動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis,AS）是一種典型的慢性炎癥性血管病變,是腦血管病、冠心病和外周動(dòng)脈疾病等缺血性心腦血管病的共同病理學(xué)基礎(chǔ),嚴(yán)重危害人類健康。目前,臨床上常采用口服降脂或抗炎藥物來抑制AS的發(fā)展,然而傳統(tǒng)的口服藥物治療存在利用率低、見效慢、毒副作用嚴(yán)重等問題。納米藥物遞送系統(tǒng)能夠增溶藥物、提高藥物半衰期、改善藥物體內(nèi)分布、降低毒副作用,在臨床AS診斷和治療中具有極大的應(yīng)用價(jià)值和廣闊的市場前景。但是,傳統(tǒng)的納米藥物遞送系統(tǒng)難以被正常的生物機(jī)體交互認(rèn)可,不可避免地被作為“非己”異物被機(jī)體清除,難以靶向輸送藥物到靶病變部位。因此,基于AS病理特點(diǎn)構(gòu)建具有藥物緩釋及靶向藥物遞送功能的仿生納米藥物系統(tǒng)是實(shí)現(xiàn)AS高效、安全治療的關(guān)鍵。本研究基于AS的慢性炎癥、病變部位EPR效應(yīng)及內(nèi)皮高表達(dá)粘附分子的病理特點(diǎn),利用具有優(yōu)異生物相容性且可降解的聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）作為納米載體,負(fù)載具有抗AS功能的藥物-雷帕霉素（RAP）,制備納米藥物RAPNPs;并進(jìn)一步協(xié)同天然巨噬細(xì)胞的免疫逃逸及特異性識別炎癥內(nèi)皮功能,將巨噬細(xì)胞膜（MM）包被于RAPNPs納米藥物表面,制... 

【文章頁數(shù)】：137 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
主要縮寫詞
1 緒論
    1.1 動(dòng)脈粥樣硬化簡介
    1.2 動(dòng)脈粥樣硬化納米給藥的靶向方式
        1.2.1 被動(dòng)靶向
        1.2.2 主動(dòng)靶向
    1.3 利用納米藥物治療動(dòng)脈粥樣硬化的方式
        1.3.1 管理血脂水平
        1.3.2 動(dòng)脈粥樣硬化抗炎治療
    1.4 細(xì)胞膜包被納米粒子技術(shù)
        1.4.1 細(xì)胞膜包被納米粒子的制備
        1.4.2 包被納米粒子的細(xì)胞膜種類
    1.5 問題的提出及研究思路
        1.5.1 問題的提出
        1.5.2 研究思路
    1.6 研究內(nèi)容及研究意義
        1.6.1 主要研究內(nèi)容
        1.6.2 研究的意義
    1.7 本研究的創(chuàng)新性之處
2 巨噬細(xì)胞膜包被納米藥物構(gòu)建及表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 RAPNPs的制備
        2.3.2 巨噬細(xì)胞膜的提取
        2.3.3 仿生納米藥物(MM/RAPNPs)的制備
        2.3.4 RAPNPs、DiDNPs及 MMRAPNPs的粒徑、電位及形貌表征
        2.3.5 RAPNPs載藥量和包封率測量
        2.3.6 RAPNPs及 MM/RAPNPs的體外藥物釋放表征
        2.3.7 共定位實(shí)驗(yàn)表征
        2.3.8 MM/RAPNPs蛋白組成表征
        2.3.9 MM/RAPNPs表面糖蛋白含量測定
        2.3.10 蛋白免疫印跡表征MM/RAPNPs特征性蛋白
        2.3.11 統(tǒng)計(jì)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 RAPNPs粒徑、電位表征
        2.4.2 DiDNPs粒徑、電位表征
        2.4.3 RAPNPs載藥量及包封率
        2.4.4 MM/RAPNPs粒徑、電位及形貌表征
        2.4.5共定位實(shí)驗(yàn)
        2.4.6 MM/RANPs蛋白組成表征
        2.4.7 MM/RANPs表面巨噬細(xì)胞膜取向表征
        2.4.8 MM/RAPNPs特征性蛋白表征
        2.4.9 MM/RAPNPs體外藥物釋放行為研究
    2.5 本章小結(jié)
3 巨噬細(xì)胞膜包被納米藥物的體外評價(jià)
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1溶血實(shí)驗(yàn)
        3.3.2 血漿中血小板α顆粒膜蛋白的檢測
        3.3.3 血清中蛋白吸附
        3.3.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.3.5 體外巨噬細(xì)胞吞噬
        3.3.6 體外炎癥內(nèi)皮細(xì)胞吞噬
        3.3.7體外抑制巨噬細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)
        3.3.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 溶血實(shí)驗(yàn)
        3.4.2 血漿中血小板α顆粒膜蛋白檢測
        3.4.3 血清中蛋白吸附
        3.4.4 體外巨噬細(xì)胞吞噬
        3.4.5 體外炎癥內(nèi)皮細(xì)胞吞噬
        3.4.6 體外抑制巨噬細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的增殖
    3.5 本章小結(jié)
4 巨噬細(xì)胞膜包被納米藥物體內(nèi)抗動(dòng)脈粥樣硬化及安全性評價(jià)
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 體內(nèi)長效循環(huán)檢測
        4.3.2 ApoE~(-/-)小鼠AS造模
        4.3.3 體內(nèi)靶向AS研究
        4.3.4 仿生納米藥物對ApoE~(-/-)小鼠AS的治療
        4.3.5 仿生納米藥物治療后組織樣本的采集
        4.3.6 小鼠主動(dòng)脈的油紅O染色
        4.3.7 小鼠主動(dòng)脈弓根部冰凍切片制備
        4.3.8 小鼠主動(dòng)脈弓根部冰凍切片油紅O染色
        4.3.9 小鼠主動(dòng)脈弓根部冰切片的MASSON及甲苯胺藍(lán)染色
        4.3.10 小鼠主動(dòng)脈弓根部切片的免疫組化染色
        4.3.11 小鼠主要臟器石蠟切片制備及HE染色
        4.3.12 血液指標(biāo)檢測
        4.3.13 統(tǒng)計(jì)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.4.1 巨噬細(xì)胞膜包被納米粒子的體內(nèi)長效循環(huán)
        4.4.2 巨噬細(xì)胞膜包被納米粒子對AS部位的靶向性及體內(nèi)聚集
        4.4.3 仿生納米藥物對ApoE~(-/-)小鼠斑塊治療效果
        4.4.4 仿生納米藥物對ApoE~(-/-)小鼠治療后斑塊穩(wěn)定性影響
        4.4.5 仿生納米藥物治療對Apo E~(-/-)小鼠斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞的影響
        4.4.6 仿生納米藥物對ApoE~(-/-)小鼠治療后的安全性評價(jià)
    4.5 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 后續(xù)研究工作的展望
參考文獻(xiàn)
附錄
    A.作者在攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄：
    B.作者在攻讀學(xué)位期間參與的科研項(xiàng)目
    C.學(xué)術(shù)論文數(shù)據(jù)集
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]High-density lipoprotein and atherosclerosis: Roles of lipid transporters[J]. Yoshinari Uehara,Keijiro Saku.  World Journal of Cardiology. 2014(10)



本文編號：3692963