近年來,DNA損傷反應（DNA damage response,DDR）和DNA修復機制已成為開發(fā)癌癥治療新方法的熱門靶點。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（poly[ADP-ribose]polymerase,PARP）家族成員PARP1和PARP2是重要的DNA損傷分子感受器�；罨腜ARP1/2催化ADP-核糖（ADP-ribose）單元從煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）轉(zhuǎn)移至受體蛋白,進而啟動DNA單鏈斷裂（single-strand break,SSB）的修復,并調(diào)控DNA雙鏈斷裂（double-strand break,DSB）的修復以及DNA復制叉（replication fork）的穩(wěn)定和重啟。因此,PARP1/2在維持基因組穩(wěn)定性以及細胞正常生命活動中起著非常重要的作用。PARP抑制劑是第一種成功利用“合成致死”（synthetic lethality）概念獲得批準在臨床使用的抗癌藥物。臨床數(shù)據(jù)表明PARP抑制劑對存在同源重組介導的修復（homologous recombination-directed repair,HDR）功能缺陷的腫瘤（如BRCA1或... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：119 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮寫對照表
第一章 前言
    1.1 腫瘤與治療
        1.1.1 腫瘤簡介
        1.1.2 腫瘤治療
    1.2 DNA損傷應答
    1.3 DNA損傷與修復
    1.4 DDR與合成致死
    1.5 PARP生物學作用
        1.5.1 PARP參與DNA單鏈斷裂損傷修復
    1.6 PARP抑制劑合成致死作用機理
        1.6.1 PARP抑制劑靶向BRCAness癌細胞的合成致死作用
        1.6.2 PARP抑制劑作為化療藥物的增敏劑
        1.6.3 PARP-DNA復合物的捕獲(PARP Trapping)機制
    1.7 PAPR抑制劑研究進展
    1.8 PARP抑制劑展望
    1.9 土木香內(nèi)酯
    1.10 本文研究內(nèi)容及意義
        1.10.1 研究意義
        1.10.2 研究內(nèi)容
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株與載體
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器與耗材
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 細胞支原體檢測
        2.2.3 基因Knock down載體構(gòu)建
        2.2.4 基因編輯細胞系的篩選
        2.2.5 蛋白免疫印跡
        2.2.6 細胞增殖檢測
        2.2.7 藥物聯(lián)合指數(shù)CI值計算
        2.2.8 細胞免疫熒光染色
        2.2.9 細胞復制與損傷檢測
        2.2.10 彗星電泳實驗
        2.2.11 細胞內(nèi)活性氧檢測
        2.2.12 同源重組功能檢測
        2.2.13 細胞凋亡檢測
        2.2.14 細胞周期檢測
        2.2.15 腫瘤異移植實驗
        2.2.16 免疫組織化學染色
        2.2.17 HE染色
    2.3 溶液與試劑配制
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 土木香內(nèi)酯特異性地在癌細胞中引起DNA氧化損傷并激活PARP
        3.1.1 木香內(nèi)酯引起腫瘤細胞中ROS迅速上調(diào)
        3.1.2 土木香內(nèi)酯引起DNA氧化損傷和DNA斷裂
        3.1.3 土木香內(nèi)酯激活癌細胞中的PARP
    3.2 土木香內(nèi)酯和奧拉帕尼在癌細胞中具有合成致死作用
        3.2.1 土木香內(nèi)酯聯(lián)合奧拉帕尼特異性抑制癌細胞的克隆存活
        3.2.2 土木香內(nèi)酯與奧拉帕尼在癌細胞中具有合成致死作用
        3.2.3 土木香內(nèi)酯未引起同源重組功能異常
    3.3 DNA氧化損傷修復和PARP捕獲是合成致死作用的主要機制
        3.3.1 ROS引起的DNA氧化損傷是合成致死作用的關(guān)鍵因素
        3.3.2 OGG1 介導的BER是 ATL與奧拉帕尼產(chǎn)生協(xié)同細胞毒性的基礎(chǔ)
        3.3.3 PARP捕獲是ATL與奧拉帕尼合成致死作用的主要機制
    3.4 被捕獲的DNA-PARP復合物引起強烈的復制壓力和DSB
        3.4.1 土木香內(nèi)酯與奧拉帕尼聯(lián)合引起DNA復制壓力
        3.4.2 土木香內(nèi)酯與奧拉帕尼聯(lián)合激活DDR
        3.4.3 土木香內(nèi)酯與奧拉帕尼聯(lián)合引起DNA復制阻滯
        3.4.4 土木香內(nèi)酯與奧拉帕尼聯(lián)合在癌細胞中產(chǎn)生DSB
    3.5 DDR的激活導致G2 期阻滯進而觸發(fā)細胞凋亡
        3.5.1 土木香內(nèi)酯和奧拉帕尼引起S和 G2/M期阻滯
        3.5.2 土木香內(nèi)酯和奧拉帕尼聯(lián)合誘發(fā)細胞凋亡
    3.6 ATL和奧拉帕尼聯(lián)合用藥抑制體內(nèi)腫瘤生長
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 討論
    4.2 結(jié)論
參考文獻
作者簡介及科研成果
致謝



本文編號：3195791