結(jié)直腸癌（colorectal cancer,CRC）是一類(lèi)常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,具有高發(fā)病率高和死亡率高的特點(diǎn)。仔細(xì)發(fā)掘結(jié)直腸癌背后的致病因素,改進(jìn)結(jié)直腸癌的預(yù)防、診斷、治療及預(yù)后措施,是研究者們面臨的一大嚴(yán)峻課題。microRNAs（miRNAs）是一類(lèi)長(zhǎng)約19-23nt的單鏈非編碼小RNA。miRNAs主要通過(guò)結(jié)合靶基因的mRNA,抑制mRNA翻譯或者引起mRNA的降解,從而抑制靶基因的表達(dá),影響各種生理病理活動(dòng)。在癌癥發(fā)生時(shí),癌細(xì)胞中多種miRNAs的表達(dá)會(huì)發(fā)生變化,進(jìn)而影響下游靶基因的表達(dá),最終影響癌癥的發(fā)生發(fā)展。研究癌癥中異常變化的miRNAs及其參與癌癥進(jìn)程調(diào)控的機(jī)理,對(duì)于癌癥的研究和治療具有重要的意義。本研究中,我們分別探討了結(jié)直腸癌中兩個(gè)重要的癌癥相關(guān)miRNAs（原癌miRNA miR-181a和抑癌miRNA miR-27b）通過(guò)抑制各自靶基因（抑癌基因SRCIN1和癌基因ATG10）在結(jié)直腸癌血管生成以及在奧沙利鉑耐藥中發(fā)揮作用的機(jī)制,為結(jié)直腸癌血管生成治療以及逆轉(zhuǎn)奧沙利鉑耐藥尋找新的思路。研究?jī)?nèi)容主要分為兩部分。論文第一部分開(kāi)展了miR-181a通過(guò)下調(diào)抑癌基... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：125 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

（A）兩組芯片結(jié)果交集；（B）miR-181下游靶基因功能富集

圖1.2（A）高表達(dá)miR-181a的結(jié)直腸癌患者總生存率更低；（B）14對(duì)結(jié)直腸癌組織中miR-181a含量顯著升高；（C）HT29細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-181a mimic或inhibitor后含量改變；（DE）轉(zhuǎn)染miR-181a mimic的HT29細(xì)胞培養(yǎng)液可以促進(jìn)HUVEC細(xì)胞成環(huán), miR-181a inhibitor的HT29細(xì)胞培養(yǎng)液可以抑制進(jìn)HUVEC細(xì)胞成環(huán)。比例尺：100μm。*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。1.2.2 miR-181a 促進(jìn)體內(nèi)血管生成以上結(jié)果證明miR-181a在體外構(gòu)建的共培養(yǎng)系統(tǒng)中發(fā)揮促進(jìn)血管生成的作用，接下來(lái)在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中繼續(xù)探索過(guò)表達(dá)miR-181a的腫瘤細(xì)胞是否更容易促進(jìn)血管的生長(zhǎng)。首先我們利用慢病毒構(gòu)建了穩(wěn)定高表達(dá)miR-181a的HT29細(xì)胞系,如圖1.3A。同時(shí)我們也檢測(cè)了慢病毒的轉(zhuǎn)染效率，如圖1.3B所示，慢病毒有效的提高了HT29細(xì)胞中miR-181a的表達(dá)水平。

我們將構(gòu)建的穩(wěn)定過(guò)表達(dá)miR-181a的細(xì)胞系與基質(zhì)膠混合后，進(jìn)行裸鼠腋下植瘤。7天之后，取腫瘤進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，相對(duì)于對(duì)照組，miR-181a過(guò)表達(dá)組血紅蛋白含量升高（圖1.4A）。我們提取了移植瘤的RNA，檢測(cè)了miR-181a含量，如圖1.4B所示，感染了miR-181a過(guò)表達(dá)慢病毒組，miR-181a含量升高。圖 1.4(A)移植瘤形態(tài)（n=5）,比例尺：1cm；（B）qPCR 檢測(cè)移植瘤中 miR-181a的含量。***P<0.001


本文編號(hào)：3544846