近年來,由于抗生素的不合理使用,導致耐藥菌在全球范圍內不斷蔓延,致使世界范圍內每年超過700,000人死于耐藥菌感染,嚴重威脅著人類健康。而多重耐藥革蘭氏陰性菌的出現(xiàn)更是給臨床治療帶來了巨大挑戰(zhàn),原因是治療多重耐藥革蘭氏陰性菌感染的藥物非常有限。為解決這個問題,多粘菌素——這類古老抗生素又被重新應用于臨床,并被視為是治療某些多重耐藥革蘭氏陰性菌感染的最后一道藥物防線。然而,在2015年末,我國學者首次報道了由質粒介導的黏菌素耐藥基因——mcr-1（mobile colistin resistance）,其不僅可以縱向傳遞,還能夠在不同種屬的細菌之間水平轉移,引起國際范圍內的廣泛關注,這也使得多粘菌素這一最后的藥物防線被打破,增大了泛耐藥菌在全球范圍內傳播的風險。當前,非抗生素類與抗生素類藥物聯(lián)合應用正在成為一種非常有價值的應用療法,既可以恢復抗生素對耐藥菌的效力,又不會對細菌施加選擇性壓力。因此,由mcr-1基因編碼的蛋白質——MCR-1蛋白,可作為藥物設計的靶標,通過設計合成小分子化合物來抑制MCR-1蛋白的生物活性,從而恢復mcr-1陽性耐藥菌對多粘菌素的敏感性,為臨床多粘菌素耐藥... 

【文章頁數(shù)】：159 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞與中英文對照
第1章 緒論
    1.1 抗生素耐藥
        1.1.1 抗生素耐藥概述
        1.1.2 細菌耐藥機制
    1.2 多粘菌素
        1.2.1 多粘菌素概述
        1.2.2 多粘菌素耐藥
    1.3 mcr-1的研究
        1.3.1 mcr-1概述
        1.3.2 MCR-1抑制劑概述
    1.4 課題設計思路
第2章 MCR-1小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)
    2.1 以MCR-1為靶標的活性小分子的發(fā)現(xiàn)
        2.1.1 計算機輔助藥物設計概述
        2.1.2 MCR-1蛋白結構分析
        2.1.3 以MCR-1蛋白為靶標的分子對接
        2.1.4 候選化合物的生物活性評價
    2.2 MCR-1小分子抑制劑的設計合成
        2.2.1 MCR-1小分子抑制劑的設計
        2.2.2 化學合成路線
        2.2.3 化合物合成方法
    2.3 MCR-1小分子抑制劑的生物活性評價
        2.3.1 實驗材料
        2.3.2 實驗方法
        2.3.3 實驗結果
    2.4 str5329系列化合物的構效關系
    2.5 小結
第3章 化合物對MCR-1蛋白的抑制作用
    3.1 實驗原理
    3.2 實驗材料
        3.2.1 主要實驗試劑
        3.2.2 主要實驗儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 MCR-1蛋白的表達和純化
        3.3.2 MCR-1蛋白活性的檢測
        3.3.3 化合物與MCR-1全長蛋白的對接分析
    3.4 實驗結果
        3.4.1 MCR-1蛋白與底物的結合
        3.4.2 化合物對MCR-1蛋白的抑制活性
        3.4.3 str5329系列化合物與MCR-1蛋白相互作用分析
    3.5 小結
第4章 化合物體內活性評價研究
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗動物
        4.1.2 主要實驗試劑
        4.1.3 主要實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 感染菌液的制備
        4.2.2 小鼠急性腹膜炎模型的建立
        4.2.3 小鼠生存率實驗
        4.2.4 小鼠肝臟帶菌量測定
        4.2.5 小鼠肝臟病理學檢查
        4.2.6 統(tǒng)計學分析
    4.3 實驗結果
        4.3.1 小鼠急性腹膜炎模型的建立
        4.3.2 小鼠生存率研究
        4.3.3 小鼠肝臟帶菌量測定
        4.3.4 小鼠肝臟病理學檢查
    4.4 小結
第5章 FDA庫中MCR-1小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)
    5.1 實驗材料
        5.1.1 主要實驗試劑
        5.1.2 主要實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 Gold對接方法
        5.2.2 生物活性評價實驗方法
        5.2.3 Nebivolol與MCR-1全長蛋白的對接分析
    5.3 實驗結果
        5.3.1 以MCR-1蛋白為靶標的分子對接
        5.3.2 候選化合物的活性評價
        5.3.3 Nebivolol對MCR-1蛋白的抑制作用
        5.3.4 Nebivolol與MCR-1蛋白相互作用分析
    5.4 小結
第6章 結論
參考文獻
附圖
作者簡介及在學期間取得的科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素耐藥機制研究進展[J]. 張心宇,杜雪飛,鄒桂玲,姜曉峰.  檢驗醫(yī)學. 2019(07)
[2]多黏菌素耐藥MCR-1:公共衛(wèi)生領域的新挑戰(zhàn)[J]. 王秀娜,張會敏,孫堅,劉雅紅,馮友軍.  科學通報. 2017(10)
[3]質粒介導的黏菌素耐藥基因mcr-1研究進展[J]. 易靈嫻,劉藝云,吳仁杰,梁梓森,劉健華.  遺傳. 2017(02)
[4]多肽類抗菌劑研究進展[J]. 李艷萍,李卓榮.  國外醫(yī)藥(抗生素分冊). 2009(04)

碩士論文
[1]多重耐藥鮑曼不動桿菌關鍵耐藥基因的研究[D]. 王麗娟.蚌埠醫(yī)學院 2013



本文編號：3719803