細胞色素P450 4s（CYP4s）,在人體多個器官有表達,能通過羥化作用將體內(nèi)花生四烯酸（AA）代謝為脂肪酸20-羥基二十碳四烯酸（20-HETE）。CYP4s表達或活性改變可引起機體20-HETE量的變化。有研究認為,20-HETE可能作用影響血壓調(diào)節(jié)的不同部位。20-HETE既是非常有效的血管收縮劑,它也能促進腎近曲小管和髓袢升支粗段的尿鈉排泄,抑制鈉重吸收而起到降血壓作用。CYP4s是否有效調(diào)節(jié)血壓且通過20-HETE,其效果及機制目前并不清楚。本課題為探索CYP4s促血壓調(diào)節(jié)的效果及機制,且是否可能經(jīng)20-HETE實現(xiàn)。為選擇可能與原發(fā)性高血壓（EH）更相關的CYP4s,首先考察了中國南方漢族EH人群與CYP4s家族中CYP4A11、CYP4F12、CYP4F2、CYP4F3及相關泛素連接酶Cullin3（CUL3）和Kelch樣家族成員3（KLHL3）多個單核苷酸多態(tài)性（SNP）的相關性;最后發(fā)現(xiàn)CYP4A11、CYP4F3及CUL3和KLHL3有顯著影響EH發(fā)病的SNPs,可能顯著增加EH致病風險的有CYP4A11,故選其做目標酶深入考察,并通過動物、動物器官和細胞實驗等... 

【文章來源】：華南理工大學廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：165 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

動脈環(huán)的肌動描記器[184]

華南理工大學博士學位論文32Figure2-1ElectrophoresispeakpatternofiMLDRtests(Orangepeakissizestandard)圖2-2iMLDR檢測的電泳峰型（橙色峰是尺寸標準，見箭頭）2.4.5DNA位點SNPs與高血壓關聯(lián)性分析本實驗針對DNA樣本檢測出的SNPs的等位基因表達結果，與試驗對象進行高血壓的關聯(lián)性分析，其結果如下列表所示：其中CYP4s家族的CYP4A11基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-3至表2-6；CYP4F12基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-7至表2-10；CYP4F2基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-11至表2-14；CYP4F3基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-15至表2-18；而泛素化酶CUL3基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-19與表2-20，KLHL3基因多態(tài)性與EH關聯(lián)性分析見表2-21與表2-22。表2-3CYP4A11rs1126742多態(tài)性在高血壓患者和正常血壓組的分布頻率Table2-3DistributionfrequencyofCYP4A11rs1126742polymorphisminEHandnormotensivegroupCYP4A11rs1126742EHNormotensivePOR(95%CI)（T/C）nnFulldatasetAlleleT401402C1191220.8841.023(0.767-1.364)GenotypeTT1511501.000TC991020.8561.037(0.726-1.482)CC10101.0001.007(0.407-2.489)MAlleleT211212C51540.8281.054(0.687-1.616)GenotypeTT83801.000TC45520.5221.199(0.725-1.984)C310.6210.346(0.035-3.394)FAlleleT190190C68681.0001.000(0.676-1.479)GenotypeTT68701.000TC54500.6990.899(0.541-1.497)CC790.7941.249(0.440-3.543)

華南理工大學博士學位論文48CYP4A11小鼠同源性酶的考察目標。本部分主要探討與人CYP4A11有79%同源性的小鼠Cyp4a10酶[236]對C57BL6/J小鼠血壓的影響，來分析探討CYP4s在實驗動物中對高血壓產(chǎn)生的影響。3.2材料、試劑與儀器3.2.1實驗對象（1）雄性eNOS(-/-)小鼠(一種轉基因小鼠：通過近交系自然變異法將C57BL/6J小鼠eNOS酶敲除，SPF級)，8~9周齡，購于廣東省醫(yī)學實驗動物中心，飼養(yǎng)于廣州總醫(yī)院實驗動物中心；（2）C57BL/6J雄性小鼠（野生型小鼠，無特定病原體(SpecificPathogenFree,SPF)級），8~9周齡，購自廣東省醫(yī)學實驗動物中心，飼養(yǎng)于廣州總醫(yī)院實驗動物中心；（3）293T人胚腎細胞，購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫；（4）HEK293人胚腎細胞，購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫。上述兩種細胞均屬于為貼壁依賴型成上皮樣細胞；（5）大腸桿菌E·coliDH5α菌株，購自廣州萊德爾生物科技有限公司；（6）表達載體質(zhì)粒pLVX-IRES-ZsGreen1（圖3-1）；輔助包裝原件載體質(zhì)粒pHelper1.0與pHelper2.0（圖3-2），購自美國Clontech公司。圖3-1質(zhì)粒plvx-ires-zsgreen1序列與多克隆位點Figure3-1PlasmidpLVX-IRES-ZsGreen1sequenceandpolyclonalloci

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]5-HT對糖尿病小鼠胰腺和腸系膜動脈功能的調(diào)節(jié)作用機制研究[D]. 高玉芳.浙江大學 2017
[2]鹽敏感性高血壓大鼠eNOS、iNOS表達與心、腎細胞凋亡的關系[D]. 黃幸.山西醫(yī)科大學 2011



本文編號：3339222