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量子點熒光編碼微球用于核酸多元分析研究

發(fā)布時間:2023-02-08 10:51
  量子點(QDs)作為一種新型熒光納米材料,具有眾多獨特的光學特性,如高熒光量子產(chǎn)率、寬譜帶吸收、窄譜帶發(fā)射、發(fā)射峰連續(xù)可調(diào),以及優(yōu)良的抗光漂白性等。熒光編碼微球(microbead)懸浮陣列具有更快的反應動力學、重復性好、制備成本低等優(yōu)點,提供了高通量分析檢測平臺,在生物分析和疾病診斷等領域具有廣泛應用。以量子點作為熒光團制備的熒光編碼微球(Qbead)具有亮度高、編碼容量大的突出優(yōu)勢,適用于生物分子(核酸、蛋白質(zhì))的多元分析。目前,簡單利用核酸雜交/分子識別的熒光編碼微球分析,檢測靈敏度還無法滿足臨床分析要求;赑CR和等溫擴增(isothermal amplification)的信號放大技術為提高生物分子檢測靈敏度提供了有效途徑。各種等溫擴增反應如鏈式取代反應(strand displacement amplification,SDA)、滾環(huán)擴增反應(rolling circle amplification,RCA)等具有簡單、快速、高效、反應條件溫和等優(yōu)點,成為近年來的研究熱點。本論文以核酸(G4-DNA、miRNA)檢測為研究目標,構建了穩(wěn)定的“核-殼”結構的量子點熒光編碼微...

【文章頁數(shù)】:104 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 論文研究背景
    1.2 量子點概述
        1.2.1 量子點的基本概念
        1.2.2 量子點的光學性質(zhì)
    1.3 量子點在生物醫(yī)學工程中的應用
        1.3.1 量子點用于生物傳感
        1.3.2 量子點用于芯片分析
        1.3.3 量子點用于細胞和體內(nèi)成像
    1.4 核酸擴增
        1.4.1 PCR
        1.4.2 等溫擴增
    1.5 多元分析平臺
        1.5.1 有機染料編碼微球
        1.5.2 量子點編碼微球
        1.5.3 量子點編碼微球解碼
        1.5.4 量子點編碼微球用于多元分析
    1.6 核酸一體化檢測
    1.7 論文內(nèi)容和研究意義
    1.8 論文結構介紹
    參考文獻
第二章 量子點熒光編碼微球的可控制備
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗材料與儀器
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結果與討論
        2.3.1 二氧化硅包覆的量子點混合摻雜聚合物微球(QbeadⅠ)的制備和形貌表征
        2.3.2 QbeadⅠ熒光編碼穩(wěn)定性
        2.3.3 量子點分層摻雜二氧化硅微球(QbeadⅡ)的制備和形貌表征
        2.3.4 QbeadⅡ熒光編碼穩(wěn)定性
        2.3.5 Qbead表面改性
        2.3.6 Qbead偶聯(lián)核酸
    2.4 本章小結
    參考文獻
第三章 量子點熒光編碼微球—滾環(huán)擴增用于人骨髓增殖性腫瘤基因組G4-DNA分析
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗材料與儀器
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結果與討論
        3.3.1 靶標雜交觸發(fā)環(huán)化反應
        3.3.2 primer延伸的滾環(huán)擴增反應
        3.3.3 高效的的滾環(huán)擴增反應
        3.3.4 ZnPc特異性標記
        3.3.5 Qbead-RCA一體化分析靈敏度評估
        3.3.6 Qbead-RCA一體化分析特異性評估
        3.3.7 Qbead-RCA一體化多元分析適用性
        3.3.8 MPN基因組G4-DNA多元分析
        3.3.9 化學發(fā)光條件優(yōu)化
        3.3.10 MPN基因組G4-DNA化學發(fā)光檢測
    3.4 本章小結
    參考文獻
第四章 量子點熒光編碼微球—鏈式取代反應用于 HepG2 細胞裂解液中 mi RNA 熒光成像分析
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗材料與儀器
        4.2.2 實驗方法
    4.3 結果與討論
        4.3.1 靶標雜交觸發(fā)探針構象變化
        4.3.2 NASDA指數(shù)擴增
        4.3.3 Ru-DI特異性標記
        4.3.4 Qbead-NASDA條件優(yōu)化
        4.3.5 Qbead-NASDA一體化分析靈敏度評估
        4.3.6 Qbead-NASDA一體化分析特異性評估
        4.3.7 Qbead-NASDA一體化分析多元性能評估
        4.3.8 HepG2 細胞裂解物中miRNA多元檢測
    4.4 本章小結
    參考文獻
第五章 總結與展望
    5.1 總結
    5.2 主要創(chuàng)新點
    5.3 展望
博士期間研究成果
致謝



本文編號:3737874

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