背景:心肌纖維化是心肌重構(gòu)的主要病理特征。炎癥在心臟重構(gòu)和心力衰竭的發(fā)生中起著重要作用。趨化因子-受體信號是介導(dǎo)免疫細(xì)胞（包括單核/巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞）動(dòng)員和遷移的關(guān)鍵信號通路,在多種炎癥性疾病中發(fā)揮重要的作用。然而,趨化因子受體CXCR2在心肌纖維化及心臟重構(gòu)中的作用仍不清楚。目的:闡明趨化因子受體CXCR2在血管緊張素II（Ang II）誘導(dǎo)的小鼠心肌纖維化和重構(gòu)中的作用及其分子機(jī)制。明確CXCR2是否可作為高血壓性心肌纖維化和重構(gòu)的干預(yù)新靶點(diǎn)。方法:1.動(dòng)物模型建立:采用野生型小鼠（WT,C57BL/6J,8-10周齡）、CXCR2基因敲除（CXCR2 KO）小鼠、骨髓移植嵌合體小鼠及CXCR2選擇性抑制劑SB265610（2mg/kg/day）處理的WT雄性小鼠。應(yīng)用微量緩釋泵灌注Ang II（1000 ng/kg/min）給動(dòng)物1-14天誘導(dǎo)心肌纖維化及重構(gòu)模型。2.體外細(xì)胞趨化及細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):從WT和CXCR2 KO小鼠提取骨髓細(xì)胞并誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞。Transwell遷移實(shí)驗(yàn)觀察趨化因子CXCL1對巨噬細(xì)胞遷移、活化的影響。WT和CXCR2 KO巨噬細(xì)胞與SD大鼠乳...

【文章來源】： 大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
        1.實(shí)驗(yàn)試劑
        2.實(shí)驗(yàn)儀器
    二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和方法
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.CXCR2小鼠基因型鑒定
        3.構(gòu)建骨髓移植嵌合體小鼠
        4.心肌重構(gòu)模型的建立
        5.血壓監(jiān)測
        6.超聲心動(dòng)圖
        7.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取材
        8.組織切片制備及及相關(guān)病理學(xué)染色
        9.RNA提取及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(q PCR)
        10.基因表達(dá)譜(全轉(zhuǎn)錄組)芯片
        11.蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)法測定蛋白表達(dá)
        12.流式細(xì)胞分析
        13.原代心肌細(xì)胞及成纖維細(xì)胞提取
        14.小鼠骨髓巨噬細(xì)胞提取及 Transwell 實(shí)驗(yàn)
        15.成纖維細(xì)胞與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
        16.高血壓心力衰竭患者和正常對照組臨床研究數(shù)據(jù)
        17.人血細(xì)胞流式
        18.酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定檢測 CXCL1 的濃度
        19.統(tǒng)計(jì)方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3541615