腫瘤惡病質（Cancer cachexia,CC）是一種代謝性多因素不可逆綜合征。其主要特征是體重損失,特別是骨骼肌和脂肪的消耗。骨骼肌損失導致腫瘤惡病質患者行動障礙、對癌癥治療的耐受性降低,同時也增加了并發(fā)癥和死亡率。相反,研究報道通過保存骨骼肌質量可延長腫瘤惡病質患者的生存期。此外,2011年多國專家在形成《腫瘤惡病質的定義與分類—國際共識》,對腫瘤惡病質進行重新定義,也強調骨骼肌萎縮對腫瘤惡病質發(fā)病的重要性。然而,迄今為止還沒有有效藥物用于臨床治療腫瘤惡病質所致的骨骼肌萎縮。課題組前期進行了腫瘤惡病質生物標志物的臨床研究,發(fā)現代謝改變不僅是腫瘤惡病質的重要特征,也提示代謝性生物標志物的關鍵限制性代謝酶表達/活性異常是腫瘤惡病質重要特征,可作為腫瘤惡病質的藥物干預靶點。進一步研究表明腫瘤惡病質骨骼肌萎縮與支鏈氨基酸（Branched chain amino acid,BCAA）代謝過程密切相關。BCAA的限制性不可逆代謝酶是支鏈α-酮酸脫氫酶復合物（Branched-Chain alpha-keto acid dehydrogenase complex,BCKDC）。預實驗研究發(fā)現... 

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苦參堿改善腫瘤惡病質小鼠脾臟及附睪脂肪的狀況

上海交通大學博士學位論文253.7.苦參堿改善骨骼肌質量減輕和肌纖維尺寸骨骼肌損失是腫瘤惡病質最典型特征。在本研究中，相對于正常小鼠，腫瘤惡病質小鼠后期活動明顯減少，動物處死后，稱量腓腸肌和脛骨前肌質量，發(fā)現兩種骨骼肌均發(fā)生明顯減少（約為-34%），CT26腫瘤惡病質小鼠腹腔注射苦參堿治療后，相比于惡病質對照小鼠，其腓腸肌質量增加30%，脛骨前肌質量增加32%（圖2-6）。骨骼肌主要由肌纖維組成，骨骼肌纖維尺寸變化是衡量肌萎縮的重要指標之一。HE染色結果表明，腫瘤惡病質小鼠肌纖維排列松散，橫截面積顯著小于正常組。并且肌纖維間出現較多藍染（圖2-7A）。這些結果表明腫瘤惡病質動物肌肉內存在嗜堿性炎癥浸潤，同時肌纖維也發(fā)生萎縮。肌纖維橫截面積統計結果表明，相比于正常動物腓腸肌肌纖維橫截面積最廣泛分布的500~800μm2，惡病質小鼠肌纖維面積主要分布于200~400μm2（圖2-7B），下降十分明顯。惡病質小鼠采用苦參堿處理后，骨骼肌尺寸有顯著恢復，相對于腫瘤惡病質小鼠，苦參堿處理可使肌纖維平均尺寸增加近70%（圖2-7C）。圖2-6苦參堿抑制CT26腫瘤惡病質誘導的小鼠骨骼肌質量損失###p＜0.001相比于正常對照組；**p＜0.01，***p＜0.001相比于腫瘤惡病質組。Fig.2-6MatrineinhibitesCT26cancercachexia-inducedweightlossofmiceskeletalmusclemass.###p＜0.001vs.NC.**p＜0.01,***p＜0.001vs.CC.

上海交通大學博士學位論文26圖2-7苦參堿改善腫瘤惡病質小鼠骨骼肌纖維尺寸（A）腓腸肌纖維HE染色（橫切）；（B）腓腸肌纖維橫截面積分布；（C）腓腸肌纖維橫截面積的平均值。###p＜0.001相比于正常對照組；***p＜0.001相比于腫瘤惡病質組。Fig.2-7MatrineimprovesskeletalmusclefibersizeinCT26cancercachexiamice.(A)H&Estainingofmiceskeletalmusclefibers(crosssections).(B)Distributionofmicegastrocnemiusmusclefiberscross-sectionalarea.(C)Averagecross-sectionalareaofgastrocnemiusmusclefibers.###p＜0.001vs.NC.***p＜0.001vs.CC.3.8.苦參堿抑制腫瘤惡病質小鼠骨骼肌中E3泛素連接酶表達E3泛素連接酶表達增加是導致腫瘤惡病質骨骼肌蛋白降解主要因素。在本研究中，PCR結果表明，相比與正常小鼠，CT26腫瘤惡病質動物腓腸肌及脛骨前肌中兩種E3泛素化連接酶MuRF1及MAFbxmRNA表達均上調約9-20倍（如圖2-8A）。苦參堿處理后，這兩者顯著下降，雖然動物個體間存在差異，但苦參堿的作用仍然顯著（p＜0.05）�？鄥A給藥組小鼠，腓腸肌中MuRF1和MAFbx降低數倍至較低水平。Westernblot檢測結果同樣表明，惡病質小鼠腓腸肌中MuRF1及MAFbx均上調6倍左右（如圖2-8B和2-8C），苦參堿處理后，兩者下降顯著（p＜0.05），下降趨勢與其mRNA表達結果一致。另外，對小鼠腓腸肌進行免疫熒光染色，分別染色肌球蛋白重鏈蛋白（Myosinheaveychain，MHC）和MuRF1，實驗結果表明，相比于正常組，CT26惡病質小鼠腓腸肌中MHC（綠色）表達顯著降低，而MuRF1（紅色）表達明顯較正常組高（圖2-8D）�？鄥A處理均可逆轉兩者表達在腓腸肌中的表達情況。另外，本研究也表明苦參堿對正常小鼠腓腸肌

【參考文獻】：
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本文編號：3408273