本文關(guān)鍵詞：隆乳材料表面理化性能與細(xì)胞粘附性研究和包膜攣縮的臨床關(guān)聯(lián)分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景:隆乳術(shù)(Augmentation Mammoplasty,AM)是整形美容外科中常見(jiàn)的手術(shù)方式。據(jù)調(diào)查,僅2011年,就有超過(guò)30萬(wàn)人接受了AM。包膜攣縮(Capsular Contracture,CC)作為AM的并發(fā)癥之一,逐漸受到人們的重視,有早期報(bào)道稱其發(fā)病率超過(guò)30%。目前,CC的發(fā)生機(jī)制尚不清楚。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,CC的發(fā)生是由于機(jī)體植入假體后,發(fā)生囊性纖維化的結(jié)果。同時(shí)也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),炎性浸潤(rùn)(Inflammatory Infiltration,II)和膠原沉積(Collagen Deposition,CD)也是導(dǎo)致其發(fā)病的相關(guān)因素。此外假體的破裂、變形或滲漏,都可能引起囊性纖維化和CC,甚至還有潛在的致癌性�，F(xiàn)目前臨床上的隆乳假體材料種類繁多,可以大致分為光面假體材料與毛面假體材料兩類。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,毛面假體材料隆乳術(shù)后的CC發(fā)生率一般情況下要小于光面假體材料術(shù)后的CC發(fā)生率,同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道兩種假體材料所導(dǎo)致的CC發(fā)生率相差無(wú)幾。此外有學(xué)者發(fā)現(xiàn),CC與細(xì)胞以及膠原纖維(Collagen Fibrils,CF)在假體表面的粘附情況也存在密切關(guān)系。所以我們首先從材料表面的理化性能研究出發(fā),對(duì)比分析找出材料表面理化性質(zhì)的不同之處,為研發(fā)理化性能更好的隆乳假體材料提供一定的理論基礎(chǔ)。然后從細(xì)胞層面探討細(xì)胞在不同材料上的粘附性問(wèn)題,通過(guò)觀察細(xì)胞在材料表面的增殖和細(xì)胞骨架的變化以及檢測(cè)細(xì)胞黏附相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,來(lái)進(jìn)一步證實(shí)細(xì)胞在不同假體材料表面的粘附性差異,從而解釋CC在不同假體材料上的發(fā)生率的差異。隨著AM的臨床應(yīng)用越來(lái)越多,CC的發(fā)生率也逐漸增高。除假體材料的類型會(huì)影響CC的發(fā)生率外,其它的相關(guān)因素如灌注材料、植入位置、手術(shù)切口等也逐漸受到人們的關(guān)注,同時(shí)也有文獻(xiàn)報(bào)道這些相關(guān)因素的確存在影響CC發(fā)生的可能性,但目前還缺乏多因素循證醫(yī)學(xué)的證據(jù)以及系統(tǒng)的臨床關(guān)聯(lián)分析。所以,本研究收集了假體植入術(shù)后發(fā)生CC的相關(guān)臨床研究,并通過(guò)累積meta分析(Cumulative Meta Analysis,CMA),比較光面假體和毛面假體植入術(shù)后對(duì)CC發(fā)生的影響。在此基礎(chǔ)上,綜合分析相關(guān)因素如灌注材料、植入位置、手術(shù)切口等對(duì)CC發(fā)生的具體影響情況,最終得出結(jié)論證明這些相關(guān)因素是否會(huì)影響CC的發(fā)生率。為更好地指導(dǎo)臨床AM的開(kāi)展起到一定的作用,為如何降低cc的發(fā)生提供更為合理的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。材料與方法:1.材料表面理化性能研究:選取臨床上常用的隆乳假體材料:光面材料2個(gè),毛面材料2個(gè)(材料分別來(lái)自曼托公司與萬(wàn)和公司)。每個(gè)材料上分別選取1處位置作為實(shí)驗(yàn)樣本,并命名(smooth1、smooth2、rough1、rough2,簡(jiǎn)稱s1、s2、r1、r2)。材料通過(guò)剪裁、消毒、風(fēng)干等預(yù)處理后,采用原子力顯微鏡(atomicforcemicroscope,afm)觀察材料表面的形貌特征以及對(duì)比分析兩種材料表面形貌的不同之處。采用奧林巴斯lext激光顯微鏡對(duì)假體表面進(jìn)行掃描,將掃描得到的圖像經(jīng)過(guò)軟件分析得到粗糙度(roughness)、偏度(skewness)與峰度(kurtosis)的檢測(cè)結(jié)果,掃描區(qū)域的面積為644x642μm,截止波長(zhǎng)為80μm,測(cè)量面積為比例尺為100μm。采用水接觸角(watercontactangle,wca)對(duì)材料表面的疏水性進(jìn)行檢測(cè),分析時(shí)采用去離子水,將水滴滴于四個(gè)樣本的表面并等待0.5-1min后進(jìn)行測(cè)試,每個(gè)待測(cè)樣本取間距5-8mm的3個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量,共6次讀數(shù),取算術(shù)平均值。為確保實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性,上述實(shí)驗(yàn)均進(jìn)行了五次。2.材料表面細(xì)胞粘附性研究:首先確定采用兒童包皮組織進(jìn)行人成纖維細(xì)胞(fibroblasts)的提取(包皮組織來(lái)源于第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院普外科),根據(jù)實(shí)際情況,我們采用消化分離法進(jìn)行fibroblasts的培養(yǎng)。同樣嚴(yán)格選取4個(gè)樣本(s1、s2、r1、r2)作為研究對(duì)象,將fibroblasts接種于6孔板中的每個(gè)毛面與光面假體表面,放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%co2)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)中注意調(diào)整好細(xì)胞密度(細(xì)胞密度大約為5x105個(gè)/ml)。通過(guò)對(duì)fibroblasts的骨架蛋白(主要是肌動(dòng)蛋白actin)進(jìn)行染色(染料為微絲綠色熒光探針actin-trackergreen,atg)后,放于bx53激光共聚焦顯微鏡下觀察fibroblasts在假體材料上生長(zhǎng)的骨架形態(tài)。同時(shí),對(duì)fibroblasts在假體材料表面粘附性進(jìn)行對(duì)比觀察。其中包括:1)細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白(骨橋蛋白(osteopontin,opn)、黏著斑蛋白(vinculin)、斑聯(lián)蛋白(zyxin)、踝蛋白(talin)的免疫熒光染色觀察;2)fibroblasts在材料表面的增殖能力比較(cck-8法);3)westernblot技術(shù)檢測(cè)fibroblasts粘附相關(guān)蛋白在不同材料上的表達(dá)情況。3.cc臨床關(guān)聯(lián)分析:通過(guò)檢索電子文獻(xiàn)庫(kù):googlescholar(谷歌學(xué)術(shù)搜索)、embase(荷蘭醫(yī)學(xué)文摘)、pubmed、gopubmed、webofscience、biosispreviews(生物學(xué)文摘)、scifinder(化學(xué)文摘)以及相關(guān)中文論著數(shù)據(jù)庫(kù),搜集到關(guān)于不同假體植入術(shù)后發(fā)生cc的相關(guān)臨床研究。同時(shí)制定出文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)。納入的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)(randomizedcontrolledtrial,rct)以cocharne質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià),回顧性研究(retrospectivestudy,rs)則以紐卡斯?fàn)?渥太華(newcastle-ottawa)評(píng)分守則進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。擬定兩名研究員將數(shù)據(jù)庫(kù)中搜索到的文獻(xiàn)進(jìn)行題目和摘要的仔細(xì)閱讀,閱讀過(guò)程是獨(dú)立的(雙盲法)。最終按照指定的篩選條件對(duì)每一篇文獻(xiàn)進(jìn)行嚴(yán)格篩選,針對(duì)有分歧的研究由第三名研究員進(jìn)行重新審核,然后對(duì)篩選到的文獻(xiàn)進(jìn)行評(píng)分。將提取數(shù)據(jù)采取按樣本量由小到大的順序進(jìn)行累計(jì),選擇隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行合并,并按假體灌注材料、植入位置、手術(shù)切口和隨訪時(shí)間進(jìn)行cma,合并指標(biāo)為相對(duì)危險(xiǎn)度(relativerisk,rr)及95%置信區(qū)間(confidenceinterval,95%ci);采用begg’stest和eeeg’stest同時(shí)檢測(cè)發(fā)表偏倚;通過(guò)將合并結(jié)果轉(zhuǎn)換為固定效應(yīng)模型,進(jìn)行敏感性分析;軟件采用stata11.0和rveman5.0。結(jié)果:1.材料表面理化性能研究:在對(duì)不同假體材料的理化性能檢測(cè)中,afm顯示光面假體表面都具備內(nèi)在整齊,規(guī)則,形貌成脊?fàn)畹奶匦?同時(shí)二者的表面都有巖石狀的形成物和溝痕。結(jié)合假體制作過(guò)程,我們推測(cè)光面假體的表面形貌是硅膠在固化過(guò)程中向植入模板蠕動(dòng)所致。毛面假體表面布滿凸出部分,同時(shí)又有深開(kāi)的裂縫,相對(duì)于光面假體表面顯得較凹凸不平,沒(méi)有規(guī)則的形貌。粗糙度檢測(cè)結(jié)果顯示毛面假體的粗糙系數(shù)平均值要大于光面假體;偏度檢測(cè)結(jié)果顯示毛面假體的負(fù)偏態(tài)值比較小,表明其表面溝痕更多,相反,光面樣本的正偏態(tài)值較大則說(shuō)明它們表面的尖峰更多;峰度檢測(cè)結(jié)果顯示光面樣本的峰態(tài)系數(shù)普遍偏高,這說(shuō)明在這種樣品的表面尖峰相似度較高,且尖狀部位會(huì)反復(fù)出現(xiàn),顯得整個(gè)表面較平整。相對(duì)而言,毛面樣本的峰態(tài)系數(shù)低,這說(shuō)明毛面假體表面的相類似尖峰重復(fù)性不好,從而使得整個(gè)表面顯得更加不規(guī)則。wca檢測(cè)結(jié)果顯示,r1樣本的接觸角值最大,具體為148°,上下浮動(dòng)為1.9°,而s2樣本的接觸角值最小,具體是107.2°,上下浮動(dòng)為0.5°。2.材料表面細(xì)胞粘附性研究:從細(xì)胞在假體材料上的生長(zhǎng)數(shù)量來(lái)看,s1、s2假體材料表面生長(zhǎng)的fibroblasts數(shù)量明顯少于r1、r2假體材料表面生長(zhǎng)的fibroblasts數(shù)量,cck-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)也同樣說(shuō)明了這個(gè)問(wèn)題。從細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)來(lái)看,毛面假體上的fibroblasts所表達(dá)的actin明顯好于光面,而且細(xì)胞間的排列也顯得不太規(guī)則整齊。同時(shí),毛面假體上的fibroblasts伸出的絲狀偽足也可初步推斷毛面上的fibroblasts粘附性更好。同時(shí),細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白o(hù)pn、vinculin、zyxin、talin在毛面假體上的表達(dá)情況均好于光面上的表達(dá)情況。用westernblot檢測(cè)細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白在fibroblasts中的表達(dá)情況來(lái)看,毛面組的細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白的表達(dá)量要明顯高于光面組的蛋白表達(dá)量。且細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白的總體表達(dá)量排序依次是:opnvinculintalinzyxin。3.cc臨床關(guān)聯(lián)分析:從隆乳術(shù)后光面與毛面隆乳假體材料cc發(fā)生率的臨床關(guān)聯(lián)分析來(lái)看,總體結(jié)論為光面假體材料所導(dǎo)致的CC的發(fā)生率要高于毛面假體的CC發(fā)生率。亞組分析表明:A、灌注方式:無(wú)論采用生理鹽水灌注或硅膠灌注,其CC發(fā)生率都是光面要多于毛面;B、植入位置:將假體置于“肌肉下”也許會(huì)降低光面假體的CC發(fā)生率,將假體置于“乳腺下”的分析結(jié)果與總體結(jié)論保持一致;C、手術(shù)切口:當(dāng)手術(shù)切口采用“乳暈切口”和“腋路切口”也許會(huì)降低光面假體的CC發(fā)生率,采用“乳房下皺襞切口”與“乳房切除術(shù)切口”,其CC發(fā)生率仍然是光面大與毛面。結(jié)論:1.毛面假體材料表面比光面假體表面更加不規(guī)則,波峰與溝痕較光面多,疏水性也較光面更明顯。這些毛面假體表面的理化性能更有利于fibroblasts的粘附與增殖。2.Fibroblasts在毛面假體上的增殖率較大,而且粘附得更加緊密,細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白也分泌較多,說(shuō)明毛面假體材料表面更有利于fibroblasts的生長(zhǎng)。細(xì)胞與毛面假體材料之間粘附得更緊密,說(shuō)明fibroblasts與假體之間的排斥反應(yīng)較小,更加有利于假體與人體的有機(jī)融合。細(xì)胞在毛面假體表面生長(zhǎng)也排列不規(guī)則,說(shuō)明細(xì)胞粘附所產(chǎn)生的收縮力不統(tǒng)一,力量會(huì)互相抵消,從而降低了CC的發(fā)生率。3.臨床關(guān)聯(lián)分析可知,光面假體術(shù)后CC發(fā)生率要高于毛面假體術(shù)后的CC發(fā)生率。亞組分析說(shuō)明,無(wú)論灌注方式如何改變(生理鹽水灌注或硅膠灌注),光面假體導(dǎo)致的CC發(fā)生率高于毛面假體的CC發(fā)生率。在假體植入位置的選擇上,將光面假體植入在肌肉下而非乳腺下,或許會(huì)降低其CC的發(fā)生率。在手術(shù)切口的選擇上,光面假體采用“乳暈切口”或“腋路切口”進(jìn)行手術(shù),其CC的發(fā)生率要低于采用“乳房下皺襞切口”與“乳房切除術(shù)切口”進(jìn)行手術(shù)的CC發(fā)生率。為更好地指導(dǎo)臨床AM的開(kāi)展起到一定的作用,為如何降低CC的發(fā)生提供更為合理的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：包膜攣縮 炎性浸潤(rùn) 膠原沉積 細(xì)胞粘附 生物相容性 meta分析 OPN Vinculin Zyxin Talin CCK-8
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R655.8;R318.08
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表4-8
• 英文摘要8-13
• 中文摘要13-17
• 第一章 前言17-25
• 第二章 光面與毛面假體材料表面的理化性能研究25-32
• 2.1 材料與預(yù)處理25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-27
• 2.3 結(jié)果27-30
• 2.4 討論30-32
• 第三章 光面與毛面假體材料表面的細(xì)胞粘附性研究32-50
• 3.1 材料與方法32-42
• 3.2 結(jié)果42-48
• 3.3 討論48-50
• 第四章 光面與毛面隆乳假體材料包膜攣縮發(fā)生率的臨床關(guān)聯(lián)分析50-66
• 4.1 材料與方法50-51
• 4.2 結(jié)果51-64
• 4.3 討論64-66
• 全文結(jié)論66-68
• 參考文獻(xiàn)68-79
• 文獻(xiàn)綜述一 不良包膜攣縮癥的病原病理學(xué)及其內(nèi)外源性假說(shuō)的研究進(jìn)展79-96
• 參考文獻(xiàn)87-96
• 文獻(xiàn)綜述二 關(guān)于Poly Implant Prothèse公司隆乳假體材料的應(yīng)用研究進(jìn)展96-108
• 參考文獻(xiàn)103-108
• 文獻(xiàn)綜述三 關(guān)于生物材料細(xì)胞粘附性以及異物反應(yīng)的研究進(jìn)展108-137
• 參考文獻(xiàn)123-137
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果137-139
• 致謝139

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本文編號(hào)：393971