研究背景:間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSCs）被廣泛地應(yīng)用于治療肝纖維化�；谕饷隗w與親本細(xì)胞功能的相似,外泌體是一種安全有效的無細(xì)胞試劑,在臨床治療中更加安全有效。目的:本研究的目的是探索人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體（human bone mesenchymal stem cells-derived exosomes,hBM-MSCs-Ex）治療肝纖維化的效果和分子作用機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)中建立了CCl₄誘導(dǎo)8周的大鼠肝纖維化模型,然后注射hBM-MSCs-Ex治療4周,實(shí)驗(yàn)中將人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（human bone mesenchymal stem cells,hBM-MSCs）作為陽性治療組。通過組織病理學(xué)分析,肝功能和檢測炎性細(xì)胞因子表達(dá)驗(yàn)證hBM-MSCs-Ex治療肝纖維化效果。此外,我們通過Western Blot實(shí)驗(yàn)研究了hBM-MSCs-Ex在肝星狀細(xì)胞（Hepatic stellate cells,HSCs）和肝纖維化組織中的抗纖維化機(jī)制,并檢測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:研究結(jié)果表... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

顯微鏡下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)（Bar=100μm）

第3章人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體提取及鑒定55落貼壁生長，傳代后細(xì)胞增殖明顯。圖3.1顯微鏡下人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)（Bar=100μm）3.3.2電鏡下觀察hBM-MSCs-Ex的形態(tài)和結(jié)構(gòu)使用超速離心法從hBM-MSCs成功分離出hBM-MSCs-Ex，新鮮提純的外泌體經(jīng)磷鎢酸著色后，在透射電子顯微鏡鏡下可見直徑不一、雙凹圓盤狀的囊形小泡，囊內(nèi)能夠看到低密度光亮區(qū)；圖3.2透射電子顯微鏡觀察純化的外泌體形態(tài)（Bar=100nm和200nm）

吉林大學(xué)博士學(xué)位論文563.3.3NTA檢測hBM-MSCs-Ex的粒徑分布和濃度運(yùn)用NTA對提取的hBM-MSCs-Ex進(jìn)行粒徑分析發(fā)現(xiàn)，提取出的樣本顆粒直徑多集中于50-100nm之間，峰值在65nm；圖3.3通過納米粒子跟蹤與相應(yīng)視頻幀在流動條件下外泌體的尺寸分布測量。3.3.4WesternBlot鑒定hBM-MSCs-Ex表面標(biāo)志蛋白Westernblotting結(jié)果證實(shí)，分離得到的hBM-MSCs-Ex表達(dá)外泌體特異性標(biāo)志蛋白：CD9、CD63、TSG101和Alix，而不表達(dá)GAPDH；

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Liver-specific gene expression in mesenchymal stem cells is induced by liver cells[J]. Claudia Lange,Philipp Bassler,Michael V. Lioznov,Helge Bruns,Dietrich Kluth,Axel R. Zander,Henning C. Fiegel.  World Journal of Gastroenterology. 2005(29)
[2]Hepatic differentiation capability of rat bone marrow-derived mesenchymal stem cells and hematopoietic stem cells[J]. Sai-Nan Shu Lai Wei Jiang-Hua Wang Yu-Tao Zhan Hong-Song Chen Yu Wang Institute of Hepatology,People’s Hospital,Peking University,Beijing 100044,ChinaGastroenterology Department,Tong-Ren Hospital,Capital Medical University,Beijing 100730,China.  World Journal of Gastroenterology. 2004(19)



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