[研究背景和目的]胃癌是全球最常見的癌癥之一,在我國(guó),胃癌在惡性腫瘤發(fā)病率和病死率中位居第二和第三。近年來,得益于手術(shù)、放療、化療以及靶向治療的改善和突破,胃癌患者治療后的存活率得到一定程度的改善,但五年存活率仍處于較低的水平,因此積極尋找新的胃癌分子標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)、提高胃癌的早期診斷和治療效果是當(dāng)前胃癌研究的重點(diǎn)任務(wù)。CD73是由NT5E基因編碼的被糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定于細(xì)胞膜表面的一種多功能跨膜糖蛋白,是細(xì)胞外嘌呤代謝通路中的限速酶之一。近年來的研究發(fā)現(xiàn)CD73有細(xì)胞外水解酶和非水解酶兩種功能。CD73發(fā)揮水解酶功能可參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、腫瘤新生血管形成、腫瘤免疫逃逸、抑制免疫反應(yīng)等過程。而CD73的非水解酶功能則參與調(diào)控癌細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力。CD73的表達(dá)水平在乳腺癌、結(jié)直腸癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、胃癌和肝癌中都存在異常。然而關(guān)于CD73在胃癌發(fā)生發(fā)展中可能的作用和機(jī)制尚未明確。本研究首先以人胃癌細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,應(yīng)用CD73水解酶活性檢測(cè)、蛋白免疫印跡法（Western Blot）、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、CCK-8實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)等方法研究了CD73特異性抑制劑AP... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

五種細(xì)胞的水解酶活性（**與GES-1相比，P<0.01）

屆博士學(xué)位論文 CD73對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究40圖1-2 五種細(xì)胞的NT5E mRNA相對(duì)表達(dá)量（與GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Figure1-2 Relative expression of NT5E mRNA of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.3 Western blot檢測(cè)五種細(xì)胞CD73蛋白表達(dá)水平Western blot檢測(cè)5種細(xì)胞中CD73蛋白的表達(dá)水平結(jié)果顯示，CD73蛋白在BGC-823（2.300±0.416）和MGC-803（1.450±0.234）中的表達(dá)高于GES-1（1.000±0.000），差異具有顯著性意義（P＜0.05），SGC-7901（1.143±0.353）與GES-1相比差異無顯著性意義（P>0.05），AGS（0.687±0.031）中的CD73蛋白相對(duì)表達(dá)量低于GES-1

屆博士學(xué)位論文 CD73對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究41圖1-3 五種細(xì)胞的CD73蛋白相對(duì)表達(dá)量（與GES-1相比，*P<0.05，**P<0.01）Fig 1-3 Relative expression of CD73 protein of five gastric cell lines（*P<0.05，**P<0.01 vs GES-1）3.4 APCP對(duì)BGC-823細(xì)胞胞外水解酶活性的影響通過從水解酶活性、NT5E mRNA表達(dá)水平和CD73蛋白表達(dá)水平三個(gè)方面，本研究選擇上述四種胃癌細(xì)胞中水解酶相對(duì)活性和CD73表達(dá)水平均最高的BGC-823細(xì)胞作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的模型。濃度為10μM、50μM和100μM的APCP處理BGC-823細(xì)胞24h后，孔雀綠磷酸鹽檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞水解酶活性的變化，結(jié)果顯示，各組細(xì)胞在波長(zhǎng)620nm處的吸光度值分別為APCP(0μM)（0.472±0

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]抑制CD73表達(dá)對(duì)腫瘤細(xì)胞缺血缺氧下增殖的影響[J]. 龔小羽,趙霏,張威,李焱,宋雷.  西北民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(02)
[2]Early gastric cancer frequently has high expression of KKLC-1, a cancer-testis antigen[J]. Nobue Futawatari,Takashi Fukuyama,Rui Yamamura,Akiko Shida,Yoshihito Takahashi,Yatsushi Nishi,Yoshinobu Ichiki,Noritada Kobayashi,Hitoshi Yamazaki,Masahiko Watanabe.  World Journal of Gastroenterology. 2017(46)
[3]慢病毒介導(dǎo)RNA干擾沉默F(xiàn)as基因在臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 王露,翟瑋瑋,楊向榮,王芳,李見,張強(qiáng),李玉云.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(10)
[4]Expression and clinical significance of CD73 and hypoxia-inducible factor-1α in gastric carcinoma[J]. Xiao-Xia Lu,Yi-Tian Chen,Bing Feng,Xiao-Bei Mao,Bo Yu,Xiao-Yuan Chu.  World Journal of Gastroenterology. 2013(12)
[5]APCP對(duì)人胃腺癌細(xì)胞HGC-27生長(zhǎng)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的影響[J]. 馬文平,馬晶,劉寶全,李雪梅,王建堃,張雅芳.  解剖科學(xué)進(jìn)展. 2008(01)

博士論文
[1]CD39/CD73分子在胃腸癌患者中的表達(dá)及臨床意義研究[D]. 張斌.第二軍醫(yī)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3495416