研究背景:肺癌(lung cancer,LC)是世界范圍內(nèi)導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡率的最主要原因^[1,2]。依據(jù)組織學(xué)特征來分類,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LAC)是LC中最常見的類型。盡管有20%的早期LAC患者可以接受手術(shù),但高達(dá)46%的病例在五年內(nèi)會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,這也是LAC進(jìn)程過程中的關(guān)鍵限速步驟^[3]。相比此前的觀點(diǎn)認(rèn)為腫瘤的復(fù)發(fā)和播散只發(fā)生在晚期病人身上,越來越多的證據(jù)表明在臨床癥狀明顯之前即可發(fā)生遠(yuǎn)隔器官的轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)在同一癌癥組織的不同區(qū)域,基因表達(dá)標(biāo)記也不完全相同,說明癌癥本身的異質(zhì)性是導(dǎo)致這一現(xiàn)象的一個(gè)主要原因。生存壓力,比如外科手術(shù)和缺氧等可以促發(fā)部分腫瘤細(xì)胞獲得干細(xì)胞樣免疫表型。針對于癌癥干細(xì)胞(cancer stem cell,CSC)的精確身份仍有許多爭論,主要是因?yàn)槿狈σ粋�(gè)統(tǒng)一的標(biāo)記物,并且癌癥細(xì)胞的免疫表型會(huì)隨著腫瘤的進(jìn)程而發(fā)生改變�；谏飳W(xué)行為的多種標(biāo)記物或分類方法被提出來用于鑒定CSC。側(cè)群細(xì)胞(side population,SP)具有排出Hoechst 33342的能力,被認(rèn)為是一種...

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
前言
第1章 P63在肺腺癌中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系
    1 前言
    2 材料
        2.1 標(biāo)本的收集
        2.2 主要試劑
        2.3 自配試劑
        2.4 主要儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 肺組織標(biāo)本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學(xué)染色
        3.6 免疫組織化學(xué)評分
        3.7 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因型鑒定
        3.10 統(tǒng)計(jì)分析
    4 結(jié)果
        4.1 P63 在肺腺癌病灶中的表達(dá)情況
        4.2 P63 表達(dá)與肺腺癌患者生存期及臨床相關(guān)性分析
    5 結(jié)論
    6 討論
第2章 PMN-MDSCs與 p63⁺肺腺癌細(xì)胞的關(guān)系
    1 前言
    2 材料
        2.1 臨床病例
        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.3 主要試劑
        2.4 自配試劑
        2.5 主要儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 肺腺癌組織標(biāo)本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學(xué)染色
        3.6 免疫組織化學(xué)評分
        3.7 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因型鑒定
        3.10 流式細(xì)胞術(shù)
        3.11 統(tǒng)計(jì)分析
    4 結(jié)果
        4.1 PMN-MDSCs在 p63⁺肺腺癌組織內(nèi)浸潤和擴(kuò)展
        4.2 Hdc⁺PMN-MDSCs在 p63⁺LAC動(dòng)物內(nèi)聚集和擴(kuò)增
    5 結(jié)論
    6 討論
第3章 MDSCs促進(jìn)肺腺癌細(xì)胞Wnt/β-catenin信號(hào)通路異常激活的機(jī)制
    1 前言
    2 材料
        2.1 臨床標(biāo)本
        2.2 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物
        2.3 主要試劑
        2.4 自配試劑
        2.5 主要儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 肺腺癌組織標(biāo)本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學(xué)染色
        3.6 免疫組織化學(xué)評分
        3.7 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因型鑒定
        3.10 流式細(xì)胞術(shù)
        3.11 RT-PCR
        3.12 統(tǒng)計(jì)分析
    4 結(jié)果
        4.1 P63⁺肺腺癌細(xì)胞異常表達(dá)β-catenin
        4.2 P63⁺癌組織內(nèi)Hdc+PMN-MDSCs高表達(dá)多種Wnts
    5 結(jié)論
    6 討論
第4章 阻斷Hdc⁺PMN-MDSCs來源Wnts對 LAC表達(dá)p63 的影響
    1 前言
    2 材料
        2.1 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物
        2.2 主要試劑
        2.3 自配試劑
        2.4 主要儀器設(shè)備
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 肺腺癌組織標(biāo)本的處理
        3.2 臨床數(shù)據(jù)收集
        3.3 組織芯片的制作
        3.4 蘇木素伊紅染色
        3.5 免疫組織化學(xué)染色
        3.6 免疫組織化學(xué)評分
        3.7 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        3.8 生存分析
        3.9 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因型鑒定
        3.10 流式細(xì)胞術(shù)
        3.11 統(tǒng)計(jì)分析
    4 結(jié)果
        4.1 抑制Hdc⁺PMN-MDSCs或其來源Wnts阻礙LAC發(fā)生
        4.2 Hdc⁺PMN-MDSCs來源的Wnts促進(jìn)p63 的表達(dá)
    5 結(jié)論
    6 討論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3815367