【背景和目的】中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病發(fā)病率逐年上升,難以治愈,影響生命質(zhì)量。就腦卒中而言,我國每年新發(fā)腦卒中人數(shù)200余萬人,呈現(xiàn)高發(fā)病率、高致殘率和高死亡率的特點(diǎn)。幸存者中75%以上都會因?yàn)椴煌潭鹊纳窠?jīng)損傷而留下后遺癥。此外,我國已經(jīng)進(jìn)入老齡化社會,經(jīng)濟(jì)和醫(yī)療水平的提升大大延長了壽命,但隨之而來的是神經(jīng)退行性疾病發(fā)病率呈上升趨勢。這些疾病嚴(yán)重影響患者及其家庭生活質(zhì)量,也給社會帶來了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。神經(jīng)元損傷是腦卒中和神經(jīng)退行性疾病常見的病理特征;隨著神經(jīng)損傷的加重,患者的病情也隨之惡化,面臨著永久殘疾甚至是死亡的威脅。因此,探究神經(jīng)損傷分子機(jī)制,尋找具有神經(jīng)保護(hù)作用的藥物靶點(diǎn)意義重大。雌激素是一種類固醇激素,除了在發(fā)育、生長、生殖功能方面的作用外,還具有神經(jīng)保護(hù)作用。雌激素的作用由經(jīng)典的核受體（ERα、ERβ）和膜性受體（GPR30、Gaq-ER、ER-X）所介導(dǎo)。G蛋白偶聯(lián)受體30（G protein-coupled receptor 30,GPR30）是上世紀(jì)90年代發(fā)現(xiàn)的一種新型雌激素膜受體。與經(jīng)典的雌激素核受體不同,GPR30能夠介導(dǎo)雌激素的快速反應(yīng)和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)。我們前期的研究發(fā)現(xiàn)... 

【文章頁數(shù)】：135 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
ABSTRACT
前言
文獻(xiàn)回顧
    一、神經(jīng)元受損的常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病
        1.腦卒中
            1.1 .缺血性腦卒中
            1.2 .缺血性腦卒中的神經(jīng)損傷機(jī)制
        2.中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病
            2.1 .阿爾茨海默病
            2.2 .帕金森病
            2.3 .肌萎縮側(cè)索硬化癥和亨廷頓舞蹈病
        3.神經(jīng)保護(hù)藥物
            3.1 .鈣通道阻滯劑
            3.2 .Glu受體拮抗劑
            3.3 .神經(jīng)營養(yǎng)生長因子
            3.4 .自由基清除劑
            3.5 .炎癥反應(yīng)抑制劑
    二、膠質(zhì)細(xì)胞參與神經(jīng)元損傷和保護(hù)
        1.小膠質(zhì)細(xì)胞
            1.1 .小膠質(zhì)細(xì)胞的生理作用
            1.2 .小膠質(zhì)細(xì)胞的活化
            1.3 .小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)損傷和神經(jīng)保護(hù)中的作用
        2.星形膠質(zhì)細(xì)胞
            2.1 .AS的生理作用
            2.2 .AS的活化
            2.3 .AS在神經(jīng)損傷和神經(jīng)保護(hù)中的作用
    三、自噬在CNS疾病和神經(jīng)保護(hù)中的重要作用
        1.自噬的概況
        2.神經(jīng)元自噬與神經(jīng)保護(hù)
        3.AS自噬與神經(jīng)保護(hù)
        4.自噬的信號調(diào)節(jié)通路
    四、GPR30 介導(dǎo)了雌激素的快速神經(jīng)保護(hù)作用
        1.GPR30 在大腦中的分布
        2.GPR30 調(diào)控的信號通路
        3.GPR30 參與神經(jīng)保護(hù)作用
第一部分 星形膠質(zhì)細(xì)胞GPR30 參與神經(jīng)保護(hù)作用
    引言
    1.材料
        1.1 .實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 .主要化學(xué)試劑
        1.3 .試劑的配制
        1.4 .儀器和耗材
    2.方法
        2.1 .小鼠鼠尾DNA提取及基因鑒定
        2.2 .基因組測序
        2.3 .逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)
        2.4 .雌性小鼠卵巢切除術(shù)
        2.5 .實(shí)驗(yàn)分組和給藥方法
        2.6 .MCAO和側(cè)腦室再灌注
        2.7 .神經(jīng)缺陷評分
        2.8 .TTC染色
        2.9 .尼氏染色
        2.10 .統(tǒng)計學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 .GPR30 轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建和鑒定
        3.2 .星形膠質(zhì)細(xì)胞GPR30 的激活對缺血再灌注損傷模型小鼠具有保護(hù)作用
    4.討論
    小結(jié)
第二部分 星形膠質(zhì)細(xì)胞GPR30 調(diào)控自噬參與神經(jīng)保護(hù)作用
    引言
    1.材料
        1.1 .實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 .主要試劑
        1.3 .試劑的配制
        1.4 .儀器和耗材
    2.方法
        2.1 .AS原代培養(yǎng)、純化及鑒定
        2.2 .神經(jīng)元原代培養(yǎng)
        2.3 .給藥方案
        2.4 .ACM培養(yǎng)神經(jīng)元
        2.5 .MTT實(shí)驗(yàn)
        2.6 .BrdU摻入實(shí)驗(yàn)
        2.7 .免疫熒光染色
        2.8 .Western blot
        2.9 .ELISA
        2.10 .MDC染色
        2.11 .統(tǒng)計學(xué)分析
    3.結(jié)果
        3.1 .GPR30 激動劑能夠抑制Glu引起的AS反應(yīng)性增生和活化
        3.2 .激活星形膠質(zhì)細(xì)胞GPR30 能夠抑制Glu誘導(dǎo)的AS炎癥因子釋放和ACM引起的神經(jīng)元損傷
        3.3 .興奮性毒性引起的AS反應(yīng)性增生與自噬的抑制相關(guān)
        3.4 .激動GPR30 能夠逆轉(zhuǎn)Glu引起的AS自噬失衡,抑制AS活化
        3.5 .GPR30對AS自噬的調(diào)節(jié)不是通過AKT/mTOR信號通路
        3.6 .GPR30對AS自噬的調(diào)節(jié)不是通過ERK和 JNK信號通路
        3.7 .GPR30 通過p38 MAPK信號通路調(diào)控AS自噬
    4.討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
個人簡歷和研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]p38α MAPK pathway:A key factor in colorectal cancer therapy and chemoresistance[J]. Valentina Grossi,Alessia Peserico,Tugsan Tezil,Cristiano Simone.  World Journal of Gastroenterology. 2014(29)



本文編號：3681861