研究背景和研究目的:哺乳類動物出生后,初級卵母細(xì)胞停滯在第一次減數(shù)分裂的前期,含有較大的核,為生發(fā)泡(GV)。研究顯示,環(huán)磷酸腺苷(c AMP)可通過卵丘顆粒細(xì)胞與卵母細(xì)胞間的縫隙連接而在這兩種細(xì)胞間穿梭流動,對卵母細(xì)胞維持減數(shù)分裂阻滯狀態(tài)起到促進(jìn)作用。性成熟后,卵泡生長啟動,卵母細(xì)胞內(nèi)c AMP水平下降,促卵母細(xì)胞成熟因子表達(dá)增加,初級卵母細(xì)胞開始生長并完成第一次減數(shù)分裂,生發(fā)泡破裂,排出第一極體,而在排卵后停滯于第二次減數(shù)分裂的中期即MⅡ期。卵母細(xì)胞成熟主要包括核成熟及質(zhì)成熟,二者只有同步化,卵母細(xì)胞的發(fā)育才能最優(yōu)化。卵母細(xì)胞發(fā)育與成熟的每個細(xì)胞事件,都依賴細(xì)胞內(nèi)能量支持,線粒體是其能量工廠。卵丘細(xì)胞來源的丙酮酸是卵母細(xì)胞三羧酸循環(huán)(TAC)能量代謝的主要原料;而葡萄糖本身和/或糖代謝中間產(chǎn)物、脂肪酸和氨基酸,也可能是卵母細(xì)胞的能量代謝的底物。尤其是葡萄糖中間代謝產(chǎn)物-乙酰輔酶A,可轉(zhuǎn)入線粒體進(jìn)行氧化呼吸,合成大量ATP。脂肪酸β氧化(FAO)是卵母細(xì)胞成熟的另一個重要的能量來源。一分子脂肪酸氧化可氧化在線粒體內(nèi)產(chǎn)生106個ATP而一分子葡萄糖大約為30個ATP,因而脂肪酸氧化是卵...

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．卵母細(xì)胞內(nèi)Ｈ）Ｋ４的表達(dá)Ａ．年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞ＰＤＫ４的含量較年輕小鼠Ｍ丨丨期??卵母細(xì)胞減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（戶＜〇．〇５）

低于年輕小鼠Ｍｉｌ期卵母細(xì)胞（ＰＣ０．０５）。而且，年??輕小鼠ＧＶ期的卵丘細(xì)胞ＰＤＫ４的含量較年輕小鼠Ｍ?ＩＩ期卵丘細(xì)胞減少，差異有統(tǒng)計??學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５）。髙齡小鼠ＭＩＩ期卵丘細(xì)胞ＰＤＫ４的表達(dá)水平明顯低于年輕小鼠Ｍｉｌ??期卵丘細(xì)胞（戶＜〇．〇５）。??Ａ?ＰＤＫ４?....

圖２．?ＧＶ期卵母細(xì)胞顯微注射ＰＤＫ４小干擾后ＰＤＫ４的表達(dá)年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞顯微??注射ＰＤＫ４小干擾后，通過免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)注射ＰＤＫ４小干擾，卵母細(xì)胞ＰＤＫ４的表達(dá)下降??（Ｐ＜０．０５），干涉效率在５３％

結(jié)果?卵母細(xì)胞中丙酮酸脫氫酶激酶４的作用及其機制研究??的Ｍ２培養(yǎng)液孵育２４小時，通過免疫熒光檢測ＰＤＫ４的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)注射ＰＤＫ４??小干擾，卵母細(xì)胞ＰＤＫ４的表達(dá)下降（Ｐ＜０．０５），干涉效率在５３％。??ＰＤＫ４?Ｈｏｅｃｈｓｔ?Ｍｅｒｇｅ??測■■■??ｓｉＲＮＡ－ｐｄ....

圖３．ＰＤＫ４干涉后對卵母細(xì)胞成熟的作用Ａ．年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞干涉ＰＤＫ４表達(dá)后，卵??母細(xì)胞０乂８０從８９．丨４％下降至５４．５５％（／＞＜０．０５）８．干涉？０�。蓿幢磉_(dá)后卵母細(xì)胞第一級體排出比??

卵母細(xì)胞中丙酮酸脫氫酶激酶４的作用及其機制研究?結(jié)果??Ａ?１００－１?Ｂ?１００－??一?Ｈ?ｈｈ?Ｓ８。－??ｆ：?■?ｉ?Ｓ：＿?．??Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４?Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４??圖３．ＰＤＫ４干涉后對卵母細(xì)胞成熟的作用Ａ．年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞干涉ＰＤＫ....

圖４．?ＰＤＫ４干涉后卵母細(xì)胞ＲＯＳ水平增髙年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞顯微注射ＰＤＫ４小干??擾后在含有減數(shù)分裂抑制劑ＩＢＸＭ的Ｍ２培養(yǎng)液孵育２４小時，后在無ＩＢＸＭ的Ｍ２培養(yǎng)液孵育??２１??

卵母細(xì)胞中丙酮酸脫氫酶激酶４的作用及其機制研究?結(jié)果??Ａ?１００－１?Ｂ?１００－??一?Ｈ?ｈｈ?Ｓ８。－??ｆ：?■?ｉ?Ｓ：＿?．??Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４?Ｃｏｎ?ｓｉＲＮＡ－ｐｄｋ４??圖３．ＰＤＫ４干涉后對卵母細(xì)胞成熟的作用Ａ．年輕小鼠ＧＶ期卵母細(xì)胞干涉ＰＤＫ....

本文編號：3957940