研究背景:肺癌(lung cancer,LC)是世界范圍內(nèi)導致癌癥相關(guān)死亡率的最主要原因^[1,2]。依據(jù)組織學特征來分類,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LAC)是LC中最常見的類型。盡管有20%的早期LAC患者可以接受手術(shù),但高達46%的病例在五年內(nèi)會出現(xiàn)復發(fā)和轉(zhuǎn)移,這也是LAC進程過程中的關(guān)鍵限速步驟^[3]。相比此前的觀點認為腫瘤的復發(fā)和播散只發(fā)生在晚期病人身上,越來越多的證據(jù)表明在臨床癥狀明顯之前即可發(fā)生遠隔器官的轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)在同一癌癥組織的不同區(qū)域,基因表達標記也不完全相同,說明癌癥本身的異質(zhì)性是導致這一現(xiàn)象的一個主要原因。生存壓力,比如外科手術(shù)和缺氧等可以促發(fā)部分腫瘤細胞獲得干細胞樣免疫表型。針對于癌癥干細胞(cancer stem cell,CSC)的精確身份仍有許多爭論,主要是因為缺乏一個統(tǒng)一的標記物,并且癌癥細胞的免疫表型會隨著腫瘤的進程而發(fā)生改變�；谏飳W行為的多種標記物或分類方法被提出來用于鑒定CSC。側(cè)群細胞(side population,SP)具有排出Hoechst 33342的能力,被認為是一種...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
前言
第1章 P63在肺腺癌中的表達及其與預后的關(guān)系
    1 前言
    2 材料
        2.1 標本的收集
        2.2 主要試劑
        2.3 自配試劑
        2.4 主要儀器設備
    3 實驗方法
        3.1 肺組織標本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學染色
        3.6 免疫組織化學評分
        3.7 細胞計數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動物基因型鑒定
        3.10 統(tǒng)計分析
    4 結(jié)果
        4.1 P63 在肺腺癌病灶中的表達情況
        4.2 P63 表達與肺腺癌患者生存期及臨床相關(guān)性分析
    5 結(jié)論
    6 討論
第2章 PMN-MDSCs與 p63⁺肺腺癌細胞的關(guān)系
    1 前言
    2 材料
        2.1 臨床病例
        2.2 實驗動物
        2.3 主要試劑
        2.4 自配試劑
        2.5 主要儀器設備
    3 實驗方法
        3.1 肺腺癌組織標本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學染色
        3.6 免疫組織化學評分
        3.7 細胞計數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動物基因型鑒定
        3.10 流式細胞術(shù)
        3.11 統(tǒng)計分析
    4 結(jié)果
        4.1 PMN-MDSCs在 p63⁺肺腺癌組織內(nèi)浸潤和擴展
        4.2 Hdc⁺PMN-MDSCs在 p63⁺LAC動物內(nèi)聚集和擴增
    5 結(jié)論
    6 討論
第3章 MDSCs促進肺腺癌細胞Wnt/β-catenin信號通路異常激活的機制
    1 前言
    2 材料
        2.1 臨床標本
        2.2 轉(zhuǎn)基因動物
        2.3 主要試劑
        2.4 自配試劑
        2.5 主要儀器設備
    3 實驗方法
        3.1 肺腺癌組織標本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學染色
        3.6 免疫組織化學評分
        3.7 細胞計數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動物基因型鑒定
        3.10 流式細胞術(shù)
        3.11 RT-PCR
        3.12 統(tǒng)計分析
    4 結(jié)果
        4.1 P63⁺肺腺癌細胞異常表達β-catenin
        4.2 P63⁺癌組織內(nèi)Hdc+PMN-MDSCs高表達多種Wnts
    5 結(jié)論
    6 討論
第4章 阻斷Hdc⁺PMN-MDSCs來源Wnts對 LAC表達p63 的影響
    1 前言
    2 材料
        2.1 轉(zhuǎn)基因動物
        2.2 主要試劑
        2.3 自配試劑
        2.4 主要儀器設備
    3 實驗方法
        3.1 肺腺癌組織標本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學染色
        3.6 免疫組織化學評分
        3.7 細胞計數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動物基因型鑒定
        3.10 流式細胞術(shù)
        3.11 統(tǒng)計分析
    4 結(jié)果
        4.1 抑制Hdc⁺PMN-MDSCs或其來源Wnts阻礙LAC發(fā)生
        4.2 Hdc⁺PMN-MDSCs來源的Wnts促進p63 的表達
    5 結(jié)論
    6 討論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3815367