目的在諸多DNA損傷類型中,雙鏈斷裂（double-strand break,DSB）是對(duì)基因組穩(wěn)定性及完整性影響最嚴(yán)重的一種損傷形式。若不能及時(shí)修復(fù)或發(fā)生錯(cuò)誤修復(fù)則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞基因組不穩(wěn)定甚至引起細(xì)胞死亡。正常情況下,經(jīng)典非同源末端連接（classical/canonical non-homologous end-joining,C-NHEJ）是DSB發(fā)生后的主要修復(fù)途徑。當(dāng)該途徑關(guān)鍵因子Ku70缺失后,非經(jīng)典末端連接（alternative end-joining,A-EJ）途徑發(fā)揮替代修復(fù)DSB的作用。A-EJ存在嚴(yán)重錯(cuò)誤傾向,會(huì)導(dǎo)致基因組失穩(wěn),因此該修復(fù)途徑具有高度致癌性,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。近年來多項(xiàng)研究表明,多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1（poly（ADP-ribose）polymerase 1,PARP1）可能在A-EJ途徑中發(fā)揮重要作用。本研究將利用人三陰乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）細(xì)胞構(gòu)建DSB的A-EJ修復(fù)模型,探討PARP1在染色質(zhì)聚集及結(jié)合的變化以及對(duì)A-EJ修復(fù)的影響,明確其與蛋白減數(shù)分裂重組蛋白11（meio... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

WB驗(yàn)證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231及BT-549細(xì)胞后蛋白表達(dá)水平Figure1.1Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231andBT-549cells****P<0.0001

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文32水平的下調(diào)而下調(diào)（圖1.2）。圖1.2WB驗(yàn)證Ku80在感染ad-shKu70后蛋白表達(dá)水平Figure1.2Ku80deficiencyafterinfectionwithad-shKu70（**P<0.01，****P<0.0001）在感染后第7天，免疫熒光檢測(cè)Ku70的表達(dá)水平，可見shKu70組細(xì)胞Ku70的表達(dá)較shNC組顯著降低（圖1.3）。圖1.3免疫熒光驗(yàn)證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231細(xì)胞后蛋白表達(dá)水平Figure1.3Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231cells（**P<0.01）綜上，在Ku70Ad感染后第7天，細(xì)胞內(nèi)Ku70的表達(dá)水平成功顯著下調(diào)，進(jìn)行后續(xù)A-EJ有關(guān)實(shí)驗(yàn)。2.2PARP1等在DSB經(jīng)C-NHEJ修復(fù)中的染色質(zhì)聚集現(xiàn)象

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文32水平的下調(diào)而下調(diào)（圖1.2）。圖1.2WB驗(yàn)證Ku80在感染ad-shKu70后蛋白表達(dá)水平Figure1.2Ku80deficiencyafterinfectionwithad-shKu70（**P<0.01，****P<0.0001）在感染后第7天，免疫熒光檢測(cè)Ku70的表達(dá)水平，可見shKu70組細(xì)胞Ku70的表達(dá)較shNC組顯著降低（圖1.3）。圖1.3免疫熒光驗(yàn)證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231細(xì)胞后蛋白表達(dá)水平Figure1.3Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231cells（**P<0.01）綜上，在Ku70Ad感染后第7天，細(xì)胞內(nèi)Ku70的表達(dá)水平成功顯著下調(diào)，進(jìn)行后續(xù)A-EJ有關(guān)實(shí)驗(yàn)。2.2PARP1等在DSB經(jīng)C-NHEJ修復(fù)中的染色質(zhì)聚集現(xiàn)象


本文編號(hào)：3488141