背景:缺血性腦卒中主要是由于腦組織局部血流灌注突然減少或完全中斷,導(dǎo)致由神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞共同組成的神經(jīng)血管單元(Neurovascular Unit,NVU)受損,最終導(dǎo)致神經(jīng)功能障礙。星形膠質(zhì)細(xì)胞作為NVU的重要組成部分,在腦缺血/再灌注后通過(guò)多種機(jī)制維持神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)和功能。由星形膠質(zhì)細(xì)胞縫隙連接蛋白43(connexin43,C_x43)構(gòu)成的半通道和縫隙連接(gap junction,GJ)已被證明在腦缺血/再灌注損傷中通過(guò)傳遞各種有益或有害的信息而發(fā)揮重要作用。最近的研究發(fā)現(xiàn)C_x43可以調(diào)節(jié)自噬的發(fā)生,而此功能與其胞間通訊功能無(wú)關(guān)。我們前期研究也發(fā)現(xiàn)從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)移至線粒體的C_x43可以通過(guò)穩(wěn)定腦缺血后線粒體的功能從而發(fā)揮保護(hù)作用。鑒于線粒體是細(xì)胞能量代謝的重要場(chǎng)所,我們認(rèn)為C_x43對(duì)于線粒體功能的調(diào)節(jié)是其抗腦缺血/再灌注損傷的重要方面。因此,作為細(xì)胞清除受損或者功能障礙的線粒體的重要方式——線粒體自噬,走入了我們關(guān)注的視線。然而,線粒體自噬在腦缺血/再灌注中扮演的角色及其是否參與C...

【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
前言
中文摘要
Abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 腦缺血/再灌注損傷概述
    1.2 線粒體自噬與腦缺血/再灌注損傷
        1.2.1 自噬/線粒體自噬的概念
        1.2.2 線粒體自噬的分子機(jī)制
        1.2.3 線粒體自噬的檢測(cè)方法
        1.2.4 線粒體自噬在腦缺血/再灌注損傷中的研究進(jìn)展
    1.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43與腦缺血/再灌注損傷
        1.3.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞的功能概述
        1.3.2 星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43的結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43在腦缺血/再灌注損傷中的變化及作用
    1.4 星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43與線粒體自噬
    1.5 展望
第2章 原代星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元共培養(yǎng)體系及腦缺血/再灌注體外模型的建立
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 試劑配制
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 小鼠大腦皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定
        2.3.2 小鼠大腦皮層神經(jīng)元的培養(yǎng)及鑒定
        2.3.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元共培養(yǎng)體系及OGD/R模型的建立
    2.4 討論
        2.4.1 原代星形膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.4.2 原代神經(jīng)元的培養(yǎng)
        2.4.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元共培養(yǎng)體系的建立
        2.4.4 體外腦缺血/再灌注模型——OGD/R模型的建立
    2.5 結(jié)論
第3章 星形膠質(zhì)細(xì)胞在OGD/R損傷后自噬/線粒體自噬的變化規(guī)律及作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 試劑配制
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 星形膠質(zhì)細(xì)胞在OGD/R不同時(shí)間自噬相關(guān)蛋白及線粒體膜蛋白的變化
        3.3.2 OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43與LC3B共定位
        3.3.3 星形膠質(zhì)細(xì)胞在OGD/R后通過(guò)自噬清除受損的線粒體
        3.3.4 增強(qiáng)自噬可提高星形膠質(zhì)細(xì)胞在OGD/R后的存活率
    3.4 討論
        3.4.1 OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬及線粒體自噬的變化
        3.4.2 OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞自噬/線粒體自噬對(duì)自身存活的影響
        3.4.3 OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43與自噬/線粒體自噬
    3.5 結(jié)論
第4章 調(diào)控C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬及神經(jīng)元存活的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 試劑配制
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 Si RNA敲低星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43成功
        4.3.2 敲低C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞存活率的影響
        4.3.3 敲低C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體膜電位的影響
        4.3.4 敲低C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)ROS及釋放至胞外的NO的影響
        4.3.5 敲低C_x43對(duì)OGD/R后共培養(yǎng)體系中神經(jīng)元存活率的影響
        4.3.6 敲低C_x43對(duì)OGD/R后共培養(yǎng)體系中神經(jīng)元凋亡的影響
        4.3.7 敲低C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬的影響
        4.3.8 敲低C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬PINK1及FUNDC1途徑的影響
    4.4 討論
        4.4.1 C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體功能的影響
        4.4.2 C_x43對(duì)OGD/R后神經(jīng)元存活的影響
        4.4.3 C_x43對(duì)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬的影響
        4.4.4 C_x43對(duì)OGD/R后線粒體自噬途徑PINK1及FUNDC1的影響
    4.5 結(jié)論
第5章 C_x43調(diào)控OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬及神經(jīng)元存活的機(jī)制
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 試劑配制
        5.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 Si RNA敲低星形膠質(zhì)細(xì)胞PINK1成功
        5.3.2 腺病毒過(guò)表達(dá)星形膠質(zhì)細(xì)胞C_x43成功
        5.3.3 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)調(diào)控OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬
        5.3.4 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)介導(dǎo)的線粒體自噬維持OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體膜電位
        5.3.5 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)介導(dǎo)的線粒體自噬清除OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的ROS并減少NO的釋放
        5.3.6 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)介導(dǎo)的線粒體自噬增強(qiáng)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞存活率
        5.3.7 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)介導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬增強(qiáng)OGD/R后神經(jīng)元的存活率
        5.3.8 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)介導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬減少OGD/R后神經(jīng)元的凋亡
    5.4 討論
        5.4.1 C_x43通過(guò)PINK1途經(jīng)調(diào)控OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體自噬
        5.4.2 C_x43通過(guò)調(diào)控PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬保護(hù)OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞線粒體功能
        5.4.3 C_x43通過(guò)調(diào)控PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬改善OGD/R后神經(jīng)元存活
    5.5 結(jié)論
第6章 結(jié)論
第7章 主要?jiǎng)?chuàng)新點(diǎn)與展望
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3876270