發(fā)布時(shí)間：2021-06-06 06:18

　　研究背景肝癌是目前世界范圍內(nèi)癌癥死亡的主要原因之一,亞洲發(fā)病率最高,中國(guó)新發(fā)肝癌占世界新發(fā)肝癌的50.5%。MiRNA（microRNA）是一種小的非編碼RNA,已經(jīng)作為基因表達(dá)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)RNA出現(xiàn),其作用是通過(guò)靶向mRNA進(jìn)行翻譯抑制或失穩(wěn)。機(jī)械壓力應(yīng)答miRNA在心血管系統(tǒng)疾病中已經(jīng)得到了廣泛的研究,然而,miRNA在肝癌壓力微環(huán)境中對(duì)肝癌發(fā)展所起到的作用尚未有研究,壓力對(duì)肝癌的病理生理學(xué)作用也未有報(bào)道。目的在最佳壓力加載條件下通過(guò)芯片篩選差異表達(dá)的miRNAs和mRNAs。經(jīng)過(guò)生物信息學(xué)分析找出并驗(yàn)證壓力應(yīng)答miRNA及其預(yù)測(cè)靶基因,通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探索靶基因所在信號(hào)通路及壓力和壓力應(yīng)答miRNA對(duì)通路蛋白表達(dá)的影響,通過(guò)裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)及對(duì)肝癌臨床樣本的檢測(cè)再次驗(yàn)證壓力應(yīng)答miRNA及其靶基因在機(jī)械壓力作用下的肝癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移中所起到的作用。方法1細(xì)胞培養(yǎng):（1）肝癌細(xì)胞2D培養(yǎng):細(xì)胞系HepG2,Huh-7,MHCC97H,HL-7702的培養(yǎng)條件:10%的胎牛血清（FBS,fatal bovine serun）配于高糖培養(yǎng)基（DMEM,Dulbecco’s Modified E... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：146 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

Flexcell-5000C三維培養(yǎng)細(xì)胞加壓系統(tǒng)

學(xué)位論文結(jié) 果癌細(xì)胞的 3D 培養(yǎng)將肝癌細(xì)胞系 HepG2、Huh-7 通過(guò) 3D 細(xì)胞基質(zhì)膠進(jìn)D 培養(yǎng)和 2D 培養(yǎng)肝癌細(xì)胞進(jìn)行拍照。二維培養(yǎng)細(xì)胞貼生長(zhǎng)，Huh-7 形狀不規(guī)則。三維培養(yǎng)細(xì)胞呈球狀，在

圖 1-4. 不同時(shí)間點(diǎn)壓力值讀數(shù)變化 加壓裝置對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的影響 HepG2 和 Huh-7 細(xì)胞分別接種于 10 塊 96 棟培5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)培養(yǎng)，另外 5 塊放入加壓裝置為 5 天，每天常規(guī)培養(yǎng)組和密閉培養(yǎng)組各取出 1 錄肝癌細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)量（各個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)的樣本-5，HepG2 細(xì)胞和 Huh-7 細(xì)胞在常規(guī)培養(yǎng)和密閉點(diǎn)兩組細(xì)胞數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。B

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mi R-9a-5p regulates proliferation and migration of hepatic stellate cells under pressure through inhibition of Sirt1[J]. Feng Qi,Jiang-Feng Hu,Bao-Hai Liu,Chao-Qun Wu,Hong-Yu Yu,Ding-Kang Yao,Liang Zhu.  World Journal of Gastroenterology. 2015(34)
[2]整合素激活FAK介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑研究進(jìn)展[J]. 劉紅巖.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè)). 2000(01)



本文編號(hào)：3213785