目的:TIGAR作為糖酵解的抑制蛋白,在調(diào)節(jié)細胞代謝和氧化應(yīng)激中發(fā)揮重要作用,而骨骼肌中TIGAR蛋白高表達。因此,本研究探索骨骼肌中的TIGAR對骨骼肌的功能的影響及可能的機制。方法:我們分離不同部位的骨骼肌檢測TIGAR的表達。在骨骼肌相關(guān)的生理和病理狀態(tài)下檢測骨骼肌中的TIGAR是否變化。采用負重5%的小鼠力竭游泳模型在TIGAR敲除的小鼠中檢測小鼠運動耐力。檢測力竭游泳后NADPH、乳酸、糖原和ATP含量的改變。采用代謝籠觀察小鼠代謝方式改變。根據(jù)HE染色、RT-qPCR實驗、Western20blot實驗、免疫組化和免疫熒光觀察TIGAR對小鼠肌纖維類別的改變。采用電鏡、RT-qPCR實驗和Western20blot實驗檢測TIGAR敲除小鼠中線粒體形態(tài)數(shù)目和功能的改變。采用免疫熒光和CO-IP實驗檢測SIRT1/PGC1α的功能和活性。在力竭游泳小鼠中免疫熒光觀察TIGAR與線粒體的共定位情況。用Western20blot和免疫電鏡觀察TIGAR向線粒體轉(zhuǎn)位。構(gòu)建線粒體定位TIGAR。用lipo202000轉(zhuǎn)染TIGAR和線粒體定位TIGAR,觀察兩者對線粒體生成的影響。采... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 試劑配制
    2.3 實驗動物
    2.4 實驗方法
    2.5 統(tǒng)計分析
第三章 實驗結(jié)果與結(jié)論
    3.1 TIGAR在骨骼肌中表達最高
    3.2 GEO分析TIGAR在肌肉生理和病理狀態(tài)下的變化
    3.3 TIGAR在肌肉不同病理狀態(tài)下的表達變化
    3.4 TIGAR增加小鼠力竭游泳能力
    3.5 力竭游泳后TIGAR KO小鼠代謝物質(zhì)的檢測
    3.6 TIGAR KO小鼠線粒體功能降低
    3.7 TIGAR促進小鼠type IIA型肌纖維的改變
    3.8 TIGAR增加了線粒體數(shù)目
    3.9 TIGAR KO小鼠中SIRT1-PGC1α活性降低
    3.10 TIGAR存在線粒體中
    3.11 力竭游泳能夠促進TIGAR與線粒體定位
    3.12 胞漿TIGAR促進SIRTI-PGC1α
    3.13 線粒體TIGAR改善線粒體功能
    結(jié)論和下一步研究計劃
第四章 討論
參考文獻
綜述
    參考文獻
英文縮寫詞表
攻讀學(xué)位期間發(fā)表及在投的論文
攻讀學(xué)位期間參與的學(xué)術(shù)會議和研究項目
致謝



本文編號：3178742