包含DEP結(jié)構(gòu)域的雷帕霉素靶蛋白相互作用蛋白（DEPTOR）是雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的重要調(diào)控因子,mTOR則是一種高度保守的激酶,其過度激活與多種人類癌癥密切相關(guān)。然而,DEPTOR在垂體腺瘤中的作用還很不清楚。在此,我們發(fā)現(xiàn)DEPTOR在垂體腺瘤組織中表達下調(diào),尤其是在多巴胺受體激動劑耐藥性泌乳素細胞腺瘤中進一步表達下調(diào)。相應地,DEPTOR的高表達有效抑制垂體瘤細胞系GH3和MMQ細胞的體外和體內(nèi)增殖,并使GH3和MMQ細胞對多巴胺激動劑（DA）卡麥角林（CAB）更敏感。相反,DEPTOR的敲減可促進GH3和MMQ細胞的增殖,并賦予細胞對卡麥角林（CAB）的抗性。在機制上,DEPTOR有效抑制mTOR復合體1（mTORC1）和2（mTORC2）的活性,并誘導垂體腺瘤細胞系的細胞周期阻滯。我們還發(fā)現(xiàn),CAB處理垂體腺瘤細胞后,有效降低E3泛素連接酶βTrCP1表達,導致DEPTOR去泛素化降解減少從而表達水平增加,以此有效抑制mTOR激酶活性。此外,DEPTOR通過增強自噬依賴性細胞死亡來賦予垂體腺瘤細胞對CAB的敏感性。綜上所述,DEPTOR是垂體腺瘤潛在的有效治療靶點。 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

在垂體腺瘤芯片中DEPTOR表達降低Fig.1-1,DEPTORexpressionwasdecreasedinmicroarrayofpituitaryadenoma（A）與正常垂體相比，人類泌乳素細胞腺瘤中的DEPTOR表達降低

上海交通大學醫(yī)學院博士學位論文32正常人垂體和泌乳素細胞腺瘤的基因表達。熱圖顯示正常垂體（n=4）和泌乳素細胞腺瘤（n=5）的前150個差異表達基因，其中，在泌乳素細胞腺瘤中，DEPTOR表達下降了約14.9倍。（B）GSE26966和GSE51618數(shù)據(jù)顯示，人類促性腺激素腺瘤和臨床上無功能腺瘤中DEPTOR表達分別降低。3.2DEPTOR在垂體腺瘤組織中的表達水平用免疫組化方法檢測垂體腺瘤和正常垂體組織中DEPTOR的表達，與芯片數(shù)據(jù)一致，免疫組化分析證實，相對于12個正常垂體組織，82個垂體腺瘤標本中所有亞型的DEPTOR蛋白表達降低（圖1-2A，表1）。DEPTOR表達與82例臨床病理特征的相關(guān)性分析見表2，腫瘤特征及臨床特征見補充表1。結(jié)果顯示，DEPTOR表達與腫瘤大小相關(guān)，但似乎與垂體腺瘤患者的性別、年齡或海綿竇侵襲分期無關(guān)（表2）。此外，我們通過定量實時PCR檢測了垂體瘤組織中DEPTOR的表達，并分析了DEPTOR表達水平與垂體腺瘤進展的相關(guān)性。與<3CM的垂體腺瘤相比，>3CM的垂體腺瘤的DEPTOR表達降低了2.34倍（圖1-2B）。圖1-2DEPTOR在垂體腺瘤組織中的表達情況Fig.1-2,DEPTORexpressionintissuesofpituitaryadenomaADEPTOR在垂體和腫瘤組織中的代表性免疫染色評分。正常垂體組織中DEPTOR的表達較高（得分=3＋），而腫瘤組織中DEPTOR的表達中等（得分=2＋），較低（得分=1＋），或極低/不可檢測（得分=0＋）。比例尺，100μm.；B垂體腺瘤組織中DEPTOR表達的定量實時PCR分析。與小腫瘤（<3cm，n=30）相比，大垂體腫瘤（>3cm，n=21）的DEPTOR表達降低了2.34倍。**p<0.01，***p＜0.001。

敲減和高表達DEPTOR對增殖的影響

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Characterization of Function of Three Domains in Dishevelled-1: DEP Domain is Responsible for Membrane Translocation of Dishevelled-1[J]. Wei Jun PAN, Shu Zhao PANG, Tao HUANG, Hui Yun GUO, Dianqing WU, Lin LI Laboratory of Molecular Cell Biology, Institute of Biochemistry and Cell Biology, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, 320 Yueyang Rd, Shanghai 200031; College of Life Science, Jilin University, Changchun 130061, China. Department of Genetics and Developmental Biology, University of Connecticut Health Center, Farmington, Connecticut 06030, USA..  Cell Research. 2004(04)



本文編號：3601956