研究背景:糖尿病及其并發(fā)癥的流行對(duì)全球健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。全球約4.25億成年人患有糖尿病,其中超過90%是2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）。因此,研究糖尿病的發(fā)病機(jī)制、尋找有效的糖尿病控制方法仍然是目前糖尿病相關(guān)研究的重點(diǎn)。肝臟是機(jī)體胰島素和能量代謝調(diào)控的主要靶器官之一,它通過控制糖異生及糖原分解過程控制著肝葡萄糖釋放水平,并以此方式在維持血漿葡萄糖穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。肝臟糖異生紊亂引起葡萄糖輸出異常增加是T2DM重要的病理基礎(chǔ)之一。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指長(zhǎng)度在200個(gè)堿基對(duì)以上但是不具備蛋白質(zhì)編碼功能的RNA。LncRNA在細(xì)胞代謝中主要起調(diào)節(jié)作用,其發(fā)現(xiàn)為研究糖尿病的分子機(jī)制開辟了新領(lǐng)域。研究顯示lncRNA參與了很多調(diào)控糖尿病病理生理的過程,包括影響胰島功能、調(diào)節(jié)肝臟代謝、在脂肪組織中調(diào)節(jié)糖代謝及分化等等,但lncRNA在糖尿病中的相關(guān)研究仍然沒有得到充分重視,目前為止只有少量lncRNA在糖尿病中的異常表達(dá)被檢測(cè)出來,并且僅有更少的lncRNA在糖尿病發(fā)展中的作用得到探究。因此,探討l... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：139 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２?ＨＦＤ喂養(yǎng)的小鼠和ｏｂ／ｏｂ小鼠表現(xiàn)出ＭＥＧ３和ＡＴＦ４上調(diào)，ｍｉＲ－２１４下調(diào)Ｄ?（Ａ）與??５２??

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???３－１?Ｂ?ｃ?１．５－??１?：千！??？?：ｌｌ?１１：１．．．：?Ｉ：：??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??ｃ?２?Ｄ?八二丨—－．．．．．．￣＂Ｊ??．１?１?＊?ｔ?１?－ｆ?Ｔ??ｙ?｜２．?凡二??＾?＊??；??０?２?４?１０?０?２?４?１０??Ｔｉｍｅ?（ｈ）?Ｔｉｍｅ?（ｈ）??圖３棕櫚酸酯時(shí)間依賴性地增加肝細(xì)胞中的ＭＥＧ３和ＡＴＦ４，但降低ｍｉＲ－２１４。采用０．５??ｍＭ棕櫚酸酯處理小鼠原代肝細(xì)胞不同時(shí)間（０、２、４、１０?ｈ）。ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果表明棕櫚酸酯??時(shí)間依賴性地增加（Ａ）ＭＥＧ３表達(dá)和（Ｃ）ＡＴＦ４ｍＲＮＡ表達(dá)，但降低（Ｂ）肝細(xì)胞中ｍｉＲ－２１４??表達(dá)。（Ｄ）?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ表明棕櫚酸酯時(shí)間依賴性地增加肝細(xì)胞中ＡＴＦ４蛋白的表達(dá)。＾？＜０．０５??０?ｈ?ｇｒｏｕｐ。實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。??３．３?ＭＥＧ３可作為ｍｉＲ－２１４的ｃｅＲＮＡ來上調(diào)ＡＴＦ４的表達(dá)??為了研宄ＭＥＧ３表達(dá)對(duì)ｍｉＲ－２１４和ＡＴＦ４表達(dá)的影響，通過分別用??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３或ｓｉ－ＭＥＧ３轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞來過表達(dá)或敲低ＭＥＧ３。ｑＲＴ－ＰＣＲ證實(shí)??ＭＥＧ３的過表達(dá)和敲低效率（圖４Ａ）。ＭＥＧ３過表達(dá)下調(diào)ｍｉＲ－２１４表達(dá)，但上調(diào)??ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表達(dá)。相反，ＭＥＧ３敲低可顯著上調(diào)ｍｉＲ－２１４表達(dá)，但下??調(diào)ＡＴＦ４的ｍＲＮＡ和蛋白表達(dá)（圖４Ｂ－４Ｄ）。接下來，我們探討了?ｍｉＲ－２１４的表??５４??

?山東大學(xué)博士學(xué)位論文???達(dá)對(duì)ＭＥＧ３和ＡＴＦ４表達(dá)的影響。ｑＲＴ－ＰＣＲ證實(shí)了?ｍｉＲ－２１４的過表達(dá)和敲低效??率（圖４Ｅ）。結(jié)果表明，與相應(yīng)的對(duì)照相比，ｍｉＲ－２１４ｍｉｍｉｃ顯著下調(diào)ＭＥＧ３和??ＡＴＦ４表達(dá)水平，而ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ顯著上調(diào)ＭＥＧ３和ＡＴＦ４的表達(dá)水平（圖??４Ｆ－４Ｈ）。??ＡＴＦ４?１???１??Ａｃｔｉｎ?｜?ｍｍｍ?ｗｉｗｗ?｜??Ａ?１０－．?＊?？?ｇ?２．５－｜?Ｃ?３－ｊ?〇?＾?２．〇ｉ??ｉ：?ａ?��；：?｜ｔ＾?ｉ?卜．｜??ｉＨｊｋｕＵｔｊＭｉｉ??／?／?／?／?／（，／＂／／?＂?／?／??ＡＴＦ４?｜?－??Ｅ?Ａｃｔｉｎ?｜ｉＷ—？?ｍｍｍ?＇ｍｒｎｍ＾?｜??ｉＬｌｊＬｉｊＬｉｊＬｌ??＂／＊＜／??／?／?／?／?／?／?，，??圖４?ＭＥＧ３和ｍｉＲ－２１４過表達(dá)和敲低對(duì)原代肝細(xì)胞中ＡＴＦ４表達(dá)的影響。川??ｐｃＤＮＡ３．１－ＭＥＧ３、ｓｉ－ＭＥＧ３和相應(yīng)對(duì)照，以及ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ／ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ和相應(yīng)對(duì)照轉(zhuǎn)染小??鼠原代肝細(xì)胞。（Ａ）通過ｑＲＴ－ＰＣＲ確認(rèn)ＭＥＧ３的過表達(dá)和敲低效書。ｑＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ??ｂｌｏｔ結(jié)果表明，ＭＥＧ３過表達(dá)下調(diào)（Ｂ）?ｍｉＲ－２１４表達(dá)，但增加ＡＴＦ４的（Ｃ）?ｍＲＮＡ和（Ｄ）??蛋白的表達(dá)。ＭＥＧ３敲低發(fā)揮相反作用。（Ｅ）?ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果表明ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ增加了??ｍｉＲ－２１４?的表達(dá)，而?ｍｉＲ－２１４?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?減少了?ｍｉＲ－２１４?的表達(dá)。ｑＲＴ－ＰＣＲ?和?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?結(jié)??果表明，ｍｉＲ－２１４?ｍｉｍｉｃ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]長(zhǎng)鏈非編碼RNA-Co7Rik的表達(dá)特征及其對(duì)糖異生的影響[J]. 張凡,崔縣偉,袁雪雯,孫春濤,朱子陽(yáng),顧威,周亞慧,孫亞洲,劉倩琦.  中華內(nèi)分泌代謝雜志. 2016 (11)
[2]mTOR/S6K1信號(hào)通路與有氧運(yùn)動(dòng)改善小鼠高脂飲食誘導(dǎo)胰島素抵抗間的關(guān)系[J]. 苑紅,牛燕媚,劉彥輝,蘇照鵬,李慧閣,姜寧,傅力.  中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2009(04)

碩士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子Nrf2對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)小鼠肝臟胰島素抵抗的影響及機(jī)制[D]. 倪陣.第四軍醫(yī)大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3424937