目的:頭頸部鱗狀細(xì)胞癌（Head and Neck Squamous Cell Carcinoma,HNSCC）主要起源于上呼吸道和上消化道黏膜,主要累及口腔、咽和喉等部位,占頭頸部癌癥90%以上,是頭頸部癌中最常見的一種嚴(yán)重威脅人類生命健康的惡性表皮來源性腫瘤,雖然近些年隨著治療方法的不斷改善,但目前HNSCC患者5年的生存率僅僅保持在50-60%。miRNAs是一類長度約為20-24個核苷酸的內(nèi)源性小分子非編碼RNA,它通過與靶基因mRNA 3′UTR上的互補堿基相結(jié)合來抑制靶基因的表達,從而參與調(diào)節(jié)許多生理活動。目前,越來越多的證據(jù)表明,miRNA不僅參與動植物的生長發(fā)育,而且miRNA的異常表達與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。近期研究發(fā)現(xiàn)hsa-let-7e-5p在很多惡性腫瘤中異常表達,但其對頭頸鱗癌發(fā)生發(fā)展的作用尚無文獻報道。近些年研究發(fā)現(xiàn)趨化因子受體7（C-C motif chemokine receptor 7,CCR7）不僅在免疫細(xì)胞上大量表達,而且在多種腫瘤細(xì)胞上的表達也不同程度的升高,并且與人類腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲及不良預(yù)后等關(guān)系密切。我們課題組通過... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要儀器、試劑與材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 材料
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 Hsa-let-7e-5p過表達和抑制載體的構(gòu)建及過表達載體質(zhì)粒的提取
        2.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.4 總RNA提取及實時熒光定量PCR
        2.2.5 增殖實驗
        2.2.6 劃痕實驗
        2.2.7 Transwell細(xì)胞實驗
        2.2.8 生物信息學(xué)靶基因預(yù)測
        2.2.9 Western Blot實驗
        2.2.10 熒光素酶實驗
        2.2.11 體內(nèi)實驗
        2.2.12 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 Hsa-let-7e-5p在頭頸鱗癌細(xì)胞PCI-37B中相對低表達,在PCI-37A中相對高表達
    3.2 Hsa-let-7e-5p在頭頸鱗癌患者原發(fā)腫瘤組織中低表達
    3.3 PCI-37B細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-let-7e-5pmimic后,hsa-let-7e-5p的表達水平顯著升高
    3.4 PCI-37A細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-let-7e-5p inhibitor后,hsa-let-7e-5p的表達水平顯著降低
    3.5 Hsa-let-7e-5p對頭頸鱗癌細(xì)胞的增殖具有抑制性作用
    3.6 Hsa-let-7e-5p對頭頸鱗癌細(xì)胞的遷移具有抑制性作用
        3.6.1 劃痕實驗結(jié)果
        3.6.2 Transwell遷移實驗結(jié)果
    3.7 Hsa-let-7e-5p對頭頸鱗癌細(xì)胞的侵襲具有抑制性作用
    3.8 生物信息學(xué)軟件預(yù)測CCR7 可能為hsa-let-7e-5p的下游靶基因
    3.9 Hsa-let-7e-5p負(fù)向調(diào)控CCR
    3.10 Hsa-let-7e-5p直接打靶CCR
    3.11 異位過表達hsa-let-7e-5p抑制了異種移植腫瘤的生長
4 討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述 關(guān)于頭頸鱗癌 mi RNAs 的研究與進展
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3664361