2015年世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,172個(gè)國(guó)家的70歲以下人群中惡性腫瘤為第一或第二大死因的國(guó)家有91個(gè),第三或第四大死因的國(guó)家有22個(gè)。而中國(guó)惡性腫瘤的發(fā)生率和死亡率均逐年升高,并已超過(guò)心腦血管疾病成為我國(guó)居民的第一大死因。因此,揭示惡性腫瘤發(fā)病分子機(jī)制將為有效治療腫瘤提供關(guān)鍵的靶點(diǎn),是提高人民健康水平的重中之重。表觀遺傳調(diào)控是指在不改變基因序列的前提下,影響基因表達(dá)的現(xiàn)象,具有可遺傳性和可逆性。該機(jī)制廣泛參與調(diào)控腫瘤的多種惡性表型,并與其發(fā)生、發(fā)展和耐藥密切相關(guān),因此備受關(guān)注。揭示表觀遺傳調(diào)控機(jī)制有望為腫瘤患者的早期檢測(cè)、疾病監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷提供潛在的分子標(biāo)志物。ASPP2(p53凋亡刺激蛋白2)屬于ASPP家族成員,具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞遷移和生長(zhǎng)等抑癌基因活性。研究表明,ASPP2在乳腺癌,肝癌等多種惡性腫瘤中表達(dá)下調(diào),其下調(diào)水平與腫瘤的分期和不良預(yù)后相關(guān),提示該基因可能為腫瘤治療的重要靶點(diǎn)。腎癌和宮頸癌分別為泌尿系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)重要腫瘤類(lèi)型,晚期患者因缺乏有效治療策略而預(yù)后極差。但目前,ASPP2在腎癌和宮頸癌中的表達(dá)情況,調(diào)控和作用機(jī)制均未見(jiàn)報(bào)道。因此,本文將對(duì)此進(jìn)行...

【文章頁(yè)數(shù)】：139 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 課題背景
    1.2 腫瘤的特征性改變
        1.2.1 腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性及調(diào)控
        1.2.2 腫瘤細(xì)胞死亡耐受的特性及調(diào)控
        1.2.3 腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移特性及調(diào)控
        1.2.4 腫瘤微環(huán)境
    1.3 腫瘤中表觀遺傳研究進(jìn)展
        1.3.1 表觀遺傳研究概況
        1.3.2 表觀遺傳調(diào)控與腫瘤
        1.3.3 表觀遺傳調(diào)控分子機(jī)制
    1.4 ASPP2研究進(jìn)展
        1.4.1 ASPP2的發(fā)現(xiàn)
        1.4.2 ASPP2的生物學(xué)功能
        1.4.3 ASPP2與腫瘤
        1.4.4 ASPP2的表達(dá)調(diào)控機(jī)制
    1.5 課題研究的目的和意義
    1.6 主要研究?jī)?nèi)容
    1.7 技術(shù)路線
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 主要分析軟件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞總RNA提取
        2.2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.2.4 組織蛋白提取
        2.2.5 細(xì)胞總蛋白提取
        2.2.6 RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        2.2.7 MTT細(xì)胞活力檢測(cè)
        2.2.8 細(xì)胞遷移
        2.2.9 細(xì)胞侵襲
        2.2.10 細(xì)胞劃痕
        2.2.11 細(xì)胞免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.12 Real-time PCR
        2.2.13 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot)
        2.2.14 RNAi細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.15 慢病毒包裝
        2.2.16 免疫組化
        2.2.17 生物信息學(xué)網(wǎng)站數(shù)據(jù)分析
        2.2.18 染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation Assay,CHIP)
        2.2.19 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
        2.2.20 質(zhì)�？寺�
        2.2.21 質(zhì)粒的提取
        2.2.22 裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)
        2.2.23 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第3章 ASPP2在腫瘤中表達(dá)特征研究
    3.1 引言
    3.2 ASPP2在腎癌中表達(dá)下調(diào)
        3.2.1 ASPP2在腎癌細(xì)胞系中表達(dá)下調(diào)
        3.2.2 ASPP2在腎癌組織中表達(dá)下調(diào)
        3.2.3 ASPP2表達(dá)下調(diào)與腎癌病理分期及預(yù)后相關(guān)
    3.3 ASPP2在宮頸癌中表達(dá)下調(diào)
        3.3.1 ASPP2在宮頸癌組織中表達(dá)下調(diào)
        3.3.2 ASPP2表達(dá)下調(diào)與宮頸癌預(yù)后相關(guān)
    3.4 本章小結(jié)
第4章 腫瘤中ASPP2表觀調(diào)控分子機(jī)制研究
    4.1 引言
    4.2 ASPP2在腎癌中降低不依賴啟動(dòng)子甲基化
    4.3 HDAC1介導(dǎo)的組蛋白去乙�；种艫SPP2的表達(dá)
    4.4 HDAC1下調(diào)促進(jìn)E2F1與ASPP2啟動(dòng)子結(jié)合
    4.5 MICRORNA(MIR-205)抑制ASPP2的表達(dá)
    4.6 本章小結(jié)
第5章 腫瘤中ASPP2生物學(xué)效應(yīng)的研究
    5.1 引言
    5.2 體外細(xì)胞模型驗(yàn)證ASPP2促進(jìn)細(xì)胞凋亡
    5.3 體外細(xì)胞模型驗(yàn)證ASPP2抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和遷移
    5.4 體內(nèi)動(dòng)物模型驗(yàn)證ASPP2促進(jìn)凋亡抑制生長(zhǎng)和遷移
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其它成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3793652