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量子點(diǎn)熒光編碼微球用于核酸多元分析研究

發(fā)布時間:2023-02-08 10:51
  量子點(diǎn)(QDs)作為一種新型熒光納米材料,具有眾多獨(dú)特的光學(xué)特性,如高熒光量子產(chǎn)率、寬譜帶吸收、窄譜帶發(fā)射、發(fā)射峰連續(xù)可調(diào),以及優(yōu)良的抗光漂白性等。熒光編碼微球(microbead)懸浮陣列具有更快的反應(yīng)動力學(xué)、重復(fù)性好、制備成本低等優(yōu)點(diǎn),提供了高通量分析檢測平臺,在生物分析和疾病診斷等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。以量子點(diǎn)作為熒光團(tuán)制備的熒光編碼微球(Qbead)具有亮度高、編碼容量大的突出優(yōu)勢,適用于生物分子(核酸、蛋白質(zhì))的多元分析。目前,簡單利用核酸雜交/分子識別的熒光編碼微球分析,檢測靈敏度還無法滿足臨床分析要求。基于PCR和等溫擴(kuò)增(isothermal amplification)的信號放大技術(shù)為提高生物分子檢測靈敏度提供了有效途徑。各種等溫擴(kuò)增反應(yīng)如鏈?zhǔn)饺〈磻?yīng)(strand displacement amplification,SDA)、滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)(rolling circle amplification,RCA)等具有簡單、快速、高效、反應(yīng)條件溫和等優(yōu)點(diǎn),成為近年來的研究熱點(diǎn)。本論文以核酸(G4-DNA、miRNA)檢測為研究目標(biāo),構(gòu)建了穩(wěn)定的“核-殼”結(jié)構(gòu)的量子點(diǎn)熒光編碼微...

【文章頁數(shù)】:104 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 論文研究背景
    1.2 量子點(diǎn)概述
        1.2.1 量子點(diǎn)的基本概念
        1.2.2 量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)
    1.3 量子點(diǎn)在生物醫(yī)學(xué)工程中的應(yīng)用
        1.3.1 量子點(diǎn)用于生物傳感
        1.3.2 量子點(diǎn)用于芯片分析
        1.3.3 量子點(diǎn)用于細(xì)胞和體內(nèi)成像
    1.4 核酸擴(kuò)增
        1.4.1 PCR
        1.4.2 等溫擴(kuò)增
    1.5 多元分析平臺
        1.5.1 有機(jī)染料編碼微球
        1.5.2 量子點(diǎn)編碼微球
        1.5.3 量子點(diǎn)編碼微球解碼
        1.5.4 量子點(diǎn)編碼微球用于多元分析
    1.6 核酸一體化檢測
    1.7 論文內(nèi)容和研究意義
    1.8 論文結(jié)構(gòu)介紹
    參考文獻(xiàn)
第二章 量子點(diǎn)熒光編碼微球的可控制備
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 二氧化硅包覆的量子點(diǎn)混合摻雜聚合物微球(QbeadⅠ)的制備和形貌表征
        2.3.2 QbeadⅠ熒光編碼穩(wěn)定性
        2.3.3 量子點(diǎn)分層摻雜二氧化硅微球(QbeadⅡ)的制備和形貌表征
        2.3.4 QbeadⅡ熒光編碼穩(wěn)定性
        2.3.5 Qbead表面改性
        2.3.6 Qbead偶聯(lián)核酸
    2.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 量子點(diǎn)熒光編碼微球—滾環(huán)擴(kuò)增用于人骨髓增殖性腫瘤基因組G4-DNA分析
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 靶標(biāo)雜交觸發(fā)環(huán)化反應(yīng)
        3.3.2 primer延伸的滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)
        3.3.3 高效的的滾環(huán)擴(kuò)增反應(yīng)
        3.3.4 ZnPc特異性標(biāo)記
        3.3.5 Qbead-RCA一體化分析靈敏度評估
        3.3.6 Qbead-RCA一體化分析特異性評估
        3.3.7 Qbead-RCA一體化多元分析適用性
        3.3.8 MPN基因組G4-DNA多元分析
        3.3.9 化學(xué)發(fā)光條件優(yōu)化
        3.3.10 MPN基因組G4-DNA化學(xué)發(fā)光檢測
    3.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 量子點(diǎn)熒光編碼微球—鏈?zhǔn)饺〈磻?yīng)用于 HepG2 細(xì)胞裂解液中 mi RNA 熒光成像分析
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 靶標(biāo)雜交觸發(fā)探針構(gòu)象變化
        4.3.2 NASDA指數(shù)擴(kuò)增
        4.3.3 Ru-DI特異性標(biāo)記
        4.3.4 Qbead-NASDA條件優(yōu)化
        4.3.5 Qbead-NASDA一體化分析靈敏度評估
        4.3.6 Qbead-NASDA一體化分析特異性評估
        4.3.7 Qbead-NASDA一體化分析多元性能評估
        4.3.8 HepG2 細(xì)胞裂解物中miRNA多元檢測
    4.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 主要創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
博士期間研究成果
致謝



本文編號:3737874

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