研究背景:紅芪是豆科植物多序巖黃芪的干燥根,有野生和栽培品種,主產(chǎn)于甘肅。在紅芪所含的多種活性物質(zhì)研究中,紅芪多糖的抗衰老作用的深入研究為我們應(yīng)對中國老齡化帶來的挑戰(zhàn)打開了一扇窗。在中醫(yī)眾多延緩衰老方中,補(bǔ)中益氣湯以黃芪為君藥,重在補(bǔ)益中氣,調(diào)節(jié)機(jī)體的后天之本,而紅芪和黃芪都具有“補(bǔ)氣升陽、固表止汗……”等多方面功效。紅芪主銷廣東、福建等地并出口,常被認(rèn)為是黃芪的優(yōu)質(zhì)品種。本論文希望通過研究紅芪/黃芪為君藥的補(bǔ)中益氣湯對免疫衰老的免疫調(diào)節(jié)作用差異;通過對紅芪中具有抗衰老作用的紅芪多糖對免疫衰老的影響研究,為合理開發(fā)甘肅道地藥材紅芪以及紅芪的臨床科學(xué)使用提供依據(jù)。目的:比較紅芪/黃芪為君藥的補(bǔ)中益氣湯對SAMP8小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用,尋找紅芪調(diào)節(jié)免疫功能的作用機(jī)制。研究紅芪提取物紅芪多糖-3（Hedysari polysaccharide 3,HPS-3）對SAMP8小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)機(jī)制,為紅芪的合理使用提供理論依據(jù)。方法:1.以等量紅芪替代補(bǔ)中益氣湯中的君藥黃芪,分別制備紅芪補(bǔ)中益氣湯和黃芪補(bǔ)中益氣湯。取10只昆明小鼠做為青齡模型組,40只SAMP8小鼠隨機(jī)分成衰老模型組、胸腺肽陽... 

【文章頁數(shù)】：143 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 補(bǔ)中益氣湯應(yīng)用概況
    1.3 紅芪與黃芪在種植(種質(zhì))、成分、功效方面的比較研究
    1.4 紅芪現(xiàn)代研究
        1.4.1 紅芪種植研究
        1.4.2 紅芪成分研究
        1.4.3 紅芪功效研究
    1.5 紅芪多糖研究
        1.5.1 紅芪多糖提取工藝研究
        1.5.2 紅芪多糖含量測定及多糖組分研究
        1.5.3 紅芪多糖功效及相關(guān)機(jī)制研究
    1.6 Label free技術(shù)在中藥作用機(jī)制研究中的作用
    1.7 立題依據(jù)
    1.8 技術(shù)路線圖
第二章 用紅芪替代補(bǔ)中益氣湯中的君藥黃芪對SAMP8小鼠抗免疫老化作用比較研究
    2.1 材料
        2.1.1 動物
        2.1.2 試劑和儀器
        2.1.3 藥物
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
        2.2.1 分組及給藥
        2.2.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液制備
        2.2.3 HE染色觀察小鼠脾臟病理組織學(xué)變化
        2.2.4 ELISA檢測血清中IL-2、IFN-γ、TNF-α的含量
        2.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測T淋巴細(xì)胞亞群
        2.2.6 實(shí)時熒光定量PCR檢測脾淋巴細(xì)胞中p38MAPK mRNA表達(dá)量
        2.2.7 Western Blot檢測脾淋巴細(xì)胞中p38MAPK蛋白的表達(dá)
        2.2.8 免疫組化法檢測小鼠脾臟p38MAPK蛋白
        2.2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8小鼠生命狀態(tài)的影響
        2.3.2 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8小鼠脾臟病理組織學(xué)變化的影響
        2.3.3 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8小鼠血清細(xì)胞因子含量的影響
        2.3.4 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響
        2.3.5 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8 小鼠脾淋巴細(xì)胞中的p38MAPK mRNA的影響
        2.3.6 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8 小鼠淋巴細(xì)胞中的p38MAPK蛋白表達(dá)的影響
        2.3.7 補(bǔ)中益氣湯對SAMP8 小鼠脾臟p38MAPK蛋白表達(dá)的影響
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第三章 紅芪多糖促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)動物
    3.2 試劑與儀器
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
    3.3 實(shí)驗(yàn)過程
        3.3.1 紅芪多糖制備
        3.3.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞懸液的制備
        3.3.3 MTT法測定HPS-3 對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響
        3.3.4 ELISA測定HPS-3 對淋巴細(xì)胞培養(yǎng)上清細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α和 IL-4 的影響
        3.3.5 FCM測定HPS-3 對小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響
        3.3.6 透射電鏡觀察HPS-3對脾淋巴細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變
    3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.5.1 HPS-3對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響
        3.5.2 HPS-3 對小鼠脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生Th1/Th2 細(xì)胞因子的影響
        3.5.3 HPS-3對小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群的影響
        3.5.4 HPS-3對脾淋巴細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變
    3.6 討論
    3.7 結(jié)論
第四章 Label Free蛋白質(zhì)組學(xué)研究紅芪多糖對衰老小鼠脾淋巴細(xì)胞作用的機(jī)制
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 動物
        4.1.2 試劑
        4.1.3 儀器
        4.1.4 軟件工具和相關(guān)數(shù)據(jù)庫
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 樣本制備
        4.2.2 質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集
        4.2.3 數(shù)據(jù)分析
        4.2.4 生物信息分析
        4.2.5 Western Blot驗(yàn)證差異蛋白的表達(dá)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 質(zhì)譜分析數(shù)據(jù)總體情況
        4.3.2 組間顯著差異表達(dá)蛋白解析
        4.3.3 差異蛋白GO分析
        4.3.4 差異蛋白聚類分析
        4.3.5 差異蛋白KEGG通路分析
        4.3.6 STRING分析
        4.3.7 上調(diào)差異蛋白Reactome Pathways通路分析
        4.3.8 Western Blot驗(yàn)證上調(diào)的免疫調(diào)節(jié)相關(guān)的差異表達(dá)蛋白
    4.4 討論
    4.5 結(jié)論
第五章 結(jié)論
附 質(zhì)譜信息
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]p38MAPK信號通路參與BMP2誘導(dǎo)MSCs的歸巢效應(yīng)研究[J]. 趙淦琳煒,楊毅.  中國臨床研究. 2020(04)
[2]補(bǔ)中益氣湯聯(lián)合不同營養(yǎng)方式對肝癌切除術(shù)后大鼠免疫功能的影響[J]. 宋新梅,馬曉勇,曹磊,吳煜龍,郭志學(xué),王穎.  世界中醫(yī)藥. 2019(11)
[3]不同年齡SD大鼠脾臟組織顯微結(jié)構(gòu)觀察[J]. 黃靜,郭洋,項(xiàng)濤,吳大鵬,陳丹,楊正偉,李陽友.  實(shí)驗(yàn)動物與比較醫(yī)學(xué). 2019(05)
[4]香菇多糖的抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 蘇暢,李小江,賈英杰,張晶.  中草藥. 2019(06)
[5]慢性乙型肝炎患者外周血CD8+CD28+T淋巴細(xì)胞百分比的變化及其臨床意義探討[J]. 周積云,馬勇,丁體龍,涂遠(yuǎn)航,陳策.  實(shí)用肝臟病雜志. 2019(02)
[6]香菇多糖聯(lián)合AdIRF3通過刺激IFN-β表達(dá)抑制乳腺癌生長[J]. 蘇暢,賈英杰,李小江,劉宏根,張麗麗,鄔明歆,李文杰,張晶.  中草藥. 2019(05)
[7]衰老對于實(shí)驗(yàn)性小鼠結(jié)腸炎的影響及機(jī)制[J]. 劉愛玲,汪紅英,呂紅,錢家鳴.  中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2019(01)
[8]甘肅紅芪和黃芪血清移行成分對比研究[J]. 許京,葉迎,王瑞海,苗青,王震,聶穎蘭,劉麗梅.  中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志. 2019(02)
[9]補(bǔ)中益氣湯加減對糖尿病心肌病大鼠心功能及心肌細(xì)胞FABP3,PPARγ蛋白表達(dá)的影響[J]. 劉軍彤,楊宇峰,王仁和,石巖.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(12)
[10]微波提取紅芪總多糖工藝及其抗氧化活性的研究[J]. 袁菊麗,王亞麗,黃鈺芳.  應(yīng)用化工. 2019(02)

博士論文
[1]白細(xì)胞介素1受體相關(guān)激酶（IRAK）家族在基于Toll樣受體4信號通路介導(dǎo)的急性前葡萄膜炎發(fā)病中所起作用及紅芪多糖干預(yù)機(jī)制的研究[D]. 余爍.首都醫(yī)科大學(xué) 2017
[2]膀胱癌標(biāo)志物的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 郭嬌.中國科學(xué)院北京基因組研究所 2016
[3]黃芪及拆分組分對脾虛水濕不化模型大鼠的影響及分子機(jī)制研究[D]. 趙文曉.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[4]黑靈芝多糖的抗腫瘤活性及其分子機(jī)制初探[D]. 張莘莘.南昌大學(xué) 2014
[5]湖北麥冬多糖質(zhì)量控制與抗糖尿病活性研究[D]. 肖作奇.華中科技大學(xué) 2014
[6]當(dāng)歸芍藥散抗衰老活性的藥效學(xué)和藥代動力學(xué)研究[D]. 曾宇.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[7]紅芪多糖調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 衛(wèi)東鋒.蘭州大學(xué) 2012
[8]紅棗多糖的分子修飾與生物活性研究[D]. 焦中高.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2012
[9]1.復(fù)方四君子湯水煎劑的化學(xué)研究 2.多序巖黃芪化學(xué)成分的研究[D]. 劉揚(yáng).中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2006
[10]調(diào)治脾胃方藥干預(yù)精神神經(jīng)活動的理論與實(shí)驗(yàn)研究[D]. 賀娟.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2004

碩士論文
[1]補(bǔ)中益氣湯的相關(guān)文獻(xiàn)研究[D]. 李曉丹.河南中醫(yī)學(xué)院 2014
[2]紅芪多糖HPS1的提取分離及HPS1中四個組分結(jié)構(gòu)特征和抗補(bǔ)體活性研究[D]. 楊濤.蘭州大學(xué) 2014
[3]紅芪多糖抗氧化作用研究[D]. 楊小虎.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[4]兩種中草藥提取物對小鼠免疫功能和肉雞生產(chǎn)性能的影響[D]. 秦亮.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號：3679603