目的:近年來,甲狀腺惡性腫瘤的發(fā)病率呈逐年上升趨勢,現(xiàn)已是全球范圍內(nèi)發(fā)病率上升最快的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤,在年輕女性中,其發(fā)病率超過乳腺癌,成為30歲以下女性最多見的惡性腫瘤。甲狀腺惡性腫瘤可分為4個(gè)病理亞型,分別是甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid cancer,PTC）、甲狀腺濾泡狀癌（folicular thyroid cancer,FTC）、甲狀腺髓樣癌（medullary thyroid cancer,MTC）及甲狀腺未分化癌（anaplastic thyroid cancer,ATC）。其中PTC是最常見的甲狀腺癌病理亞型,約占全部甲狀腺癌的80%~90%。大部分PTC患者在徹底的手術(shù)切除及放射性碘（radioactive iodine,RAI）治療后預(yù)后良好,5年生存率超過95%。但其易發(fā)生早期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是PTC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,這部分患者生存率驟降至40%。組蛋白甲基化異常是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的常見原因。組蛋白去甲基化酶1A（KDM1A）可以與多種蛋白質(zhì)復(fù)合物（Corest、NuRD和RCOR2）、受體（雌激素、雄激素和TLX）、非編碼... 

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:KDM1A在 PTC及其對應(yīng)癌旁組織中的表達(dá)情況
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 組織標(biāo)本
            2.1.2 細(xì)胞系
            2.1.3 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
            2.2.3 Real time PCR
            2.2.4 總蛋白提取
            2.2.5 蛋白濃度定量(BCA法)
            2.2.6 蛋白免疫印跡(Western blot)
            2.2.7 免疫組織化學(xué)染色(IHC)
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 常見的KDMs在 PTC中的表達(dá)情況
        3.2 KDM1A在 PTC中的表達(dá)情況
        3.3 KDM1A與 PTC患者臨床特性的關(guān)系
        3.4 KDM1A在 PTC細(xì)胞系及正常甲狀腺細(xì)胞系中的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:KDM1A對 PTC細(xì)胞遷移、侵襲能力作用的研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞系
            2.1.2 主要試劑
            2.1.4 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.2.3 RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 Real time PCR
            2.2.5 總蛋白提取
            2.2.6 蛋白濃度定量(BCA法)
            2.2.7 蛋白免疫印跡(Western blot)
            2.2.8 Transwell實(shí)驗(yàn)
            2.2.9 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
            2.2.10 裸鼠尾靜脈注射肺轉(zhuǎn)移模型
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 使用si-KDM1A的干擾效率
        3.2 下調(diào)KDM1A對細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響
        3.3 裸鼠經(jīng)尾靜脈注射肺轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分:KDM1A通過使TIMP1 轉(zhuǎn)錄起始區(qū)域H3K4 me2 去甲基化,抑制其表達(dá)發(fā)揮促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的作用
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 材料
            2.1.1 細(xì)胞系
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.2.3 RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
            2.2.4 Real time PCR
            2.2.5 總蛋白提取
            2.2.6 BCA蛋白濃度定量法
            2.2.7 蛋白免疫印跡(Western blot)
            2.2.8 Transwell實(shí)驗(yàn)
            2.2.9 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
            2.2.10 明膠酶譜法
            2.2.11 染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)
        2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 轉(zhuǎn)染si-KDM1A后下游侵襲相關(guān)蛋白的變化
        3.2 TIMP1是KDM1A的下游靶基因
        3.3 下調(diào)TIMP1 可以部分挽救干擾KDM1A后引起的細(xì)胞遷移和侵襲能力的改變
        3.4 KDM1A與 TIMP1 啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合
        3.5 KDM1A與 TIMP1 結(jié)合并使H3K4me2 去甲基化
    4 討論
    5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]甲狀腺癌病人生存現(xiàn)狀分析[J]. 田文,郗洪慶.  中國實(shí)用外科雜志. 2016(05)
[2]LSD1及其在腫瘤發(fā)生中的調(diào)節(jié)作用[J]. 于妍妍,王斌,陳東風(fēng).  醫(yī)學(xué)綜述. 2012(17)
[3]組蛋白去甲基化酶LSD1的結(jié)構(gòu)和功能研究進(jìn)展[J]. 阮建彬,臧建業(yè).  中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(08)



本文編號：3717224