銀杏葉提取物EGb761抑制平滑肌細胞泡沫化的機制研究
發(fā)布時間:2023-02-10 16:49
研究背景隨著生活水平的提高,脂肪類食品大量攝入引起機體脂質代謝異常,血脂水平升高,動脈粥樣硬化的發(fā)病率日益增加。動脈粥樣硬化是缺血性心臟病和腦卒中的主要病因,可引起血管管徑狹窄,組織器官血流灌注不足,嚴重威脅人類健康。動脈粥樣硬化的特征性病理改變是泡沫細胞的形成,泡沫細胞來源于定植在血管壁的巨噬細胞和血管平滑肌細胞,泡沫細胞參與了動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的各個時期,因此明確泡沫細胞的形成機制對于防治動脈粥樣硬化具有重要意義。先前的研究多集中于巨噬細胞的泡沫化而關于平滑肌細胞的泡沫化研究較少,本課題著重探討平滑肌細胞泡沫化的防治策略。銀杏葉是一味歷史悠久的中藥,銀杏葉提取物則因其在抗氧化應激、抗炎癥反應方面的功效而廣泛應用于臨床多種心血管疾病的輔助治療。銀杏葉提取物對動脈粥樣硬化的保護作用在臨床和動物實驗中均有報道,然而,其作用機制尚未完全闡明。本課題擬探討銀杏葉提取物對平滑肌細胞泡沫化的影響及其機制。研究目的本課題旨在研究銀杏葉提取物對動脈粥樣硬化過程中平滑肌細胞泡沫化的影響及相關的分子機制,為銀杏葉提取物臨床治療動脈粥樣硬化提供實驗證據(jù)。方法與結果1.銀杏葉提取物濃度依賴性抑制ox-LD...
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
abstract
前言
文獻回顧
一、動脈粥樣硬化嚴重威脅心血管系統(tǒng)功能
二、銀杏葉提取物對心血管系統(tǒng)的保護性作用
1 材料
1.1 實驗動物
1.2 儀器與試劑
2 方法
2.1 大鼠主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)
2.2 原代大鼠主動脈平滑肌細胞傳代及純化
2.3 原代大鼠主動脈平滑肌細胞鑒定
2.4 油紅O染色檢測ox-LDL誘導主動脈平滑肌細胞的泡沫化
2.5 細胞內(nèi)總膽固醇含量檢測
2.6 平滑肌細胞膽固醇攝取能力檢測
2.7 平滑肌細胞膽固醇外排能力檢測
2.8蛋白免疫印跡實驗
2.9 總RNA的提取
2.10 逆轉錄PCR與實時定量PCR(RT-PCR)
2.11 免疫熒光
2.12 細胞核蛋白提取
2.13 細胞轉染
2.14 小鼠動脈粥樣硬化斑塊檢測
2.15 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
3 結果
3.1 平滑肌細胞原代分離結果及鑒定
3.2 銀杏葉提取物濃度依賴性抑制ox-LDL誘導的平滑肌細胞泡沫化
3.3 銀杏葉提取物抑制平滑肌細胞膽固醇的攝取促進膽固醇的外排
3.4 銀杏葉提取物對平滑肌細胞膽固醇自身合成的影響
3.5 銀杏葉提取物對平滑肌細胞攝取膽固醇途徑的影響
3.6 銀杏葉提取物對平滑肌細胞外排膽固醇途徑的影響
3.7 銀杏葉提取物調控平滑肌細胞ABCA1 表達的分子機制
3.8 PAQR3 介導銀杏葉提取物上調平滑肌細胞表達ABCA1
3.9 PAQR3 介導銀杏葉提取物上調平滑肌細胞膽固醇外排及抑制泡沫化
3.10 銀杏葉提取物減輕高脂飲食誘導的ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化
4 討論
4.1 銀杏葉提取物抑制平滑肌細胞泡沫化
4.2 銀杏葉提取物調控平滑肌細胞膽固醇代謝的分子機制
小結
參考文獻
個人簡歷和研究成果
致謝
本文編號:3739542
【文章頁數(shù)】:99 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
abstract
前言
文獻回顧
一、動脈粥樣硬化嚴重威脅心血管系統(tǒng)功能
二、銀杏葉提取物對心血管系統(tǒng)的保護性作用
1 材料
1.1 實驗動物
1.2 儀器與試劑
2 方法
2.1 大鼠主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)
2.2 原代大鼠主動脈平滑肌細胞傳代及純化
2.3 原代大鼠主動脈平滑肌細胞鑒定
2.4 油紅O染色檢測ox-LDL誘導主動脈平滑肌細胞的泡沫化
2.5 細胞內(nèi)總膽固醇含量檢測
2.6 平滑肌細胞膽固醇攝取能力檢測
2.7 平滑肌細胞膽固醇外排能力檢測
2.8蛋白免疫印跡實驗
2.9 總RNA的提取
2.10 逆轉錄PCR與實時定量PCR(RT-PCR)
2.11 免疫熒光
2.12 細胞核蛋白提取
2.13 細胞轉染
2.14 小鼠動脈粥樣硬化斑塊檢測
2.15 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
3 結果
3.1 平滑肌細胞原代分離結果及鑒定
3.2 銀杏葉提取物濃度依賴性抑制ox-LDL誘導的平滑肌細胞泡沫化
3.3 銀杏葉提取物抑制平滑肌細胞膽固醇的攝取促進膽固醇的外排
3.4 銀杏葉提取物對平滑肌細胞膽固醇自身合成的影響
3.5 銀杏葉提取物對平滑肌細胞攝取膽固醇途徑的影響
3.6 銀杏葉提取物對平滑肌細胞外排膽固醇途徑的影響
3.7 銀杏葉提取物調控平滑肌細胞ABCA1 表達的分子機制
3.8 PAQR3 介導銀杏葉提取物上調平滑肌細胞表達ABCA1
3.9 PAQR3 介導銀杏葉提取物上調平滑肌細胞膽固醇外排及抑制泡沫化
3.10 銀杏葉提取物減輕高脂飲食誘導的ApoE-/-小鼠動脈粥樣硬化
4 討論
4.1 銀杏葉提取物抑制平滑肌細胞泡沫化
4.2 銀杏葉提取物調控平滑肌細胞膽固醇代謝的分子機制
小結
參考文獻
個人簡歷和研究成果
致謝
本文編號:3739542
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