研究背景結直腸癌（colorectal cancer,CRC）是人類癌癥相關性死亡的第二大常見原因,大約有20%的患者在確診時就已有遠處轉移,在疾病進展過程中,有高達60%的患者最終會發(fā)生遠處轉移。血行播散是結直腸癌轉移的主要方式,腫瘤細胞從原發(fā)部位脫落進入血液或淋巴系統(tǒng),成為循環(huán)腫瘤細胞（circulating tumor cells,CTCs）,是腫瘤轉移的關鍵步驟。研究顯示,在腫瘤患者體內,盡管有大量的腫瘤細胞脫離原發(fā)灶至脈管系統(tǒng),成為CTCs,但是絕大部分的細胞會直接死亡或發(fā)生凋亡,僅有一小部分細胞能夠抵抗血流切應力和失巢凋亡的壓力,最終到達靶器官,形成微轉移灶。因此,研究從原發(fā)灶進入循環(huán)系統(tǒng)后,腫瘤細胞如何抵抗血流切應力和失巢凋亡,從而維持存活狀態(tài)的分子機制,有助于我們加深對腫瘤轉移過程的認識。層流切應力（laminar shear stress,LSS）是指血液流動時在血管壁或者細胞表面產(chǎn)生的的摩擦力,是血流動力學的重要參數(shù)。目前流體力學在腫瘤領域的研究仍有待進一步深入,在多項研究中表明LSS對循環(huán)腫瘤細胞的存活具有多種模式的調控作用。既往研究多以LSS促進腫瘤細胞死亡為主... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－２?ｑＰＣＲ?（Ａ）、ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ?（Ｂ）和免疫熒光實驗（Ｃ）檢測結直腸癌細胞ＬｏＶｏ和??ＳＷ４８０經(jīng)切應力刺激后ＡＴＯＨ８表達；紅色：ＡＴＯＨ８；藍色：ＤＡＰＩ；白色箭頭表示ＡＴＯＨ８??入核細胞；比例尺＝５０��；（Ｄ）不同切應力組ＡＴＯＨ８?

?第一章層流切應力感應分子ＡＴ０Ｈ８促進結直腸癌ＣＴＣｓ存活???１．３．２?ＡＴＯＨ８高表達促進ＣＴＣｓ存活??為了探究ＡＴ０Ｈ８升高后對ＣＴＣｓ表型的影響，我們利用慢病毒構建過表達??ＡＴ０Ｈ８穩(wěn)轉細胞株，并分別給予該細胞懸浮培養(yǎng)和切應力刺激的不同處理，然??后進行活細胞／死細胞染色，觀察細胞存活數(shù)目。結果發(fā)現(xiàn)，層流切應力刺激能??顯著增加細胞的死亡率，而過表達ＡＴ０Ｈ８后，則降低了腫瘤細胞的死亡比例，??并具有統(tǒng)計學差異（圖１－３Ｂ）。??Ａ??ｏｅＡＴ〇Ｈ８?＋?－?＋??—??ＬｏＶｏ?ＳＷ４８０??Ｂ??＊＊＊＊?＊＊＊＊??＾４０ｉ?＿＊＊＊＊??ｖ??￡３０?禿?＿—＊＊＊?－ＪＬ－??｜２０．＾?Ｆ?上不：??°?ｉ〇?°?Ｍ?＾??ＬＳ３?＊？－＋＋－－＋?＋??〇？ＡＴＯＨ８?■?＋?－?＋?－?＋?－?＋??［〇Ｖｏ￣?ＳＷ４８０??圖１－３?（Ａ）在無切應力作用（Ｓｔａｔｉｃ）和１０ｄｙｎ／ｃｍ２流體切應力（ＬＳＳ）刺激３０ｍｉｎ后結直腸??癌循環(huán)腫瘤細胞的免疫熒光代表圖；（Ｂ）統(tǒng)計在無切應力作用（Ｓｔａｔｉｃ）和ｌＯｄｙｎ／ｃｍ２流體??切應力（ＬＳＳ）刺激３０ｍｉｎ后結直腸癌循環(huán)腫瘤細胞的死亡率；＊??＜０．００１??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?（Ａ）?Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ?ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?３０?ｍｉｎ?ｏｆ??ｎｏ?ｌａｍｉｎａｒ?ｓｈｅａｒ?ｓｔｒｅｓｓ?（Ｓｔａｔｉｃ）?ａｎｄ?１０?ｄｙｎ／ｃｍ２?（ＬＳＳ）?ｌａｍｉｎａｒ?ｓｈｅａｒ?ｓｔｒｅｓｓ?ｓ

?ｉｓ－?？??？?５?丁??〇?Ｚ?１１０＇?？?？￣??＞?｜?ｉ?ｉ?—??！?！?〇Ｊ￣？Ａ＊?????Ｉ?????Ｉ?ｖｅｃｔｏｒ?ｏｅＡＴＯＨＳ??ｌ?????？二?｜??？?ｒｒ．?、?２．５－１?？＊??００???＊■?？??？??謂Ｈ?毫、ｔ：：：??｜?？、，、?ｉ?ｉ．ｏ．?？？?？￥？??＊?＾??ｉ〇??ｏ．〇Ｊ￣－＾！＝－?．???ｖｅｃｔｏｒ?ｏｅＡＴＯＨ８??圖１４?（Ａ）動物實驗模式圖：尾靜脈注射ＣＴ２６－ＧＦＰ后，分別在第０、４、８小時時間點取小??鼠血做流式凋亡檢測（Ｂ）和活體成像（Ｃ）；經(jīng)尾靜脈注射ＳＷ４８０細胞后２０天取小鼠肺??（Ｄ）及ＨＥ染色代表圖（Ｇ）；分別測量兩組小鼠尾靜脈注射后體重（Ｅ）、肺／體重比??（Ｆ）、肺轉移結節(jié)數(shù)（Ｈ）及直徑（Ｉ）?ｆＰｃ?０．０５；?＊＊Ｐ＜?０．０１；?＊＊＊／？＜?０．００１??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?（Ａ）?Ａｎｉｍａｌ?ｍｏｄｅｌ?ｐａｔｔｅｒｎ：?Ａｆｔｅｒ?ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＣＴ２６－ＧＦＰ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔａｉｌ?ｖｅｉｎ，?ｍｏｕｓｅ?ｂｌｏｏｄ??ｗａｓ?ｔａｋｅｎ?ａｔ?ｔｈｅ?０，４，?ａｎｄ?８?ｈｏｕｒ?ｔｉｍｅ?ｐｏｉｎｔｓ?ｆｏｒ?ｆｌｏｗ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?（Ｂ）?ａｎｄ?ｌｉｖｅｒ?ｉｍａｇｉｎｇ??（Ｃ）．?Ｔｈｅ?ｌｕｎｇ?（Ｄ）?ａｎｄ?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｍａｐｓ?（Ｇ）?ｗｅｒｅ?ｔａｋｅｎ?２０?ｄａｙｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＳＷ４８０?ｃｅｌｌｓ??ｉｎｔｏ?ｔｈ


本文編號：3454375