雙酚S通過調(diào)節(jié)堿性成纖維細(xì)胞生長因子影響惡性血管瘤細(xì)胞生物學(xué)特性的機(jī)制
發(fā)布時間：2022-01-12 07:15
研究背景血管瘤是常見的良性病變,由中胚層血管組織過度增生引起。血管瘤會給患者帶來沉重的身心負(fù)擔(dān),尤其是對于皮膚病變患者。藥物治療和外科手術(shù)是血管瘤治療的主要方法。但是,仍然有25%的血管瘤患者接受切除手術(shù)后仍存在癥狀。據(jù)報道,約75%–80%的血管瘤患者是女性。女性優(yōu)勢的詳細(xì)原因尚不清楚。據(jù)報道,健康兒童的雌二醇水平低于血管瘤患者。增殖的血管瘤組織中的血清雌二醇水平高于漸開線階段的水平。實驗室研究表明,雌激素可促進(jìn)血管瘤細(xì)胞的體外增殖,這可能取決于某些生長因子并被他莫昔芬抑制。此外,雌激素和VEGF對血管瘤細(xì)胞的增殖具有協(xié)同作用。所有這些數(shù)據(jù)表明,雌激素信號對血管瘤進(jìn)展具有積極作用。血管內(nèi)皮生長因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）是6個配體家族。VEGFA是與內(nèi)皮增殖,遷移和存活相關(guān)的主要生長因子。成纖維細(xì)胞生長因子（Fibroblast growth factor,FGFs）由22個分子組成,與結(jié)構(gòu)相關(guān)。根據(jù)新的命名法,FGF被連續(xù)編號,堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）被...
【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：105 頁
【學(xué)位級別】：博士
【部分圖文】：
BPS觸發(fā)HA細(xì)胞的增殖和細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換將HDEC（A）或CRL-2586（B）細(xì)胞用BPS處理48h，用CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增殖情況；C）用6孔培養(yǎng)板培養(yǎng)（2×l05）細(xì)胞（100nMBPS或不100nMBPS），計數(shù)前2周；D）HDEC細(xì)胞用100nMBPS或不100nMBPS處理24h，細(xì)胞周期為1周流式細(xì)胞術(shù)
第3章雙酚S通過調(diào)節(jié)堿性成纖維細(xì)胞生長因子誘發(fā)血管瘤細(xì)胞惡性變311.2.4BPS可以增加bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA穩(wěn)定性我們進(jìn)一步研究了bFGF上調(diào)的機(jī)制。實驗結(jié)果表明，BPS處理4h后，bFGFmRNA表達(dá)增加，并用啟動子熒光素酶法檢測BPS處理HA細(xì)胞bFGF的啟動子活性。我們的數(shù)據(jù)顯示BPS可以增加HDEC和CRL-2586細(xì)胞中bFGF的啟動子活性（圖4a）。此外，BPS可以增加HDEC細(xì)胞中bFGFmRNA的半衰期（圖4b）。然而，BPS對HDEC細(xì)胞胞質(zhì)和細(xì)胞核等細(xì)胞組分的mRNA分布沒有影響（圖4c）。此外，BPS對HDEC細(xì)胞中bFGF的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性沒有影響（圖4d）。這些結(jié)果提示bFGF可以提高bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA的穩(wěn)定性。圖4bFGF可增加bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA穩(wěn)定性（A）用或不用100nmBPS處理細(xì)胞24小時，用雙熒光素酶法測定bFGF啟動子的熒光素酶活性；（B）用或不用100nmbps處理的HDEC細(xì)胞24小時，用或不用轉(zhuǎn)錄抑制劑Act-D處理指定時間，用qRT-PCR法檢測bFGF的mRNA；（C）用qRT-PCR方法檢測HDEC細(xì)胞胞漿和細(xì)胞核中bFGF的mRNA表達(dá)；D）用或不用100nm-BPS預(yù)處理HDEC細(xì)胞24小時，再用CHX（100μg/ml）處理增加時間，記錄bFGF的表達(dá)（左）并定量分析（右）。**與對照相比p＜0.01。
第4章BPS通過增加HA細(xì)胞中堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）的表達(dá)增加HA細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制41表1BPS誘導(dǎo)bFGF、VEGF、FGFR1表達(dá)（x_±s）組別bFGFVEGFFGFR1對照組1.23±0.151.04±0.121.16±0.13BPS處理組2.14±0.271.85±0.211.95±0.27t值6.1174.6855.114P值0.0250.0130.0222.2.2BPS誘導(dǎo)細(xì)胞增殖MTT測定血管瘤細(xì)胞增殖力情況，第24小時和第36小時BPS處理組較對照組細(xì)胞增值率升高（P<0.05），第72小時BPS處理組較對照組細(xì)胞增值率升高（P<0.01）。說明使用一定濃度的BPS處理細(xì)胞可促進(jìn)其增殖。（表2）表2MTT檢測細(xì)胞增殖率（x_±s）組別24小時（%）36小時（%）72小時（%）對照組136.42±21.47156.26±31.35145.258±38.54BPS處理組174.18±38.06234.19±46.18207.16±50.86t值6.1275.2965.017P值0.0360.0150.0012.2.3細(xì)胞凋亡及活力檢測細(xì)胞在培第72小時根據(jù)制造商的規(guī)程使用凋亡檢測試劑盒進(jìn)行檢測細(xì)胞凋亡情況，BPS處理組較對照組細(xì)胞凋亡率降低（P<0.05），BPS處理組較對照組細(xì)胞活力升高（P<0.05）。通過TUNEL染色檢測凋亡細(xì)胞。比例尺代表100μm。（圖7，表3）圖7細(xì)胞凋亡分析FIG.7apoptosisanalysis
本文編號：3584351
【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
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BPS觸發(fā)HA細(xì)胞的增殖和細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換將HDEC（A）或CRL-2586（B）細(xì)胞用BPS處理48h，用CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增殖情況；C）用6孔培養(yǎng)板培養(yǎng)（2×l05）細(xì)胞（100nMBPS或不100nMBPS），計數(shù)前2周；D）HDEC細(xì)胞用100nMBPS或不100nMBPS處理24h，細(xì)胞周期為1周流式細(xì)胞術(shù)
第3章雙酚S通過調(diào)節(jié)堿性成纖維細(xì)胞生長因子誘發(fā)血管瘤細(xì)胞惡性變311.2.4BPS可以增加bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA穩(wěn)定性我們進(jìn)一步研究了bFGF上調(diào)的機(jī)制。實驗結(jié)果表明，BPS處理4h后，bFGFmRNA表達(dá)增加，并用啟動子熒光素酶法檢測BPS處理HA細(xì)胞bFGF的啟動子活性。我們的數(shù)據(jù)顯示BPS可以增加HDEC和CRL-2586細(xì)胞中bFGF的啟動子活性（圖4a）。此外，BPS可以增加HDEC細(xì)胞中bFGFmRNA的半衰期（圖4b）。然而，BPS對HDEC細(xì)胞胞質(zhì)和細(xì)胞核等細(xì)胞組分的mRNA分布沒有影響（圖4c）。此外，BPS對HDEC細(xì)胞中bFGF的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性沒有影響（圖4d）。這些結(jié)果提示bFGF可以提高bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA的穩(wěn)定性。圖4bFGF可增加bFGF的轉(zhuǎn)錄和mRNA穩(wěn)定性（A）用或不用100nmBPS處理細(xì)胞24小時，用雙熒光素酶法測定bFGF啟動子的熒光素酶活性；（B）用或不用100nmbps處理的HDEC細(xì)胞24小時，用或不用轉(zhuǎn)錄抑制劑Act-D處理指定時間，用qRT-PCR法檢測bFGF的mRNA；（C）用qRT-PCR方法檢測HDEC細(xì)胞胞漿和細(xì)胞核中bFGF的mRNA表達(dá)；D）用或不用100nm-BPS預(yù)處理HDEC細(xì)胞24小時，再用CHX（100μg/ml）處理增加時間，記錄bFGF的表達(dá)（左）并定量分析（右）。**與對照相比p＜0.01。
第4章BPS通過增加HA細(xì)胞中堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）的表達(dá)增加HA細(xì)胞增殖和遷移的機(jī)制41表1BPS誘導(dǎo)bFGF、VEGF、FGFR1表達(dá)（x_±s）組別bFGFVEGFFGFR1對照組1.23±0.151.04±0.121.16±0.13BPS處理組2.14±0.271.85±0.211.95±0.27t值6.1174.6855.114P值0.0250.0130.0222.2.2BPS誘導(dǎo)細(xì)胞增殖MTT測定血管瘤細(xì)胞增殖力情況，第24小時和第36小時BPS處理組較對照組細(xì)胞增值率升高（P<0.05），第72小時BPS處理組較對照組細(xì)胞增值率升高（P<0.01）。說明使用一定濃度的BPS處理細(xì)胞可促進(jìn)其增殖。（表2）表2MTT檢測細(xì)胞增殖率（x_±s）組別24小時（%）36小時（%）72小時（%）對照組136.42±21.47156.26±31.35145.258±38.54BPS處理組174.18±38.06234.19±46.18207.16±50.86t值6.1275.2965.017P值0.0360.0150.0012.2.3細(xì)胞凋亡及活力檢測細(xì)胞在培第72小時根據(jù)制造商的規(guī)程使用凋亡檢測試劑盒進(jìn)行檢測細(xì)胞凋亡情況，BPS處理組較對照組細(xì)胞凋亡率降低（P<0.05），BPS處理組較對照組細(xì)胞活力升高（P<0.05）。通過TUNEL染色檢測凋亡細(xì)胞。比例尺代表100μm。（圖7，表3）圖7細(xì)胞凋亡分析FIG.7apoptosisanalysis
本文編號：3584351
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