糖鞘脂（Glycosphingolipid,GSL）是一類廣泛分布在脊椎動(dòng)物細(xì)胞和體液中,由頭部糖鏈結(jié)構(gòu)與尾部脂質(zhì)神經(jīng)酰胺連接組成的具有水脂雙親性的生物大分子。它是細(xì)胞黏附、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、血管生成、炎癥反應(yīng)、維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)等諸多細(xì)胞活動(dòng)的重要參與者,被認(rèn)為是“細(xì)胞社會(huì)學(xué)”中重要的一類分子,因而單個(gè)細(xì)胞中的糖鞘脂組分是高度動(dòng)態(tài)的,并與細(xì)胞的發(fā)育和細(xì)胞微環(huán)境密切相關(guān)。GSL的分析方法學(xué)是深入認(rèn)識(shí)GSL生物學(xué)功能與研究GSL與疾病之間關(guān)系的基礎(chǔ)。肝癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,在惡性腫瘤死亡順位中占第2位。在我國(guó),90%的肝癌是肝細(xì)胞癌（Human Hepatocellular carcinoma,HCC）。本論文首先使用本實(shí)驗(yàn)室已建立的凝集素芯片檢測(cè)GSL糖鏈技術(shù),分析了人正常肝細(xì)胞系（HL-7702）和具有低轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系（MHCC97L）及具有高轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系（MHCC97H和HCCLM3）中GSL糖鏈結(jié)構(gòu)的表達(dá)譜,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組（HL-7702細(xì)胞）相比,有27種凝集素（例如ECA、GSL-I和DSA）所特異識(shí)別的糖鏈結(jié)構(gòu)在HCC細(xì)胞GSL中的表達(dá)有顯著差... 

【文章來(lái)源】：西北大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：166 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

糖鞘脂合成通路示意圖

—N-糖鏈、O-糖鏈、糖胺聚糖、GSL相關(guān)糖鏈、以及游離寡糖[91]（圖1-2）。圖1-2 糖組學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容Figure 1-2 Contents of glycomics在尋找疾病物標(biāo)志物的探索歷程中，研究人員發(fā)現(xiàn)，與經(jīng)典的蛋白組學(xué)研究相比，與糖組學(xué)研究相關(guān)的糖綴合物作為疾病生物標(biāo)志物具有更多的優(yōu)勢(shì)[91]。全方位的蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，即便有已知的特征明顯的生物標(biāo)志物，它也很難被質(zhì)譜鑒定出來(lái)，因?yàn)槠湓谏矬w內(nèi)表達(dá)水平太低[92]。上述結(jié)論表明，與蛋白質(zhì)作為生物標(biāo)志物相比，糖相關(guān)的生物標(biāo)志物在生物體內(nèi)的含量更加豐富，因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)相同的糖鏈可以附著于幾種不同的蛋白質(zhì)上，從而增加了糖鏈結(jié)構(gòu)的總濃度并且簡(jiǎn)化了糖相關(guān)生物標(biāo)志物檢測(cè)。然而，具有特定糖鏈譜（在結(jié)構(gòu)和聚糖附著位點(diǎn)方面）的糖蛋白也可能比單獨(dú)的糖鏈提供特異性更高的生物標(biāo)志物。

PSA PSA 前列腺癌 診斷、病情監(jiān)測(cè)、復(fù)發(fā)檢測(cè)β-hCG β-hCG 婦科相關(guān)癌癥 病情監(jiān)測(cè)1.5 前期研究基礎(chǔ)在前期研究中，本實(shí)驗(yàn)室成熟的凝集素芯片技術(shù)平臺(tái)在細(xì)胞、組織、血清、唾液等生物樣本的糖蛋白糖鏈譜的研究工作上取得了諸多進(jìn)展[122-127]。因此，根據(jù)凝集素芯片技術(shù)的基礎(chǔ)，結(jié)合其分析各種生物樣本中糖蛋白糖鏈的特點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)建立了以凝集素芯片技術(shù)分析 GSL 糖鏈譜方法[11,128]。該方法以鞘脂神經(jīng)酰胺脫酰基酶（sphingolipid ceramide N-deacylase，SCDase）對(duì) GSL 進(jìn)行初步處理（見(jiàn)圖 1-3），使GSL 分子在增強(qiáng)親水性的同時(shí)可以被熒光染料 Cy3 所標(biāo)記，并使用神經(jīng)節(jié)苷脂 GM1a作為標(biāo)準(zhǔn) GSL 樣品，對(duì)凝集素芯片檢測(cè) GSL 糖鏈的、最佳上樣濃度、封閉緩沖液成分、孵育緩沖液成分，以及熒光標(biāo)記后 Lyso-GM1a 的純化柱的選擇等實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行探索和確定，最終建立了一套可靠的使用凝集素芯片技術(shù)研究 GSL 糖鏈譜的技術(shù)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]膀胱癌臨床血清樣本N-連接糖鏈的表達(dá)分析[J]. 王雯雯,孫承文,楊剛龍,關(guān)鋒.  生物學(xué)雜志. 2017(05)
[2]糖鞘脂分析技術(shù)及相關(guān)疾病研究進(jìn)展[J]. 杜昊騏,于漢杰,賈麗苑,李錚.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2016(01)
[3]糖類相關(guān)基因芯片的設(shè)計(jì)與制備[J]. 陳聞天,劉晨,于漢杰,顏樺,王岸瀟,陳超,李錚.  中國(guó)科學(xué):化學(xué). 2010(05)
[4]凝集素芯片技術(shù)檢測(cè)糖蛋白方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 簡(jiǎn)強(qiáng),于漢杰,陳超,李錚.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(02)
[5]痘苗病毒寡核苷酸檢測(cè)芯片的設(shè)計(jì)及研制[J]. 王艷,馬文麗,毛向明,吳清華,李凌,王洪敏,肖維威,鄭文嶺.  第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2004(02)

博士論文
[1]肝癌發(fā)生發(fā)展中糖蛋白糖鏈合成通路和糖結(jié)合蛋白表達(dá)定位的研究[D]. 鐘耀剛.西北大學(xué) 2016
[2]肝細(xì)胞癌患者血清糖蛋白質(zhì)組及其糖鏈結(jié)構(gòu)研究[D]. 楊剛龍.西北大學(xué) 2013

碩士論文
[1]基于凝集素芯片技術(shù)分析糖鞘脂糖鏈譜方法的建立與應(yīng)用[D]. 杜昊騏.西北大學(xué) 2016
[2]肝纖維化小鼠模型糖相關(guān)基因表達(dá)與糖鏈結(jié)構(gòu)整合分析[D]. 于漢杰.西北大學(xué) 2014
[3]糖類相關(guān)基因芯片的設(shè)計(jì)與制備[D]. 陳聞天.西北大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3343922