá)異�？蓪�(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生。因EMs具有異常增殖、凋亡、侵襲遷移等類腫瘤特征,我們假設(shè)EMs患者可能存在MYH8基因突變且在EMs發(fā)展中扮演重要作用,影響下游相關(guān)信號通路,共同促進(jìn)EMs發(fā)病。方法:收集江西省婦幼保健院病理確診的152名卵巢EMs患者靜脈外周血和卵巢囊壁組織,以及485例非EMs卵巢良性疾病對照女性血和卵巢病變組織樣品。經(jīng)提取血...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖2.Lentivirus滴度測定六孔板示意圖

第2章實(shí)驗(yàn)和方法252.3.6.2Lentivirus病毒滴度測定（稀釋計(jì)數(shù)法）（1）稀釋計(jì)數(shù)法:板孔內(nèi)按10倍梯度稀釋病毒，感染細(xì)胞后計(jì)算每孔中含有活性的轉(zhuǎn)染病毒數(shù)。（2）293T細(xì)胞準(zhǔn)備:用0.25%胰酶-EDTA消化293T細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)液，重懸浮液后計(jì)細(xì)胞數(shù)，取細(xì)胞數(shù)....

圖3.MYH8突變的代表性膠圖，箭頭所指相關(guān)突變位點(diǎn)

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果41鑒定出MYH8基因的兩個(gè)雜合錯(cuò)義突變位點(diǎn)，即c.1441A>C(p.I481L)和C.4057G>A(p.E1353K)（如圖1，2表示）。在我們研究樣本里，這些突變既未在公共數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)，也未在485名漢族對照組（無子宮內(nèi)膜異位癥的婦女）中檢測到。圖3.MYH....

圖4.MYH8突變在多個(gè)脊椎動(dòng)物物種中的進(jìn)化保守性分析

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果41鑒定出MYH8基因的兩個(gè)雜合錯(cuò)義突變位點(diǎn)，即c.1441A>C(p.I481L)和C.4057G>A(p.E1353K)（如圖1，2表示）。在我們研究樣本里，這些突變既未在公共數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)，也未在485名漢族對照組（無子宮內(nèi)膜異位癥的婦女）中檢測到。圖3.MYH....

圖5.瓊脂糖凝膠電泳顯示組織樣本PCR產(chǎn)物電泳圖

第3章實(shí)驗(yàn)結(jié)果42DNA提取后，設(shè)計(jì)相應(yīng)引物（表1）進(jìn)行PCR擴(kuò)增（圖5）。圖5.瓊脂糖凝膠電泳顯示組織樣本PCR產(chǎn)物電泳圖Figure5.ElectrophoresisofPCRproductsintissuesamplesrevealedbyagarosegelelectro....

本文編號：3962057