目的錳（Mn）是人體必需微量元素,參與身體各種重要的生理過程。但長期過量錳暴露會(huì)引起錳中毒,損害椎體外系和學(xué)習(xí)記憶力。海馬是主導(dǎo)學(xué)習(xí)記憶的主要腦區(qū),也是錳中毒累及的主要腦區(qū)之一。據(jù)研究,錳暴露激活小鼠海馬小膠質(zhì)細(xì)胞,NOD樣受體蛋白3（Nlrp3）炎性體表達(dá)增高,炎癥反應(yīng)增強(qiáng)。細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）可促進(jìn)細(xì)胞氧化應(yīng)激,進(jìn)而誘導(dǎo)硫氧還蛋白互作蛋白（Txnip）高表達(dá),并激活Nlrp3炎癥小體。對氨基水楊酸鈉（PAS-Na）屬于非甾體抗炎藥,具有抗炎、抗氧化作用,可抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化和炎癥反應(yīng),且本團(tuán)隊(duì)此前研究發(fā)現(xiàn)PAS-Na治療對錳中毒患者療效較好。因此,本研究擬通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)探討PAS-Na對ERS-Txnip/Nlrp3炎癥小體信號通路介導(dǎo)錳神經(jīng)毒性的干預(yù)作用機(jī)制。方法1體外研究:體外試驗(yàn)選大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞系-HAPI細(xì)胞為研究對象。（1）首先用噻唑藍(lán)（MTT）法檢測不同濃度錳、PAS-Na暴露24h后的HAPI細(xì)胞存活率;（2）藥物試驗(yàn)分組及處理如下:①錳損傷模型:分為對照、低、中、高錳組,分別給予0、50、100、200 μmol/L（μM）Mn暴露;②PAS-Na干預(yù)組:分為... 

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【學(xué)位級別】：博士

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摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 PAS-Na對ERS-Txnip/Nlrp3炎癥通路介導(dǎo)錳神經(jīng)毒性的體外干預(yù)研究
    1 材料
        1.1 主要儀器
        1.2 主要試劑
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及傳代
        2.2 細(xì)胞藥物處理染毒
        2.3 熒光定量PCR
        2.4 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        2.5 Elisa實(shí)驗(yàn)
        2.6 細(xì)胞ROS檢測
        2.7 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 不同濃度錳、PAS-Na暴露對HAPI細(xì)胞存活率的影響
        3.2 PAS-Na對染錳HAPI細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響
        3.3 PAS-Na對染錳HAPI細(xì)胞炎癥因子釋放的影響
        3.4 PAS-Na對染錳HAPI細(xì)胞炎癥小體表達(dá)的影響
        3.5 PAS-Na對染錳HAPI細(xì)胞氧化損傷的影響
        3.6 PAS-Na對染錳HAPI細(xì)胞IRE1表達(dá)的影響
        3.7 TUDCA對染錳HAPI細(xì)胞Txnip/Nlrp3信號通路的影響
        3.8 Resveratrol對染錳HAPI細(xì)胞Txnip/Nlrp3信號通路的影響
    4 討論
第二部分 PAS-Na對ERS-Txnip/Nlrp3炎癥通路介導(dǎo)錳神經(jīng)毒性的體內(nèi)干預(yù)研究
    1 材料
        1.1 儀器與試劑
        1.2 主要試劑
    2 方法
        2.1 動(dòng)物飼養(yǎng)
        2.2 大鼠學(xué)習(xí)記憶能力測試
        2.3 大鼠樣本的采集與處理
        2.4 大鼠海馬超微結(jié)構(gòu)觀察
        2.5 免疫組化
        2.6 相關(guān)元素含量測定
        2.7 熒光定量PCR
        2.8 Western Blot實(shí)驗(yàn)
        2.9 Elisa實(shí)驗(yàn)
        2.10 數(shù)據(jù)處理
    3 結(jié)果
        3.1 染錳對大鼠生長發(fā)育的影響及PAS-Na的干預(yù)作用
        3.2 染錳對大鼠血、腦錳的影響及PAS-Na的干預(yù)作用
        3.3 PAS-Na對染錳大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
        3.4 PAS-Na對染錳大鼠海馬損傷的影響
        3.5 PAS-Na對染錳大鼠海馬炎癥因子表達(dá)的影響
        3.6 PAS-Na對染錳大鼠海馬炎癥小體表達(dá)的影響
        3.7 PAS-Na對染錳大鼠海馬氧化損傷的影響
        3.8 PAS-Na對染錳大鼠海馬Txnip表達(dá)的影響
        3.9 PAS-Na對染錳大鼠海馬IRE1表達(dá)的影響
    4 討論
總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
博士期間發(fā)表論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]α-突觸核蛋白在錳誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用[J]. 譚璇,徐斌,王璨,閆冬瑩,劉暢,馬卓,劉巍,鄧宇,徐兆發(fā).  中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(04)
[2]對氨基水楊酸鈉對錳染毒大鼠丘腦原代小膠質(zhì)細(xì)胞氧化損傷及炎癥反應(yīng)的影響[J]. 彭東杰,羅旖旎,秦文霞,梁典胤,謝秉言,許放,李少軍,姜岳明.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2018(04)
[3]牛磺酸對染錳所致大鼠丘腦氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)改變的干預(yù)作用[J]. 耿立敏,郭松超,雷丹青,陸彩玲,何以源.  廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(05)
[4]對氨基水楊酸鈉對染錳大鼠基底核GABAAR及GAT-1表達(dá)的影響[J]. 歐超燕,羅海蘭,姜岳明,王禪,蒙浩洋,姜力,區(qū)仕燕,鄧祥發(fā).  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2012(05)
[5]對氨基水楊酸鈉對染錳大鼠基底核氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響[J]. 歐超燕,黃明立,姜岳明,羅海蘭,鄧祥發(fā),王禪,王芳,黃曉薇.  中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 2011 (05)
[6]對氨基水楊酸鈉對染錳大鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬GFAP陽性細(xì)胞表達(dá)的影響[J]. 劉翃,羅海蘭,鐘祥海,鄧祥發(fā),吳飛盈,王禪,韋義萍,廖海濤,姜岳明.  工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病. 2011(02)
[7]多糖復(fù)合物對鯽魚軀體生化組成、臟器指數(shù)及白細(xì)胞數(shù)目的影響[J]. 劉軍,陳愛敬,胡先勤,汪明,黃峰,榮克明.  飼料工業(yè). 2009(24)
[8]焊接工人蒼白球MRIT1加權(quán)檢查顯示高密度影的神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)[J]. Josephs K.A.,Ahlskog J.E.,Klos K.J.,史利利.  世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(神經(jīng)病學(xué)分冊). 2005(10)
[9]PAS-Na治療30例電焊工慢性錳中毒的臨床觀察[J]. 董國強(qiáng),張建余.  職業(yè)衛(wèi)生與病傷. 2001(02)

博士論文
[1]程序性壞死參與錳致神經(jīng)元死亡機(jī)制的研究[D]. 磨潔琳.廣西醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]PAS-Na對染錳大鼠腦炎癥反應(yīng)的影響[D]. 李少軍.廣西醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]NLRP3炎癥體介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)在錳神經(jīng)毒性中的作用[D]. 王迪雅.第四軍醫(yī)大學(xué) 2016
[4]PAS-Na對錳暴露大鼠基底核GABA能神經(jīng)遞質(zhì)的影響[D]. 歐超燕.廣西醫(yī)科大學(xué) 2012
[5]錳對海馬依賴學(xué)習(xí)記憶的損傷及牛磺酸的干預(yù)研究[D]. 陸彩玲.廣西醫(yī)科大學(xué) 2011
[6]對氨基水楊酸鈉（PAS-Na）對錳致大鼠大腦邊緣系統(tǒng)損傷的干預(yù)機(jī)制研究[D]. 鄧祥發(fā).廣西醫(yī)科大學(xué) 2010

碩士論文
[1]PAS-Na對錳致BV2細(xì)胞NF-κβ/NLRP3/Caspase-1通路的影響的干預(yù)作用[D]. 彭東杰.廣西醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]PAS-Na對錳致大鼠原代小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥損傷干預(yù)作用的研究[D]. 羅旖旎.廣西醫(yī)科大學(xué) 2017
[3]PAS-Na對錳致大鼠海馬炎癥反應(yīng)的影響[D]. 袁宗祥.廣西醫(yī)科大學(xué) 2016
[4]腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3（TRAF3）在錳誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)中的作用研究[D]. 王曉靜.第四軍醫(yī)大學(xué) 2016
[5]cAMP信號通路在錳致大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙中的作用[D]. 梁桂強(qiáng).廣西醫(yī)科大學(xué) 2015
[6]對氨基水楊酸鈉對染錳大鼠體內(nèi)金屬元素、學(xué)習(xí)記憶及海馬超微結(jié)構(gòu)的影響[D]. 陳海濱.廣西醫(yī)科大學(xué) 2009



本文編號：3732010