一.研究背景及目的子宮內(nèi)膜異位癥（簡(jiǎn)稱(chēng)內(nèi)異癥）是婦科常見(jiàn)疾病,大約影響10-15%的生育年齡女性,造成一系列盆腔癥狀,比如月經(jīng)紊亂、慢性盆腔痛、性交痛及不孕等。子宮內(nèi)膜異位癥是損害年輕女性生育功能和社會(huì)功能的主要原因之一,早期診斷可以提高治療效果,盡早恢復(fù)內(nèi)異癥病人的正常生活。目前診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是腹腔鏡手術(shù)。由于缺少有效的早期診斷手段,內(nèi)異癥常被漏診,或者診斷延遲。因此急切需要兼具高特異性和敏感性的無(wú)創(chuàng)性子宮內(nèi)膜異位癥診斷標(biāo)志物。盡管有大量關(guān)于內(nèi)異癥生物標(biāo)志物的研究,但沒(méi)有一個(gè)單獨(dú)標(biāo)志物或一組標(biāo)志物有足夠的特異性和敏感性可以用于內(nèi)異癥無(wú)創(chuàng)性診斷實(shí)驗(yàn)。對(duì)于內(nèi)異癥標(biāo)志物的研究主要集中于子宮內(nèi)膜和血清,只有11%的子宮內(nèi)膜異位癥標(biāo)志物的研究與尿液有關(guān)。蛋白質(zhì)組學(xué)定量技術(shù)是疾病標(biāo)志物篩選的常用技術(shù)之一,能夠?qū)εR床樣品中差異變化蛋白質(zhì)進(jìn)行高通量篩選和后期驗(yàn)證。串聯(lián)質(zhì)量標(biāo)簽（TMT）和平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)（PRM）分別是非靶向和靶向定量蛋白質(zhì)組學(xué)的代表技術(shù)。本課題采用TMT-PRM技術(shù)篩查策略,對(duì)卵巢內(nèi)異癥癥的尿液標(biāo)本進(jìn)行全面的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,通過(guò)與正常人、卵巢良性腫瘤、卵巢惡性腫瘤對(duì)比,來(lái)尋找兼具高特異性... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 基于TMT技術(shù)對(duì)卵巢子宮內(nèi)膜異位癥尿液標(biāo)本差異蛋白的篩查
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
            1. 標(biāo)本來(lái)源
            2. 尿液樣本采集和儲(chǔ)存
            3. 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
            4. 主要實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
        二、實(shí)驗(yàn)方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜輔助溶液內(nèi)蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法測(cè)定多肽濃度
            5. TMT定量標(biāo)記和離線高pH反相高效液相色譜分離
            6. LC-MS/MS分析
            7. 數(shù)據(jù)分析和生物信息學(xué)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、各組蛋白的定性定量分析
        二、篩選差異蛋白
        三、生物信息學(xué)分析
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 基于PRM技術(shù)對(duì)卵巢子宮內(nèi)膜異位癥尿液標(biāo)本差異蛋白的驗(yàn)證
    材料與方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
            1. 標(biāo)本來(lái)源及樣本收集、儲(chǔ)存
            2. 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
            3. 主要實(shí)驗(yàn)試劑與耗材
        二、實(shí)驗(yàn)方法
            1. 尿液蛋白提取
            2. 膜輔助溶液內(nèi)蛋白酶切
            3. Oasis C18固相萃取
            4. BCA法測(cè)定多肽濃度
            5. PRM多肽篩選
            6. PRM驗(yàn)證
            7. PRM數(shù)據(jù)分析
            8. 統(tǒng)計(jì)分析
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、PRM驗(yàn)證結(jié)果
        二、ROC曲線結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 子宮內(nèi)膜異位癥尿蛋白標(biāo)志物研究進(jìn)展(綜述)
    1. 可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-1
    2. 細(xì)胞角蛋白19
    3. 尿多肽表達(dá)譜
    4. 基質(zhì)金屬蛋白酶
    5. 維生素D結(jié)合蛋白
    6. α-烯醇化酶
    7. 血管生成因子
    參考文獻(xiàn)
附表
致謝
發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于質(zhì)譜的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 牟永瑩,顧培明,馬博,閆文秀,王道平,潘映紅.  生物技術(shù)通報(bào). 2017(09)
[2]定量蛋白質(zhì)組學(xué)分析方法[J]. 錢(qián)小紅.  色譜. 2013(08)
[3]基于穩(wěn)定同位素標(biāo)記的蛋白質(zhì)組學(xué)定量方法研究進(jìn)展[J]. 周愿,單亦初,張麗華,張玉奎.  色譜. 2013(06)
[4]子宮內(nèi)膜異位癥的研究與設(shè)想[J]. 郎景和.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2003(08)



本文編號(hào)：3192354