目的:最近研究表明CD73在腫瘤進(jìn)展中起著關(guān)鍵作用,但CD73在胰腺癌中的研究尚少。此外,關(guān)于CD73所涉及的調(diào)控機(jī)制知之甚少。此研究的目的是明確CD73在胰腺癌中的表達(dá)分布及其與臨床病理參數(shù)、患者預(yù)后之間的相關(guān)性,以及CD73分子對胰腺癌細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期等的作用及機(jī)制,進(jìn)一步闡明CD73促進(jìn)胰腺癌進(jìn)展的相關(guān)分子機(jī)制。方法:采用Western Blot和免疫組化法分別檢測胰腺癌細(xì)胞和組織中CD73的表達(dá)情況;并統(tǒng)計與臨床病理資料和生存時間相關(guān)性;通過轉(zhuǎn)染CD73-siRNA對CD73表達(dá)水平進(jìn)行敲減,觀察細(xì)胞的增殖,凋亡以及周期變化。通過轉(zhuǎn)錄組測序檢測并驗證CD73調(diào)控的下游信號通路變化。通過轉(zhuǎn)染以及熒光素酶實驗等驗證miR-30a-5p和CD73之間的標(biāo)靶關(guān)系,以及miR-30a-5p/CD73信號軸的變化對胰腺癌吉西他濱化療敏感性變化的機(jī)制研究。結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)CD73表達(dá)在胰腺導(dǎo)管腺癌(PDAC)中表達(dá)上調(diào),并且其高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)。CD73敲除細(xì)胞系通過AKT/ERK/cyclinD信號傳導(dǎo)途徑抑制細(xì)胞生長并誘導(dǎo)細(xì)胞周期G1期阻滯。我們還發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子受體(TNFR)2參與...

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【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
主要實驗設(shè)備儀器和軟件
第一部分 CD73在胰腺癌中的表達(dá)情況及其功能研究
    1.1 前言
    1.2 材料與方法
        1.2.1 材料
        1.2.2 方法
    1.3 結(jié)果
        1.3.1: 生物信息學(xué)分析CD73在胰腺癌中表達(dá)水平
        1.3.2: CD73在胰腺癌細(xì)胞系中表達(dá)水平
        1.3.3: CD73在胰腺癌組織中表達(dá)水平
        1.3.4: CD73的表達(dá)水平與臨床病理學(xué)特征相關(guān)性
        1.3.5: CD73的表達(dá)水平與預(yù)后相關(guān)性
        1.3.6: 胰腺癌細(xì)胞系CD73敲除效率檢測
        1.3.7: CD73敲除抑制胰腺癌細(xì)胞增殖速率,延遲倍增時間
        1.3.8: CD73敲除促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞凋亡水平
        1.3.9: CD73敲除導(dǎo)致胰腺癌細(xì)胞周期產(chǎn)生G1期阻滯
        1.3.10: 細(xì)胞周期雙阻斷實驗
        1.3.11: 周期相關(guān)蛋白檢測
        1.3.12: CD73敲除抑制AKT/ERK信號通路
    1.4 討論
    1.5 結(jié)論
第二部分 CD73調(diào)控TNFR2介導(dǎo)的AKT/ERK信號通路激活
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1: CD73敲除細(xì)胞系轉(zhuǎn)錄組測序
        2.3.2: CD73敲除細(xì)胞系TNFR2表達(dá)水平下降
        2.3.3: 胰腺癌組織中CD73和TNFR2表達(dá)水平相關(guān)性
        2.3.4: TNF-A通過TNFR2受體激活A(yù)KT/ERK信號通路
        2.3.5: CD73調(diào)控TNFR2介導(dǎo)的AKT/ERK信號通路
        2.3.6: TNF-A在CD73敲除細(xì)胞內(nèi)和上清中表達(dá)水平
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第三部分 MIR-30A-5P通過靶向作用于CD73抑制胰腺癌吉西他濱化療敏感性研究
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1: 生物信息學(xué)預(yù)測標(biāo)靶關(guān)系
        3.3.2: MIR-30A-5P靶向作用于CD73并調(diào)控其表達(dá)
        3.3.3: MIR-30A-5P靶向作用于CD73的3'非翻譯區(qū)
        3.3.4: MIR-30A-5A在胰腺癌中表達(dá)水平
        3.3.5: MIR-30A-5A通過靶向CD73抑制胰腺癌增殖
        3.3.6: 胰腺癌吉西他濱耐藥細(xì)胞系表達(dá)譜分析
        3.3.7: 吉西他濱刺激對MIR-30A-5P和CD73表達(dá)水平的影響
        3.3.8: MIR-30A-5P通過靶向CD73促進(jìn)吉西他濱化療敏感性
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號：3914236