目的在諸多DNA損傷類型中,雙鏈斷裂（double-strand break,DSB）是對基因組穩(wěn)定性及完整性影響最嚴重的一種損傷形式。若不能及時修復或發(fā)生錯誤修復則會導致細胞基因組不穩(wěn)定甚至引起細胞死亡。正常情況下,經典非同源末端連接（classical/canonical non-homologous end-joining,C-NHEJ）是DSB發(fā)生后的主要修復途徑。當該途徑關鍵因子Ku70缺失后,非經典末端連接（alternative end-joining,A-EJ）途徑發(fā)揮替代修復DSB的作用。A-EJ存在嚴重錯誤傾向,會導致基因組失穩(wěn),因此該修復途徑具有高度致癌性,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。近年來多項研究表明,多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1（poly（ADP-ribose）polymerase 1,PARP1）可能在A-EJ途徑中發(fā)揮重要作用。本研究將利用人三陰乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）細胞構建DSB的A-EJ修復模型,探討PARP1在染色質聚集及結合的變化以及對A-EJ修復的影響,明確其與蛋白減數(shù)分裂重組蛋白11（meio... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

WB驗證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231及BT-549細胞后蛋白表達水平Figure1.1Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231andBT-549cells****P<0.0001

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文32水平的下調而下調（圖1.2）。圖1.2WB驗證Ku80在感染ad-shKu70后蛋白表達水平Figure1.2Ku80deficiencyafterinfectionwithad-shKu70（**P<0.01，****P<0.0001）在感染后第7天，免疫熒光檢測Ku70的表達水平，可見shKu70組細胞Ku70的表達較shNC組顯著降低（圖1.3）。圖1.3免疫熒光驗證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231細胞后蛋白表達水平Figure1.3Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231cells（**P<0.01）綜上，在Ku70Ad感染后第7天，細胞內Ku70的表達水平成功顯著下調，進行后續(xù)A-EJ有關實驗。2.2PARP1等在DSB經C-NHEJ修復中的染色質聚集現(xiàn)象

重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文32水平的下調而下調（圖1.2）。圖1.2WB驗證Ku80在感染ad-shKu70后蛋白表達水平Figure1.2Ku80deficiencyafterinfectionwithad-shKu70（**P<0.01，****P<0.0001）在感染后第7天，免疫熒光檢測Ku70的表達水平，可見shKu70組細胞Ku70的表達較shNC組顯著降低（圖1.3）。圖1.3免疫熒光驗證Ku70腺病毒感染MDA-MB-231細胞后蛋白表達水平Figure1.3Ku70deficiencyafterinfectionwithKu70AdinMDA-MB-231cells（**P<0.01）綜上，在Ku70Ad感染后第7天，細胞內Ku70的表達水平成功顯著下調，進行后續(xù)A-EJ有關實驗。2.2PARP1等在DSB經C-NHEJ修復中的染色質聚集現(xiàn)象


本文編號：3488141