一.研究背景及目的子宮內膜異位癥（簡稱內異癥）是婦科常見疾病,大約影響10-15%的生育年齡女性,造成一系列盆腔癥狀,比如月經紊亂、慢性盆腔痛、性交痛及不孕等。子宮內膜異位癥是損害年輕女性生育功能和社會功能的主要原因之一,早期診斷可以提高治療效果,盡早恢復內異癥病人的正常生活。目前診斷的金標準是腹腔鏡手術。由于缺少有效的早期診斷手段,內異癥常被漏診,或者診斷延遲。因此急切需要兼具高特異性和敏感性的無創(chuàng)性子宮內膜異位癥診斷標志物。盡管有大量關于內異癥生物標志物的研究,但沒有一個單獨標志物或一組標志物有足夠的特異性和敏感性可以用于內異癥無創(chuàng)性診斷實驗。對于內異癥標志物的研究主要集中于子宮內膜和血清,只有11%的子宮內膜異位癥標志物的研究與尿液有關。蛋白質組學定量技術是疾病標志物篩選的常用技術之一,能夠對臨床樣品中差異變化蛋白質進行高通量篩選和后期驗證。串聯(lián)質量標簽（TMT）和平行反應監(jiān)測（PRM）分別是非靶向和靶向定量蛋白質組學的代表技術。本課題采用TMT-PRM技術篩查策略,對卵巢內異癥癥的尿液標本進行全面的蛋白質組學分析,通過與正常人、卵巢良性腫瘤、卵巢惡性腫瘤對比,來尋找兼具高特異性... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
    參考文獻
第一部分 基于TMT技術對卵巢子宮內膜異位癥尿液標本差異蛋白的篩查
    材料與方法
        一、實驗材料
            1. 標本來源
            2. 尿液樣本采集和儲存
            3. 實驗儀器與設備
            4. 主要實驗試劑與耗材
        二、實驗方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜輔助溶液內蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法測定多肽濃度
            5. TMT定量標記和離線高pH反相高效液相色譜分離
            6. LC-MS/MS分析
            7. 數據分析和生物信息學分析
    實驗結果
        一、各組蛋白的定性定量分析
        二、篩選差異蛋白
        三、生物信息學分析
    討論
    結論
    參考文獻
第二部分 基于PRM技術對卵巢子宮內膜異位癥尿液標本差異蛋白的驗證
    材料與方法
        一、實驗材料
            1. 標本來源及樣本收集、儲存
            2. 實驗儀器與設備
            3. 主要實驗試劑與耗材
        二、實驗方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜輔助溶液內蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法測定多肽濃度
            5. PRM多肽篩選
            6. PRM驗證
            7. PRM數據分析
            8. 統(tǒng)計分析
    實驗結果
        一、PRM驗證結果
        二、ROC曲線結果
    討論
    結論
    參考文獻
第三部分 子宮內膜異位癥尿蛋白標志物研究進展(綜述)
    1. 可溶性血管內皮生長因子受體-1
    2. 細胞角蛋白19
    3. 尿多肽表達譜
    4. 基質金屬蛋白酶
    5. 維生素D結合蛋白
    6. α-烯醇化酶
    7. 血管生成因子
    參考文獻
附表
致謝
發(fā)表文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]基于質譜的定量蛋白質組學技術發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 牟永瑩,顧培明,馬博,閆文秀,王道平,潘映紅.  生物技術通報. 2017(09)
[2]定量蛋白質組學分析方法[J]. 錢小紅.  色譜. 2013(08)
[3]基于穩(wěn)定同位素標記的蛋白質組學定量方法研究進展[J]. 周愿,單亦初,張麗華,張玉奎.  色譜. 2013(06)
[4]子宮內膜異位癥的研究與設想[J]. 郎景和.  中華婦產科雜志. 2003(08)



本文編號：3192354