發(fā)布時間：2024-03-27 01:55

　　第一部分 大鼠腦出血后神經(jīng)元中GATA結(jié)合蛋白-4(GATA-4)的表達變化目的探討大鼠腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)后神經(jīng)元內(nèi)GATA-4的表達變化。方法1、實驗動物分組:健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠42只,隨機分為Sham(假手術(shù))組和實驗組:ICH后6小時、12小時、24小時、148小時、72小時及7天組,一共7組,每組6只大鼠。2、ICH組模型建立:將大鼠麻醉成功后,抽取大鼠自體動脈血,注入右側(cè)基底節(jié)區(qū),模擬自發(fā)性腦出血。按照實驗分組預(yù)定時間,在ICH建模后6小時、12小時、24小時、48小時、72小時及7天對大鼠實施安樂死,灌注取腦。3、體外ICH模型建立及分組:分離大鼠胚胎的大腦皮層,收集并培養(yǎng)神經(jīng)元。將培養(yǎng)的神經(jīng)元分為6組:control組,3小時組,6小時組,12小時組,18小時組,24小時組。在實驗組加入氧合血紅蛋白(OxyHb)處理建立ICH體外模型。按照實驗分組預(yù)定的時間收集神經(jīng)元。4、應(yīng)用聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)(PCR技術(shù))檢測大鼠腦組織中GATA-4mRNA水平在ICH后不同時間點的表達趨勢。應(yīng)用蛋白印跡...

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻
第一部分 大鼠腦出血后神經(jīng)元中GATA-4蛋白的表達變化
    材料與方法
        1. 材料
        2. 實驗方法
        3. 統(tǒng)計學分析
    結(jié)果
        1. 大鼠存活率
        2. 大體標本觀察
        3、ICH后腦組織中的GATA-4 mRNA水平升高
        4. ICH后大鼠腦組織中GATA-4蛋白表達增高
        5. ICH后大鼠腦組織神經(jīng)元中GATA-4蛋白表達增高
        6. 體外神經(jīng)元中GATA-4蛋白表達增高
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
第二部分 GATA-4蛋白變化對大鼠腦出血后神經(jīng)元的影響
    材料與方法
        1. 設(shè)備與試劑
        2. 實驗方法
    結(jié)果
        1、大鼠存活率
        2、干預(yù)后各組大鼠腦內(nèi)GATA-4蛋白的表達有差異
        3、ICH后大鼠腦水腫指數(shù)比較
        4、ICH后大鼠的神經(jīng)功能損害的變化
        5、ICH后大鼠腦內(nèi)神經(jīng)元變性情況
        6、ICH后大鼠腦組織出現(xiàn)神經(jīng)元細胞凋亡
        7、在體內(nèi)GATA-4蛋白影響ICH后caspase-3蛋白的活化
        8、在體內(nèi)GATA-4蛋白影響ICH后Bax蛋白的表達
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
第三部分 GATA-4調(diào)控神經(jīng)元凋亡的機制研究
    材料與方法
        1 設(shè)備與試劑
        2. 實驗方法
        3. 統(tǒng)計學分析
    結(jié)果
        1. GATA-4蛋白在體外誘導ICH后神經(jīng)元凋亡
        2、siRNA或質(zhì)粒能干預(yù)神經(jīng)元中GATA-4蛋白的表達
        3、各組神經(jīng)元中Caspase-3蛋白活化的情況
        4、各組神經(jīng)元中Bax蛋白的表達
        5、在體外神經(jīng)元中,GATA-4蛋白能干預(yù)神經(jīng)元中NK-κB的磷酸化表達
        6、GATA-4質(zhì)粒和GATA-4 105A質(zhì)粒對GATA-4蛋白的表達及其磷酸化的影響
        7、GATA-4蛋白磷酸化對NK-κB活化的影響
        8、GATA-4蛋白磷酸化對Bax蛋白表達的影響
        9、GATA-4蛋白磷酸化對Caspase-3活化的影響
    討論
    結(jié)論
    參考文獻
綜述
    參考文獻
中英文縮略詞表
攻讀學位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3940015