系統(tǒng)生物學(xué)是研究生物系統(tǒng)中所有組成成分(基因、mRNA、蛋白質(zhì)等)的構(gòu)成,以及在特定條件這些組分間的相互關(guān)系的學(xué)科。本課題是研究某一基因改變后其上游、下游分子在生物系統(tǒng)內(nèi)的改變,研究整體的變化情況。肺癌是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重影響人們健康的惡性腫瘤之一,最新的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明,肺癌死亡率已居惡性腫瘤中首位,而肺癌的發(fā)病率和死亡率仍呈上升趨勢(shì)。其中非小細(xì)胞肺癌(non-small-celllungcancer,NSCLC)約占肺癌的85%。近年來(lái),隨著包括手術(shù)切除、化療、放療及生物治療等手段的綜合應(yīng)用,NSCLC患者的生活質(zhì)量和生存期均有明顯的改善,但患者的5年生存率仍然不高,其原因與NSCLC的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),約40%的I期和60%的II期NSCLC死亡患者均具有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。因此,研究NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,闡明其作用機(jī)理,不僅有助于深入了解NSCLC在疾病演進(jìn)中的分子變化,而且還有助于提高患者的生存期。惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移是一個(gè)涉及多個(gè)水平(如基因、蛋白等)、多個(gè)分子的共同作用的結(jié)果。隨著基因組測(cè)序的完成,近年來(lái)非編碼基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用受到密切的關(guān)注。MicroRNAs(miRNAs)是一類...

【文章頁(yè)數(shù)】：119 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
ABSTRACT
序言
1 引言
    1.1 系統(tǒng)理論與系統(tǒng)生物學(xué)
    1.2 肺癌研究進(jìn)展
    1.3 miRNA概述
    1.4 miRNA在癌癥中的作用
    1.5 CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)
        1.5.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)簡(jiǎn)介
        1.5.2 CRISPR/Cas9系統(tǒng)工作原理
        1.5.3 CRISPR/Cas9系統(tǒng)研究歷程
        1.5.4 CRISPR/Cas9技術(shù)優(yōu)缺點(diǎn)
        1.5.5 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應(yīng)用與展望
    1.6 論文研究方案
    1.7 論文創(chuàng)新點(diǎn)
2 miR-362在NSCLC組織與細(xì)胞中的表達(dá)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.1 細(xì)胞株
        2.1.2 主要試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 miR-362在NSCLC組織和細(xì)胞中上調(diào)表達(dá)
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
3 miR-362在NSCLC中的功能研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.1 細(xì)胞株
        3.1.2 主要試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建miR-362敲除細(xì)胞系
        3.3.2 miR-362促進(jìn)NSCLC細(xì)胞轉(zhuǎn)移
        3.3.3 miR-362促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的克隆形成能力
        3.3.4 miR-362對(duì)NSCLC細(xì)胞周期無(wú)影響
        3.3.5 miR-362對(duì)NSCLC細(xì)胞凋亡率的影響
        3.3.6 miR-362對(duì)NSCLC細(xì)胞抑制率的影響
        3.3.7 miR-362提高肺癌細(xì)胞系在小鼠體內(nèi)的成瘤能力
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 miR-362靶基因的鑒定
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)試劑
        4.1.1 細(xì)胞株
        4.1.2 細(xì)菌菌株
        4.1.3 質(zhì)粒載體
        4.1.4 主要試劑
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 miR-362靶基因的預(yù)測(cè)
        4.3.2 miR-362靶基因的鑒定
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
5 SEMA3A在NSCLC中的功能及與miR-362的相關(guān)性
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)試劑
        5.1.1 細(xì)胞株
        5.1.2 質(zhì)粒載體
        5.1.3 主要試劑
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 SEMA3A抑制NSCLC細(xì)胞的轉(zhuǎn)移
        5.3.2 SEMA3A抑制NSCLC細(xì)胞的克隆形成
        5.3.3 miR-362與靶基因SEMA3A相關(guān)性分析
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
6 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄A
附錄B
附錄C
作者簡(jiǎn)歷及攻讀博士學(xué)位期間取得的研究成果
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集



本文編號(hào)：3794151