基于RAS/RAF/ERK信號通路探討艾灸促進壓瘡組織血管新生的分子調(diào)控機制研究
發(fā)布時間:2023-02-28 07:52
目的:明確艾灸促進壓瘡組織創(chuàng)面愈合的作用;闡明艾灸促進壓瘡組織血管新生的分子調(diào)控機制,為臨床艾灸治療壓瘡,乃至皮膚潰瘍提供理論和實驗依據(jù)。方法:采用自制壓瘡造模裝置通過缺血-再灌注損傷方式建立2~3期壓瘡動物模型,將造模成功的70只SD雌性壓瘡缺血-再灌注損傷模型實驗大鼠采用隨機數(shù)字表法隨機分為模型組和艾灸組,每組35只。每組根據(jù)干預時間的長短再分為1d、3d、5d、7d、10d五個亞組,每個亞組分別納入7只實驗大鼠。將35只正常健康大鼠不予造模處理,在模擬其他兩組大鼠造模部位處給予碘伏處理,采用隨機數(shù)字表法隨機分為1d、3d、5d、7d、10d五個亞組,每個亞組納入7只大鼠。模型組在模型制備成功后只給予碘伏常規(guī)處理,捆綁方式同其他兩組。艾灸組在模型制備成功后,先給予碘伏常規(guī)處理,而后施以艾灸干預,采用直接艾灸壓瘡局部,以壓瘡創(chuàng)面為中心,1cm長度為半徑,進行回旋灸操作,其中艾條燃燒端距壓瘡創(chuàng)面3cm左右。每日艾灸治療1次,每次持續(xù)15min。通過非接觸式電子溫度儀及時調(diào)整艾條燃燒端與壓瘡創(chuàng)面的距離,使溫度計的顯示數(shù)值控制在(40℃~42℃)的適宜范圍內(nèi),每0.5min測量一次創(chuàng)面的皮...
【文章頁數(shù)】:196 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻綜述
第一部分 祖國醫(yī)學對壓瘡的研究
1. 壓瘡的概述
2. 壓瘡的病因病機
3. 壓瘡的辨證分型
4. 壓瘡的治則治法
4.1 內(nèi)治法
4.2 外治法
第二部分 現(xiàn)代醫(yī)學對壓瘡的研究
1. 壓瘡的概念
2. 壓瘡的分期
3. 壓瘡的發(fā)病因素
3.1 外源性因素
3.2 內(nèi)源性因素
3.3 加劇性因素
4. 壓瘡的防治
4.1 壓瘡的預防
4.2 壓瘡的治療
實驗研究
第一部分 觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面愈合率以及創(chuàng)面局部平均血流灌注量的影響
一、觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面愈合率的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
二、觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面局部平均血流灌注量的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
第二部分 基于RAS/RAF/ERK信號通路探討艾灸促進壓瘡組織血管新生的分子調(diào)控機制研究
一、觀察艾灸對實驗大鼠壓瘡創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學改變的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 實驗結(jié)果
4. 實驗小結(jié)
二、觀察艾灸對實驗大鼠壓瘡創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 電鏡結(jié)果
4. 實驗小結(jié)
三、免疫熒光雙標染色法觀察艾灸對壓瘡組織血管新生的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
四、免疫組織化學法檢測各組大鼠在不同時間點創(chuàng)面組織中VEGF、RAS以及P-ERK1/2蛋白表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
五、實時熒光定量PCR法檢測各組大鼠創(chuàng)面組織中VEGF mRNA、VEGFR2 mRNA、RAS mRNA、RAF-1 mRNA以及ERK mRNA表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
六、Western Blot法檢測各組大鼠創(chuàng)面組織中VEGF、VEGFR2、RAS、P-RAF-1以及P-ERK1/2蛋白表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
討論
1. 立題依據(jù)
2. 壓瘡模型實驗動物種屬及性別的選擇
2.1 種屬的選擇
2.2 性別的選擇
3. 大鼠壓瘡缺血-再灌注損傷模型制備過程及應用的相關(guān)注意事項
4. 壓瘡缺血-再灌注損傷模型的重要性
5. 對影響艾灸治療壓瘡療效發(fā)揮相關(guān)因素的分析
5.1 選擇優(yōu)質(zhì)的艾條
5.2 確定施灸操作種類
5.3 有煙艾灸發(fā)揮療效的作用機理
6. 規(guī)范艾灸干預的操作過程,量化影響艾灸療效的相關(guān)因素
7. 對皮膚損傷后創(chuàng)面修復過程的分析
8. 實驗結(jié)果的討論分析
8.1 對創(chuàng)面愈合率與創(chuàng)面局部平均血流灌注量的分析
8.2 對光學顯微鏡與透射電鏡觀察壓瘡創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學變化及超微結(jié)構(gòu)的分析
8.3 從蛋白層面對RAS/RAF/ERK信號通路中關(guān)鍵靶蛋白的分析
8.4 從基因?qū)用鎸AS/RAF/ERK信號通路中關(guān)鍵靶基因的分析
8.5 對免疫熒光雙標染色技術(shù)觀測壓瘡創(chuàng)面修復中新生血管形成的分析
9. 不足與展望
9.1 嚴格把控艾灸干預溫度
9.2 多角度探究艾灸促進壓瘡組織血管新生的機制
9.3 完善面積的測定手段
9.4 完善新生血管的定量分析手段
結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
個人簡歷
本文編號:3751547
【文章頁數(shù)】:196 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻綜述
第一部分 祖國醫(yī)學對壓瘡的研究
1. 壓瘡的概述
2. 壓瘡的病因病機
3. 壓瘡的辨證分型
4. 壓瘡的治則治法
4.1 內(nèi)治法
4.2 外治法
第二部分 現(xiàn)代醫(yī)學對壓瘡的研究
1. 壓瘡的概念
2. 壓瘡的分期
3. 壓瘡的發(fā)病因素
3.1 外源性因素
3.2 內(nèi)源性因素
3.3 加劇性因素
4. 壓瘡的防治
4.1 壓瘡的預防
4.2 壓瘡的治療
實驗研究
第一部分 觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面愈合率以及創(chuàng)面局部平均血流灌注量的影響
一、觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面愈合率的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
二、觀察艾灸對壓瘡大鼠損傷修復中創(chuàng)面局部平均血流灌注量的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
第二部分 基于RAS/RAF/ERK信號通路探討艾灸促進壓瘡組織血管新生的分子調(diào)控機制研究
一、觀察艾灸對實驗大鼠壓瘡創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學改變的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 實驗結(jié)果
4. 實驗小結(jié)
二、觀察艾灸對實驗大鼠壓瘡創(chuàng)面組織的超微結(jié)構(gòu)的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 電鏡結(jié)果
4. 實驗小結(jié)
三、免疫熒光雙標染色法觀察艾灸對壓瘡組織血管新生的影響
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
四、免疫組織化學法檢測各組大鼠在不同時間點創(chuàng)面組織中VEGF、RAS以及P-ERK1/2蛋白表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
五、實時熒光定量PCR法檢測各組大鼠創(chuàng)面組織中VEGF mRNA、VEGFR2 mRNA、RAS mRNA、RAF-1 mRNA以及ERK mRNA表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
六、Western Blot法檢測各組大鼠創(chuàng)面組織中VEGF、VEGFR2、RAS、P-RAF-1以及P-ERK1/2蛋白表達的變化
1. 實驗材料
2. 實驗方法
3. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理
4. 實驗結(jié)果
5. 實驗小結(jié)
討論
1. 立題依據(jù)
2. 壓瘡模型實驗動物種屬及性別的選擇
2.1 種屬的選擇
2.2 性別的選擇
3. 大鼠壓瘡缺血-再灌注損傷模型制備過程及應用的相關(guān)注意事項
4. 壓瘡缺血-再灌注損傷模型的重要性
5. 對影響艾灸治療壓瘡療效發(fā)揮相關(guān)因素的分析
5.1 選擇優(yōu)質(zhì)的艾條
5.2 確定施灸操作種類
5.3 有煙艾灸發(fā)揮療效的作用機理
6. 規(guī)范艾灸干預的操作過程,量化影響艾灸療效的相關(guān)因素
7. 對皮膚損傷后創(chuàng)面修復過程的分析
8. 實驗結(jié)果的討論分析
8.1 對創(chuàng)面愈合率與創(chuàng)面局部平均血流灌注量的分析
8.2 對光學顯微鏡與透射電鏡觀察壓瘡創(chuàng)面組織的病理形態(tài)學變化及超微結(jié)構(gòu)的分析
8.3 從蛋白層面對RAS/RAF/ERK信號通路中關(guān)鍵靶蛋白的分析
8.4 從基因?qū)用鎸AS/RAF/ERK信號通路中關(guān)鍵靶基因的分析
8.5 對免疫熒光雙標染色技術(shù)觀測壓瘡創(chuàng)面修復中新生血管形成的分析
9. 不足與展望
9.1 嚴格把控艾灸干預溫度
9.2 多角度探究艾灸促進壓瘡組織血管新生的機制
9.3 完善面積的測定手段
9.4 完善新生血管的定量分析手段
結(jié)論
致謝
參考文獻
附錄
個人簡歷
本文編號:3751547
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