帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一種多發(fā)于中老年的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,以運(yùn)動(dòng)不能、肌僵直、靜止性震顫及姿勢反射障礙為特征性表現(xiàn),其病理學(xué)特征是中腦黑質(zhì)致密帶多巴胺能神經(jīng)元脫失,紋狀體多巴胺（dopamine,DA）釋放減少。研究顯示遺傳因素、環(huán)境因素和氧化應(yīng)激等可能參與PD的發(fā)病,但其發(fā)病機(jī)制并不明確。腦內(nèi)高鐵導(dǎo)致黑質(zhì)-紋狀體系統(tǒng)DA能神經(jīng)元功能的損傷已成為越來越受到神經(jīng)科學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)問題。目前PD鐵沉積的研究主要集中在DA能神經(jīng)元,實(shí)際上腦內(nèi)多種膠質(zhì)細(xì)胞在鐵穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中也發(fā)揮重要作用。星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)鐵有極高的耐受能力,鐵負(fù)載時(shí),神經(jīng)元、小膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞鐵沉積,而星形膠質(zhì)細(xì)胞卻在同樣的情況下沒有鐵的沉積。本室前期研究顯示,6-OHDA激活神經(jīng)元鐵調(diào)節(jié)蛋白（iron regulatory protein,IRP1）,使二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（divalent metal transporter1,DMT1）上調(diào),鐵轉(zhuǎn)出蛋白Ferroportin1（FPN1）下調(diào),鐵轉(zhuǎn)入加快,鐵轉(zhuǎn)出減慢,導(dǎo)致鐵的沉積。6-OHDA激活星形膠質(zhì)細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子-2α（h... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

Transwell工作示意圖

材料與方法11檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)體系，星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的Fe2+，實(shí)驗(yàn)一處理方法如下：10μM6-OHDA分別預(yù)孵育原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元24h,1mMFAC孵育原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，上下室同時(shí)更換為原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元的培養(yǎng)基，將上室放置下室的孔板中共培養(yǎng)30min，檢測原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中Fe2+的含量。如圖所示：圖2實(shí)驗(yàn)一干預(yù)示意圖具體分組如下：單共培養(yǎng)組（AS/N）：星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)30min;星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)30min；6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，與VM神經(jīng)元共培養(yǎng)30min；6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，下上室共培養(yǎng)30min；FAC處理星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+FAC/N）：1MmFAC處理星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，與VM神經(jīng)元共培養(yǎng)30min；FAC處理星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，1mMFAC星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，上下室共培養(yǎng)30min；

青島大學(xué)博士學(xué)位論文12FAC處理6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA+FAC/N）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，1mMFAC處理6-OHDA預(yù)孵育的星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，與VM神經(jīng)元共培養(yǎng)30min。FAC處理6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA+FAC/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，1mMFAC處理6-OHDA預(yù)孵育的星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，上下室共培養(yǎng)30min。實(shí)驗(yàn)二處理方法如下：10μM6-OHDA分別預(yù)孵育原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和原代培養(yǎng)的中腦背腹側(cè)神經(jīng)元24h,1mMFAC孵育原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞30min，上下室同時(shí)更換為原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元的培養(yǎng)基，將上室放置下室的孔板中共培養(yǎng)30min，檢測原代培養(yǎng)的VM神經(jīng)元中Fe2+的含量。如圖所示：圖3實(shí)驗(yàn)二干預(yù)示意圖具體分組如下：單共培養(yǎng)組（AS/N）：星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)共培養(yǎng)30min;星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)30min；6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA/N）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，與VM神經(jīng)元共培養(yǎng)30min；6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞和6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS+6-OHDA/N+6-OHDA）：10μM6-OHDA預(yù)孵育星形膠質(zhì)細(xì)胞24h，10μM6-OHDA預(yù)孵育VM神經(jīng)元24h，下上室共培養(yǎng)30min；星形膠質(zhì)細(xì)胞和FAC處理VM神經(jīng)元共培養(yǎng)組（AS/N+FAC）：1MmFAC處

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]低氧誘導(dǎo)因子對(duì)鐵代謝的調(diào)節(jié)（英文）[J]. 許曼曼,王俊,謝俊霞.  生理學(xué)報(bào). 2017(05)



本文編號(hào)：3424062